HIV疫苗進展講座

水共山華 2014-11-19

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200 多年前，英國醫(yī)生 Edward Tenner 從牛痘中制備活疫苗用于防治天花獲得成功。受此啟發(fā)，自 1983 年首次發(fā)現(xiàn) HIV 并于 1987 年研制出第一個愛滋病侯選疫苗，嘗試了所有已知疫苗的構(gòu)建方法，并進行了無數(shù)次體內(nèi)和體外試驗，試圖尋找有效的愛滋病疫苗。

一、研制 AIDS 疫苗的困難所在

縱觀愛滋病疫苗的研究歷史，可以總結(jié)出疫苗研制中存在如下困難：1、有 HIV-1 及 HIV-2 兩種病毒。二者的外殼蛋白無免疫交叉反應，前者有不同的亞型，主要是非洲 AIDS 的病原，HIV-2 主要是北美及其他地區(qū)的病原，不同地區(qū)需要不同的疫苗；2、個體在感染 HIV 后，該病毒在人體內(nèi)不斷發(fā)生基因變異；3、HIV 是經(jīng)生殖道及血液傳播，因而有效的疫苗應同時誘導黏膜免疫及系統(tǒng)免疫；4、HIV 既是 cell—free 病毒又是 cell-associated 病毒，有效的疫苗既能誘導抗體產(chǎn)生又能誘導細胞介導性免疫反應。

二、 AIDS 病疫苗的研制現(xiàn)狀

1、活載體疫苗

不僅可引起細胞免疫（CD+CTL），還可模擬 HIV 的天然構(gòu)象，且具有良好的安全性而倍受重視。其中以金絲雀痘疫苗（canary——pox virus）作為載體的侯選疫苗更受青睞。近年對重組金絲雀痘的構(gòu)思進行了廣泛的人體試驗。這些研究顯示重組金絲雀痘具有免疫原性及安全性，能誘導 70％的接種者產(chǎn)生抗體，30％的接種者產(chǎn)生可檢測到的 CTL 應答。美國 AIDS 疫苗評價小組 022 科學實驗報告小組對金絲雀痘病毒 -env-gag-pro 聯(lián)合重組 rgp120 亞單位的免疫原性進行研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn) 42 名接受金絲雀痘病毒 -env-gag-pro 重組疫苗的受試者，有 26 名產(chǎn)生了 CD8+ 細胞免疫，而在 17 名只接受金絲雀痘病毒或 rgp120 疫苗的受試者只有 3 名產(chǎn)生了上述應答。rgp120 的免疫接種者并沒有增強 CD8CTL 對 HIV-1 包膜蛋白的應答，但卻極大增強了對 HIV-MN 株所產(chǎn)生的中和抗體的效價及應答頻率。金絲雀痘病毒 -env-gag-pro 與 rgp120 的重組疫苗使 91％的受試者產(chǎn)生中和抗體，62％受試者產(chǎn)生了 CD8+T 細胞的免疫應答。另外，可作載體的痘類病毒還有牛痘病毒、腺病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒、流感病毒、a－病毒（semtiki 森林病毒和委內(nèi)瑞拉貓腦炎病毒）可做載體的菌類則有分枝桿菌、沙門菌、志賀菌、李斯特菌。痘類病毒最早應用的是對消滅天花作出主要貢獻的牛痘病毒。有研究顯示，重組牛痘病毒在非人類靈長目動物中可誘發(fā)針對 HIV 及 SIV 強烈的 CTL 應答。牛痘病毒可在免疫抑制人群中播散，有時導致致命性的腦炎。修飾的牛痘病毒安卡拉株的安全性大為提高，可誘發(fā)較強的免疫應答?，F(xiàn)今，最有前景的活載體疫苗則是基因缺失性腺病毒，可用做基因治療的載體。血清５型腺病毒不論是在小鼠和非人類靈長目中都顯示了強有力的免疫原性。

2、誘導黏膜和全身免疫的疫苗的研究進展

因 HIV 是經(jīng)生殖道和血液傳播，如何阻斷這兩條途徑成為理想疫苗應具有的條件。直腸和子宮腔的黏膜上皮，可能是感染的最早部位，這些組織或者宮頸或尿道中的淋巴細胞或巨噬細胞都有可能被感染細胞或游離病毒首先感染。Belgakov 等用合成的多決定簇的 HIV 的 HIV 多肽并以霍亂毒素作為佐劑行直腸內(nèi)免疫，發(fā)現(xiàn)在腸道黏膜局部和全身均引起長時間 CTL 記憶，而全身性免疫時僅在脾生產(chǎn)了特異性 CTL。因此認為用合成型的 HIV 多肽疫苗進行腸道內(nèi)局部免疫可保護小鼠免受能表達 HIV－1ⅢBgp160 的重組牛痘病毒的感染。

3、免疫增強和高效接種

一些輔助刺激因子與免疫刺激序列，細胞因子如粒細胞－巨噬細胞集落刺激因子（GM-CSF），IFN-y，IL-2，IL-4 等和趨化因子如倍它趨化因子、脂質(zhì)體、佐劑等對于免疫增強和高效接種的作用進行了很多實驗性的研究，開拓了 HIV 疫苗的研究領(lǐng)域。

4、DNA 疫苗及包膜亞單位疫苗

基因槍與電穿孔接種的發(fā)展無疑為以后實現(xiàn) DNA 疫苗的無針免疫提供了新的發(fā)展道路。采用基因槍接種 DNA 疫苗（編碼 HIVgp120 或 SIVgp120）誘導的 gp120 特異性抗體終點滴度可提高 10 倍。最近發(fā)展的接種后電穿孔刺激，可以顯著減少接種次數(shù)，降低接種量（低至 1 微克），并使質(zhì)粒 DNA 的攝取和表達水平提高 100 倍以上。Bay-ballk 等研究顯示，對 CD4+ 細胞功能受限的 AIDS 患者進行免疫，電穿孔是極為有用的方法。另外，還有包膜亞單位疫苗。Pitisuttithum P 將 gp120Thaie 與 SF2 制成重組疫苗，結(jié)果發(fā)現(xiàn) 84％和 82％受試者對上述兩種抗原產(chǎn)生了中和性抗體。值得一提的是，這種亞單位聯(lián)合疫苗已被證明無效。如 2003 年 VAXGEN 公司在泰國進行的人體實驗。

三、評價與展望

人們總是習慣認為阻止病毒感染人體的疫苗才市有效的疫苗，任何不符合此要求的疫苗都是不完善的。阻止 HIV 感染，抗原必須能誘導針對 HIV 多樣性的抗體?，F(xiàn)今我們還不能誘導這樣的免疫反應。用一些新免疫原如質(zhì)粒 DNA、重組基因缺陷型腺病毒、細胞因子擴增型 DNA、重組 MVA 等對猴進行免疫接種，發(fā)現(xiàn)他們對高度致病性 AIDS 病毒的控制能力得到增強。這些疫苗沒有誘導出中和抗體，卻誘導出病毒特異性 CTL 應答，并使接種此類疫苗的動物病毒復制得到部分控制，而高水平病毒復制會加速疾病的進展。接踵此類疫苗后感染 HIV，其病程進展會有所減慢，并在他們的分泌物中，復制性病毒也會減少，因為感染者傳染給未感染者的可能性與感染者血中或分泌物中的病毒含量有關(guān)。因而 CTL 誘導性免疫會減慢 HIV 在人群中的傳播，尤其對那些缺乏醫(yī)療設(shè)施、HIV 感染者無法得到抗病毒藥物的地區(qū)來說意義重大。雖然在短時間內(nèi)不能獲得能阻止 HIV 感染的疫苗，但有一點應該確信，研究出減緩病情進展的疫苗仍是有可能的。

河南省上蔡縣中醫(yī)院在 2000 年 6 月～2003 年 7 月間，對 60 例艾滋?。?/span>AIDS）患者使用虛實并治且以補虛為主的中醫(yī)療法進行治療，取得總有效率 86.7% 的滿意效果。

艾滋?。?/span>AIDS）是艾滋病毒（HIV）感染引起的后天免疫缺陷綜合征，其潛伏期由數(shù)月至半年，最長可達 10 年之久。由于上蔡縣是 HIV/AIDS 的高發(fā)區(qū)，病源較多，故對 HIV/AIDS 救治工作開展較早。

研究人員將 60 例診斷為 AIDS 及艾滋病相關(guān)綜合征（ARC）的患者分肺胃陰虛型（18 例）、脾胃虛損型（26 例）、脾腎兩虧型（9 例）、熱盛痰蒙型（7 例）4 個證型進行中醫(yī)藥治療。其中，肺胃陰虛型以參苓白術(shù)散、百合固金湯加減合生脈飲，或六味地黃丸治療。脾胃虛損型以補中益氣湯、小柴胡湯、溫膽湯加減，并配服香砂六君子丸。脾腎兩虧型以四君子湯合四神丸加減，或同時服用金匱腎氣丸或十全大補丸等。熱盛痰蒙型以安宮牛黃丸、鉤藤飲加減。每日 1 劑，日兩次。

結(jié)果表明，受治艾滋病患者中有 52 例全身癥狀或?qū)嶒炇覚z查（包括病毒載量、CD4T 淋巴細胞計數(shù)），較治療前有很大改善，總有效率為 86.7％。說明中醫(yī)藥治療 AIDS 及 ARC，確實能改善癥狀、體征，提高機體免疫功能，減少機會性感染，明顯提高患者的生存質(zhì)量，延長生命期，且療效顯著，無明顯毒副作用。

研究人員認為，中醫(yī)藥治療 AIDS 的關(guān)鍵是必須遵循虛實并治以補虛為主的原則，即《內(nèi)經(jīng)》“虛者補之”，“損者益之”的原則，不同病期攻補偏重不同。早期患者辨證屬毒熱較盛，肺胃氣陰兩虛，可給予清熱解毒之品如金銀花、連翹、黃芩、田基黃、蒲公英等，但同時還要養(yǎng)陰潤燥益氣，佐以祛邪而不傷正的藥物，如生地黃、沙參、麥冬、天花粉、太子參等。中期患者肺脾氣虛，應以補益脾氣藥為主，如黃芪、黨參、山藥、枸杞子、甘草，適當加入淡滲利濕之品，如茯苓、白術(shù)、薏苡仁、澤瀉、車前子等。中晚期 AIDS 患者應補脾腎，溫陽益陰，如菟絲子、五味子、山茱萸、熟地黃、杜仲等藥，宜補而不宜瀉。艾滋病患者虛證雖可表現(xiàn)在氣血陰陽的不足，但其中氣虛，陰津虧損更為突出，雖有熱證卻多呈虛熱征象。機會性感染早期也可見邪熱毒邪入侵，但切不可寒涼過甚。補虛扶正可提高機體抗病能力，調(diào)整免疫功能，應貫穿于治療的全過程。

AIDS 的治療應著重于早、中期患者，即有輕度癥狀或有血象改變的早期患者，或中期 ARC 者，這樣才有可能達到控制疾病發(fā)展的目的。對晚期 AIDS 患者出現(xiàn)感染時，因其自身免疫系統(tǒng)功能已趨衰竭，即使使用扶正補劑，也往往是“虛不受補”，患者常很快死亡。再者，晚期患者隨病情加重而血瘀證加重，正如中醫(yī)所說“久病人絡(luò)”之表現(xiàn)，治療中適當加入丹參、牡丹皮、當歸、川芎、赤芍、姜黃等活血化瘀之品對改善癥狀，緩解疼痛十分有效。

研究人員指出，用中藥治療 AIDS 尚未發(fā)現(xiàn)明顯的毒副作用，且確實能改善癥狀、體征，提高機體免疫功能，減少機會性感染，提高生存質(zhì)量，延長生命期。所以，臨床上要堅持使用中醫(yī)藥治療 AIDS，且應深入研究，多方探討，總結(jié)規(guī)律。

附相關(guān)報道：

臺灣治療艾滋病中藥進入臨床試驗階段

臺灣一家生物科技公司利用中草藥開發(fā)的治療艾滋病藥物，日前獲臺灣“衛(wèi)生署”核準，并經(jīng)臺北 " 榮民總醫(yī)院 " 同意，進入臨床試驗階段。

臺灣科苗生物科技公司組織的一批醫(yī)學專家，經(jīng)過 12 年努力，研發(fā)出治療艾滋病的中藥配方，在德國和英國艾滋病研究中心試驗后獲得認可。該公司表示，如果在 6 個月內(nèi)完成臨床試驗，驗證治療成效，即可上市。

參與研發(fā)該藥的醫(yī)師介紹說，目前治療艾滋病仍以三合一雞尾酒療法為主，但有副作用。新研發(fā)的藥品由龍葵等５種中草藥中提取特殊成份制成口服藥劑，副作用低于雞尾酒療法，治療時可降低藥物對正常細胞的損害，保護免疫系統(tǒng)。

據(jù)科苗生物科技公司介紹，新研發(fā)的中藥在德國艾滋病中心完成的動物試驗及人體外淋巴球試驗顯示，使用該藥第三天可抑制 98％的艾滋病毒生長的能力，第四天可以 100％抑制病毒復制，且對人體無毒。目前國際艾滋病治療權(quán)威何大一已同意加入臨床試驗。

臺北 " 榮民總醫(yī)院 " 將利用該藥在半年內(nèi)對 60 位艾滋病毒感染者進行臨床試驗。

中泰合作研制抗艾中藥制劑有望上市

從第六屆中泰衛(wèi)生合作聯(lián)委會會議上獲悉，由中國和泰國合作研制的一種抗艾滋病純天然藥物已通過三期臨床試驗，有望于年內(nèi)獲得泰國衛(wèi)生部頒發(fā)的批準藥號，并在泰國上市。

衛(wèi)生部有關(guān)負責人說，試劑的中方研究機構(gòu) -- 中科院昆明植物研究所目前正在積極向國家藥監(jiān)部門申請，希望通過艾滋病藥物快速審批通道，使該制劑早日在中國上市。

衛(wèi)生部常務副部長高強在聯(lián)委會會議上說，希望中泰兩國衛(wèi)生醫(yī)藥科研人員進一步加強合作，挖掘中醫(yī)藥的優(yōu)勢，不斷完善研究成果，爭取使該藥物早日上市，造福兩國及全世界人民。

據(jù)國家中醫(yī)藥管理局國際合作司司長沈志祥介紹，這種名為 " 復方 SH" 的制劑由五味中藥組方。泰國衛(wèi)生部經(jīng)過 3 次嚴格的臨床試驗證明，該制劑能有效殺滅艾滋病病毒，使患者體內(nèi)病毒載量明顯下降，提高免疫細胞活性，增強人體機體免疫能力，無毒副作用。
中泰兩國近年來在衛(wèi)生醫(yī)學科學和藥品領(lǐng)域開展了卓有成效的合作。除艾滋病外，雙方的合作領(lǐng)域還涉及腫瘤藥物研究、草藥研究開發(fā)和精神衛(wèi)生等。

在 14 日上午的第六次聯(lián)委會會議上，中泰雙方?jīng)Q定，下一步將就食品與藥品進口的統(tǒng)一標準、抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥品原料生產(chǎn)以及艾滋病和非典防治開展合作。

編輯：西門吹血