近來來,豬的免疫性抑制性疾病成為危害養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展的一類重要疾病,而豬偽狂犬病則是其中之一,并且日益成為規(guī)模養(yǎng)豬(場)戶最為頭痛,最為疏忽,而不理解此病。并且具有重大經(jīng)濟意義的傳染病之一。它是造成免疫失敗的重要原因之一,給我國的養(yǎng)豬戶生產(chǎn)造成了巨大的經(jīng)濟損失。 病病原偽狂犬病毒屬于皰疹病毒科(Herpesviridae)、豬皰疹病毒屬,病毒粒子為圓形,直徑150~180nm,核衣殼直徑為105~110nm。病毒粒子的最外層是病毒囊膜,它是由宿主細(xì)胞衍生而來的脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)。囊膜表面有長約8~10nm呈放射狀排列的纖突。 偽狂犬病毒是皰疹病毒科中抵抗力較強的一種。在37℃下的半衰期為7h,8℃可存活46天,而在25℃干草、樹枝、食物上可存活10~30天,但短期保存病毒時,4℃較-15℃和-20℃凍結(jié)保存更好。病毒在pH4~9之間保持穩(wěn)定。5%石炭酸經(jīng)2min滅活,但0.5%石炭酸處理32天后仍具有感染性。0.5%~1%氫氧化鈉迅速使其滅活。對乙醚、氯仿等脂溶劑以及福爾馬林和紫外線照射敏感。 偽狂犬病毒V只有一個血清型,但不同毒株在毒力和生物學(xué)特征等方面存在差異。偽狂犬病毒具有泛嗜性,能在多種組織培養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)增殖,其中以兔腎和豬腎細(xì)胞(包括原I代細(xì)胞和傳代細(xì)胞系)最為敏感,并引起明顯的細(xì)胞病變,細(xì)胞腫脹變圓,開始呈散在的灶狀,隨后逐漸擴展,直至全部細(xì)胞圓縮脫落,同時有大量多核巨細(xì)胞形成。細(xì)胞病變出現(xiàn)快,當(dāng)病毒接種量大時,在18~24h后即能看到典型的細(xì)胞病變。 實驗動物也可用于病毒的分離。在兔、1日齡小鼠和組織培養(yǎng)之間對偽狂犬病毒的敏感性無顯著差異,但成年鼠與新生鼠相比有較強的抵抗力。雖然雞胚對偽狂犬病毒不很敏感,但應(yīng)用雞胚絨毛尿囊膜接種是最早用于病毒增殖和傳代的方法。 偽狂犬病毒基因組是線狀雙鏈DNA分子,大小約150kb,平均G+C含量高達(dá)74%,具有典型的皰疹病毒基因組結(jié)構(gòu)特征,由獨特長區(qū)段、獨特短區(qū)段及位于US兩側(cè)的末端重復(fù)序列(TR)和內(nèi)部重復(fù)序列(IR)組成。 2222流行病學(xué)偽狂犬病毒在全世界廣泛分布。偽狂犬病自然發(fā)生于豬、牛、綿羊、犬和貓,另外,多種野生動物、肉食動物也易感。水貂、雪貂因飼喂含偽狂犬病毒的豬下腳料也可引起偽狂犬病的暴發(fā)。實驗動物中家兔最為敏感,小鼠、大鼠、豚鼠等也能感染。關(guān)于人感染偽狂犬病毒的報道很少,并且都不是以病毒分離為報道依據(jù)。如土耳其及我國臺灣曾報道有血清學(xué)反應(yīng)陽性者。歐洲也曾報告數(shù)例因皮膚傷口接觸病料組織而感染,主要表現(xiàn)為局部有發(fā)癢,未曾報告有死亡。最新的報道見于1992年,在波蘭因直接接觸偽狂犬病毒而感染的工人,首先是手部先出現(xiàn)短暫的瘙癢,后擴展至背部和肩部。 豬是偽狂犬病毒的貯存宿主,病豬、帶毒豬以及帶毒鼠類為本病重要傳染源。不少學(xué)者認(rèn)為,其他動物感染本病與接觸豬、鼠有關(guān)。 在豬場,偽狂犬病毒主要通過已感染豬排毒而傳給健康豬,另外,被偽狂犬病毒污染的工作人員和器具在傳播中起著重要的作用。而空氣傳播則是偽狂犬病毒擴散的最主要途徑,但到底能傳播多遠(yuǎn)還不清楚。人們還發(fā)現(xiàn)在鄰近有偽狂犬病發(fā)生的豬場周圍放牧的牛群也能發(fā)病,在這種情況下,空氣傳播是惟一可能的途徑。在豬群中,病毒主要通過鼻分泌物傳播,另外,乳汁和精液也是可能的傳播方式。 除豬以外的其他動物感染偽狂犬病毒后,其結(jié)果都是死亡。豬發(fā)生偽狂犬病后,其臨診癥狀因日齡而異,成年豬一般呈隱性感染,懷孕母豬可導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎和種豬不育等綜合癥候群。15日齡以內(nèi)的仔豬發(fā)病死亡率可達(dá)100%,斷奶仔豬發(fā)病率可達(dá)40%,死亡率20%左右;對成年肥豬可引起生長停滯、增重緩慢等。 偽狂犬病的發(fā)生具有一定的季節(jié)性,多發(fā)生在寒冷的季節(jié),但其他季節(jié)也有發(fā)生。 3臨床癥狀偽狂犬病毒的臨診表現(xiàn)主要取決于感染病毒的毒力和感染量,以及感染豬的年齡。其中,感染豬的年齡是最主要的。與其他動物的皰疹病毒一樣,幼齡豬感染偽狂犬病毒后病情最重。 新生仔豬感染偽狂犬病毒會引起大量死亡,臨診上新生仔豬第1天表現(xiàn)正常,從第2天開始發(fā)病,3~5天內(nèi)是死亡高峰期,有的整窩死光。同時,發(fā)病仔豬表現(xiàn)出明顯的神經(jīng)癥狀、昏睡、嗚叫、嘔吐、拉稀,一旦發(fā)病,1~2日內(nèi)死亡。剖檢主要是腎臟布滿針尖樣出血點,有時見到肺水腫、腦膜表面充血、出血。15日齡以內(nèi)的仔豬感染本病者,病情極嚴(yán)重,發(fā)病死亡率可達(dá)100%。仔豬突然發(fā)病,體溫上升達(dá)41℃以上,精神極度委頓,發(fā)抖,運動不協(xié)調(diào),痙攣,嘔吐,腹瀉,極少康復(fù)。斷奶仔豬感染偽狂犬病毒,發(fā)病率在20%~40%左右,死亡率在10%~20%左右,主要表現(xiàn)為神經(jīng)癥狀、拉稀、嘔吐等。成年豬一般為隱性感染,若有癥狀也很輕微,易于恢復(fù)。主要表現(xiàn)為發(fā)熱、精神沉郁,有些病豬嘔吐、咳嗽,一般于4~8天內(nèi)完全恢復(fù)。 懷孕母豬可發(fā)生流產(chǎn)、產(chǎn)木乃伊胎兒或死胎,其中以死胎為主無論是頭胎母豬還是經(jīng)產(chǎn)母豬都發(fā)病,而且沒有嚴(yán)格的季節(jié)性,但以寒冷季節(jié)即冬末春初多發(fā)。據(jù)近年來的報道,奇癢癥狀以往在豬罕見,但目前則??梢姷健?/div> 偽狂犬病的另一發(fā)病特點是表現(xiàn)為種豬不育癥。近幾年發(fā)現(xiàn)有的豬場春季暴發(fā)偽狂犬病,出現(xiàn)死胎或斷奶仔豬患偽狂犬病后,緊接著下半年母豬配不上種,返情率高達(dá)90%,有反復(fù)配種數(shù)次都屢配不上的。此外,公豬感染偽狂犬病毒后,表現(xiàn)出睪丸腫脹、萎縮,喪失種用能力。 4病理變化偽狂犬病毒感染一般無特征性病變。眼觀主要見腎臟有針尖狀出血點,其他肉眼病變不明顯。可見不同程度的卡他性胃炎和腸炎,中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀明顯時,腦膜明顯充血,腦脊髓液量過多,肝、脾等實質(zhì)臟器常可見灰白色壞死病灶,肺充血、水腫和壞死點。子宮內(nèi)感染后可發(fā)展為溶解壞死性胎盤炎。 組織學(xué)病變主要是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的彌散性非化膿性腦膜腦炎及神經(jīng)節(jié)炎,有明顯的血管套及彌散性局部膠質(zhì)細(xì)胞壞死。在腦神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)、鼻咽黏膜、脾及淋巴結(jié)的淋巴細(xì)胞內(nèi)可見核內(nèi)嗜酸性包涵體和出血性炎癥。有時可見肝臟小葉周邊出現(xiàn)凝固性壞死。肺泡隔核小葉質(zhì)增寬,淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞浸潤。 5診斷鑒別根據(jù)疾病的臨診癥狀,結(jié)合流行病學(xué),可做出初步診斷,確診必須進(jìn)行實驗室檢查。同時要注意與豬細(xì)小病毒、流行性乙型腦炎病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬瘟病毒、弓形蟲及布魯氏菌等引起的母豬繁殖障礙相區(qū)別。 分離1.病毒分離鑒定病毒的分離是診斷偽狂犬病的可靠方法?;疾游锏亩喾N病料組織如腦、心、肝、脾、肺、腎、扁桃體等均可用于病毒的分離,但以腦組織和扁桃體最為理想,另外,鼻咽分泌物也可用于病毒的分離。病料處理后可直接接種敏感細(xì)胞,如豬腎傳代細(xì)胞(PK-15和IBRS-2)、倉鼠腎傳代細(xì)胞 (BHK-21)或雞胚成纖維細(xì)胞(CEF),在接種后24~72小時內(nèi)可出現(xiàn)典型的細(xì)胞病變。若初次接種無細(xì)胞病變,可盲傳3代。不具備細(xì)胞培養(yǎng)條件時,可將處理的病料接種家兔或小鼠,根據(jù)家兔或小鼠的臨診表現(xiàn)做出判定,但小鼠不如家兔敏感。分離到病毒后再用標(biāo)準(zhǔn)陽性血清做中和試驗以確診本病。 切片2.組織切片熒光抗體檢測取患病動物的病料如腦或扁桃體的壓片或冰凍切片,用直接免疫熒光檢查。其優(yōu)點是快速,在幾小時內(nèi)即可獲得可靠結(jié)果,對于新生仔豬,其敏感性與病毒分離相當(dāng),但對于育肥豬與成年豬,該法則不如病毒分離敏感。 PCR3.PCR檢測豬偽狂犬病病毒利用PCR可從患病動物的分泌物如鼻咽拭子或組織病料中擴增豬偽狂犬病病毒的基因,從而對患病動物進(jìn)行確診。PCR與病毒分離鑒定相比,具有快速、敏感、特異性強等優(yōu)點,能同時檢測大批量的樣品,并且能進(jìn)行活體檢測,適合于臨診診斷。 血清學(xué)4.血清學(xué)診斷多種血清學(xué)方法可用于偽狂犬病的診斷,應(yīng)用最廣泛的有中和試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗、乳膠凝集試驗、補體結(jié)合試驗及間接免疫熒光等。其中血清中和試驗的特異性、敏感性都是最好的,并且被世界動物衛(wèi)生組織(OIE)列為法定的診斷方法。但由于中和試驗的技術(shù)條件要求高、時間長,所以主要是用于實驗室研究。酶聯(lián)免疫吸附試驗同樣具有特異性強、敏感性高的特點,3~4h內(nèi)可得出試驗結(jié)果,并可同時檢測大批量樣品,廣泛用于偽狂犬病的臨診診斷。另外,近幾年來,乳膠凝集試驗以其獨特的優(yōu)點也在臨診上廣泛應(yīng)用,操作極其簡便,幾分鐘之內(nèi)便可得出試驗結(jié)果。 鑒別5.鑒別診斷豬偽狂犬病病毒鑒別診斷方法是在使用基因標(biāo)志疫苗的基礎(chǔ)上應(yīng)用的一類診斷方法。由于PRV中存在多個非心需糖蛋白基因,缺失這些基因的病毒突變株不能產(chǎn)生被缺失基因所編碼的糖蛋白,但又不影響病毒在細(xì)胞上的增殖與免疫原性。將這種基因缺失標(biāo)志疫苗注射動物后,動物不能產(chǎn)生針對缺失蛋白的抗體。因此,可通過血清學(xué)方法將自然感染野毒的血清學(xué)陽性豬與注苗豬區(qū)分開來。目前,缺失疫苗缺失的糖蛋白基因主要為gE和gG基因,也有缺失gC、gB基因的。針對缺失的糖蛋白已利用大腸桿菌或酵母等表達(dá)系統(tǒng)的表達(dá)產(chǎn)物建立了相應(yīng)的鑒別診斷方法:gE-ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)、gG-ELISA、gC-ELISA、gB-ELISA以及 gE-LAT(乳膠凝集試驗)、gG、LAT等,實驗證實這些方法的特異性強、敏感性高,可用于臨診檢測,同時乳膠凝集還具有簡單、快速的特點。目前,在我國已有g(shù)E-ELISA、gG-ELISA和gE-LAT、gG-LAT問世。 6防治措施本病尚無特效治療藥物,緊急情況下,用高免血清治療,可降低死亡率。疫苗免疫接種是預(yù)防和控制偽狂犬病的根本措施,目前國內(nèi)外已研制成功偽狂犬的常規(guī)弱毒疫苗、滅活疫苗以及基因缺失疫苗(包括基因缺失弱毒苗和滅活苗),這些疫苗都能有效地減輕或防止偽狂犬病的臨診癥狀,從而減少該病造成的經(jīng)濟損失。 消滅牧場中的鼠類,對預(yù)防本病有重要意義。同時,還要嚴(yán)格控制犬、貓、鳥類和其他禽類進(jìn)入豬場,嚴(yán)格控制人員來往,并做好消毒工作及血清學(xué)監(jiān)測等,這樣對本病的防制也可起到積極的推動作用。此外,對豬群采血做血清中和試驗,陽性者隔離,以后淘汰。以3~4周為間隔反復(fù)進(jìn)行,一直到兩次試驗全部陰性為止。另外一種方式是培育健康豬,母豬產(chǎn)仔斷乳后,盡快分開,隔離飼養(yǎng),每窩小豬均須與其他窩小豬隔離飼養(yǎng)。到16周齡時,做血清學(xué)檢查(此時母源抗體轉(zhuǎn)為陰性),所有陽性豬淘汰,30日后再做血清學(xué)檢查,把陰性豬合成較大群,最終建立新的無病豬群。 7豬場凈化技術(shù)要點1、保證各個階段豬只的合理營養(yǎng)供給。 2、做好清潔、消毒工作。及時清理糞便,避免產(chǎn)生過多有害氣體污染環(huán)境。 3、做好密度、通風(fēng)、冬天保溫及夏天降溫管理。夏天母豬舍和公豬舍都采取水簾式降溫和排風(fēng)扇抽風(fēng)抽濕的方法,讓豬只處于舒適的環(huán)境。 4、全進(jìn)全出及同日齡階段飼養(yǎng)。全進(jìn)全出在疾病控制上起著很重要的作用,所以我們要求全進(jìn)全出一定要徹底,包括豬群、工作人員、工具等。 5、每個環(huán)節(jié)設(shè)一個專用的病豬隔離場所,及時把病豬隔離出來,這無論是對病豬的病情控制和對未感染豬群都是很好的。 6、消滅可能的傳播媒介。豬場嚴(yán)格禁止飼養(yǎng)犬、貓及家禽,杜絕犬、貓、雞及其他鳥類進(jìn)入豬場,定期進(jìn)行場內(nèi)滅鼠、滅蠅工作。 7、對全場種豬(含公母種豬及后備豬群)進(jìn)行臨床觀察及生產(chǎn)繁殖性能的調(diào)查。 8、合理地使用疫苗,并根據(jù)抗體水平?jīng)Q定免疫程序。
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