小編正式開啟每日奉獻(xiàn)一菌的編輯模式，不要離開，總有一株菌是您希望了解的~哦，對了，據(jù)說法國生物梅里埃公司有一款小型儀器適用于分枝桿菌抗酸染色與熒光染色，噓，小編也只是聽說啦~

分枝桿菌

分枝桿菌屬是一類細(xì)長或略帶彎曲、為數(shù)眾多（包括54個種）呈分支狀生長的需氧桿菌。因其繁殖時呈分支狀生長故稱分枝桿菌。本屬細(xì)菌的主要特點(diǎn)是細(xì)胞壁含有大量脂類，可占其干重的60%，這與其染色性、抵抗力、致病性等密切相關(guān)。一般不易著色，若經(jīng)加溫或延長染色時間而著色后，能抵抗3%鹽酸酒精的脫色作用，故又稱抗酸桿菌。需氧生長，無鞭毛，無芽胞和莢膜。引起的疾病均為慢性，有肉芽腫病變的炎癥特點(diǎn)。
　　分枝桿菌的種類較多，包括結(jié)核分枝桿菌、非典型分枝桿菌和麻風(fēng)分枝桿菌。

　　一、結(jié)核分枝桿菌
　　結(jié)核分枝桿菌簡稱結(jié)核桿菌，是引起人和動物結(jié)核病的病原菌。目前已知在我國引起人類結(jié)核病的主要有人型和牛型結(jié)核分枝桿菌。
　?。ㄒ唬┥飳W(xué)特性
　　1.形態(tài)與染色：結(jié)核分枝桿菌為細(xì)長或略帶彎曲的桿菌，其大小約（1～4）μm×0.4μm。在培養(yǎng)基中可呈球狀或絲狀，陳舊培養(yǎng)物或干酪化的淋巴結(jié)中可見到分枝狀。抗酸染色時菌體呈紅色。顯微鏡下常堆積成團(tuán)、成束，排列無序，也有呈鏈狀、索狀者。革蘭染色陽性，既往在組織中曾發(fā)現(xiàn)革蘭陽性的非抗酸顆粒，接種動物可產(chǎn)生典型的結(jié)核病變，后被稱為Much顆粒。金胺“0”等染色，在熒光顯微鏡下菌體可發(fā)生熒光。
　　2.培養(yǎng)特性：本菌專性需氧，在無氧條件下迅速死亡，在5%～10%C0₂環(huán)境中可刺激其生長。燭缸不適合本菌培養(yǎng)，需用二氧化碳培養(yǎng)箱。培養(yǎng)溫度適應(yīng)范圍較大，35～40℃均可生長，最適溫度為35～37℃。最適pH為6.5～6.8。兼性胞內(nèi)寄生菌，在細(xì)胞內(nèi)外均可發(fā)育繁殖，強(qiáng)毒株可長期生存于巨噬細(xì)胞內(nèi)。生長時還需適當(dāng)?shù)臐穸取?/span>本菌生長緩慢，最快的分裂速度為18h一代。
　　在固體培養(yǎng)基上，一般需2～6周才能長出菌落。菌落呈干燥顆粒狀，不透明，乳白色或米黃色，表面呈皺紋狀，形似菜花。
　　在液體培養(yǎng)基中生長較快，多為表面生長，形成菌膜，且干燥易碎而沉于管底。此種特性與菌體的疏水性有關(guān)。有毒力菌株在液體培養(yǎng)基中可呈索狀生長，無毒株則無此現(xiàn)象。
　　結(jié)核分枝桿菌營養(yǎng)要求較高，必須在血清、卵黃、馬鈴薯、甘油以及某些無機(jī)鹽類的特殊培養(yǎng)基（羅氏培養(yǎng)基）上才能生長。但經(jīng)多次傳代或長期保存的菌種，也能在營養(yǎng)較簡單的培養(yǎng)基中生長。
　　據(jù)報道少量鐵質(zhì)可促進(jìn)結(jié)核分枝桿菌生長，鐵質(zhì)可使細(xì)菌產(chǎn)生分枝桿菌生長素。選擇培養(yǎng)基加有抗微生物藥物，以抑制標(biāo)本中雜菌、真菌等污染菌的生長。常用的選擇劑有結(jié)晶紫、孔雀綠、青霉素、萘啶酸、林可霉素、多粘菌素B等。
　　3.生化反應(yīng)：各型結(jié)核桿菌均不發(fā)酵糖類，能產(chǎn)生過氧化氫酶，耐熱觸酶試驗(yàn)、聚山梨酯-80水解試驗(yàn)和耐熱磷酸酶試驗(yàn)均為陰性，脲酶試驗(yàn)和中性紅試驗(yàn)均為陽性。人型結(jié)核分枝桿菌煙酸試驗(yàn)、硝酸鹽還原和煙酰胺酶試驗(yàn)均為陽性，借此可與牛型結(jié)核分枝桿菌鑒別。
　　4.抵抗力：對酒精敏感。
　　5.變異性：形態(tài)、菌落、毒力、免疫原性和耐藥性等變異。
　　毒力變異：卡介苗（BCG）——將有毒的牛型結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)于含有甘油、膽汁、馬鈴薯的培養(yǎng)基中經(jīng)13年傳種230代，獲得減毒菌株，再接種動物，不能致病而使其獲得免疫力。用于預(yù)防結(jié)核病。
　?。ǘ┡R床意義
　　1.致病性：該菌不產(chǎn)生內(nèi)毒素和外毒素和侵襲性酶?？稍诩?xì)胞內(nèi)、外生長與大量繁殖，致病物質(zhì)主要是莢膜、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)。結(jié)核分枝桿菌主要通過呼吸道、消化道和受損傷的皮膚侵入易感機(jī)體，引起多種組織器官的結(jié)核病，其中以通過呼吸道引起的肺結(jié)核最多見。肺部感染可分為原發(fā)性感染和繼發(fā)性感染。肺外感染可發(fā)生在腦、腎、腸、及腹膜等處。機(jī)體對菌體成分和其代謝產(chǎn)物引起免疫損傷以及變態(tài)反應(yīng)，從而導(dǎo)致一系列組織學(xué)上的病理變化。（機(jī)理）
　　2.Koch現(xiàn)象：機(jī)體對結(jié)核分枝桿菌的特異性免疫和遲發(fā)型超敏反應(yīng)同時存在。結(jié)核的特異性免疫是通過結(jié)核分枝桿菌感染后所產(chǎn)生，試驗(yàn)證明，將有毒結(jié)核分枝桿菌純培養(yǎng)物初次接種于健康豚鼠，不產(chǎn)生速發(fā)型過敏反應(yīng)，而經(jīng)10～14d，局部逐漸形成腫塊，繼而壞死，潰瘍，直至動物死亡。若在8～12周之前給動物接種減毒或小量結(jié)核分枝桿菌，第二次接種時則局部反應(yīng)提前，于2～3d內(nèi)發(fā)生紅腫硬結(jié)，后有潰瘍但很快趨于痊愈。此現(xiàn)象為Koch在1891年觀察到的，故稱為Koch現(xiàn)象。免疫性和遲發(fā)型超敏反應(yīng)由不同的T細(xì)胞亞群介導(dǎo)。
　　3.結(jié)核菌素試驗(yàn)：利用Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)的原理，檢測機(jī)體是否感染過結(jié)核桿菌。本實(shí)驗(yàn)對嬰幼兒結(jié)核病的診斷有意義。
　?。ㄈ┪⑸飳W(xué)檢驗(yàn)
　　1.標(biāo)本采集：根據(jù)感染部位的不同，可采集不同標(biāo)本。結(jié)核患者各感染部位的標(biāo)本中大多都混有其他細(xì)菌，為此應(yīng)采取能抑制污染菌的方法。若作分離培養(yǎng)，必須使用滅菌容器，患者應(yīng)停藥1～2天后再采集標(biāo)本?？刹杉?、尿、糞便、胃液、胸水、腹水、腦脊液、關(guān)節(jié)液、膿液等。
　　2.檢驗(yàn)方法
　?。?）涂片檢查
　　直接涂片包括：
　　1）薄涂片：挑取痰或其他處理過的標(biāo)本約0.01ml，涂沫于載玻片上，用萋-尼（熱染法）或Kinyoun（冷染法）抗酸染色，油鏡鏡檢，報告方法：-：全視野（或100個視野）未找到抗酸菌；+：全視野發(fā)現(xiàn)3～9個；++：全視野發(fā)現(xiàn)10～99個；+++：每視野發(fā)現(xiàn)1～9個；++++：每視野發(fā)現(xiàn)10個以上（全視野發(fā)現(xiàn)1～2個時報告抗酸菌的個數(shù)）。
　　2）厚涂片：取標(biāo)本0.1ml，涂片，抗酸染色、鏡檢，報告方法同上。
　　3）集菌涂片：主要方法有沉淀集菌法和漂浮集菌法。
　　4）熒光顯微鏡檢查法：制片同前。用金銨“O”染色，在熒光顯微鏡下分枝桿菌可發(fā)出熒光。
　?。?）分離培養(yǎng)
　　1）固體培養(yǎng)法：結(jié)核分枝桿菌的分離培養(yǎng)對于結(jié)核病的診斷、療效觀察及抗結(jié)核藥物的研究均具有重要意義。培養(yǎng)前針對標(biāo)本應(yīng)做適當(dāng)?shù)那疤幚恚缣悼勺?%H₂S0₄或4%NaOH處理20～30min，除去雜菌再接種于羅氏培養(yǎng)基，37℃5%～10%C0₂培養(yǎng)，定時觀察，至4～8周。此方法可準(zhǔn)確診斷結(jié)核桿菌。
　　2）液體培養(yǎng)法：Bactec-460半自動培養(yǎng)方法，Bact，Vitck-3D，全自動快速培養(yǎng)系統(tǒng)。
　　3）噬菌體法。
　?。?）基因快速診斷：PCR反向膜探針雜交，DNA探針，16s rRNA基因序列測定，高效液相色譜（HPLC）監(jiān)測分枝菌酸。簡便快速、靈敏度高、特異性強(qiáng)。但需注意實(shí)驗(yàn)器材的污染問題，以免出現(xiàn)假陽性。
　?。?）耐藥性：結(jié)核桿菌對多種抗結(jié)核藥物產(chǎn)生耐藥性，對利福平耐藥是由rpoB的基因突變，鏈霉素耐藥是和編碼核糖體S12蛋白的rpsl基因發(fā)生突變以及編碼16SrRNA的rrs基因發(fā)生突變，異煙肼的耐藥與過氧化氫酶和過氧化物酶的失活有關(guān)。
　　（四）治療原則
　　利福平、異煙肼、乙胺丁醇、鏈霉素為第一線藥物。利福平與異煙肼合用可以減少耐藥的產(chǎn)生。對于嚴(yán)重感染，可用吡嗪酰胺與利福平及異煙肼聯(lián)合使用。

　　二、非典型（非結(jié)核）分枝桿菌
　　分枝桿菌屬中除結(jié)核桿菌和麻風(fēng)桿菌以外，均稱為非結(jié)核分枝桿菌或非典型分枝桿菌。因其染色性同樣具有抗酸性亦稱非結(jié)核抗酸菌，其中有14～17個非典菌種能使人致病，可侵犯全身臟器和組織，以肺最常見，其臨床癥狀、X線所見很難與肺結(jié)核病區(qū)別，而大多數(shù)非典菌對主要抗結(jié)核藥耐藥，故該菌的感染和發(fā)病已成為流行病學(xué)和臨床上的主要課題，與發(fā)達(dá)國家一樣，我國近年來發(fā)現(xiàn)率也有增高趨勢。以第Ⅲ群鳥-胞內(nèi)分枝桿菌和第Ⅳ群偶發(fā)分枝桿菌及龜分枝桿菌為多。

　　三、麻風(fēng)分枝桿菌
　　麻風(fēng)分枝桿菌（M Leprae）簡稱麻風(fēng)桿菌，是麻風(fēng)病的病原菌。首先由Han-senl937年從麻風(fēng)病人組織中發(fā)現(xiàn)。麻風(fēng)分枝桿菌亦為抗酸桿菌，但較結(jié)核桿菌短而粗?？顾崛旧鶆?，呈束狀或團(tuán)狀排列。為典型的胞內(nèi)寄生菌，該菌所在的細(xì)胞胞質(zhì)呈泡沫狀稱麻風(fēng)細(xì)胞。用藥后細(xì)菌可斷裂為顆粒狀，鏈狀等，著色不均勻，叫不完整染色菌。革蘭陽性無動力、無莢膜和芽胞。
　　麻風(fēng)分枝桿菌是麻風(fēng)的病原菌，麻風(fēng)是一種慢性傳染病，早期主要損害皮膚、黏膜和神經(jīng)末梢，晚期可侵犯深部組織和器官，此菌尚未人工培養(yǎng)成功，已用犰狳建立良好的動物模型。人類是麻風(fēng)分枝桿菌的唯一宿主，也是唯一傳染源。本病在世界各地均有流行，尤以第三世界較為廣泛。
　　麻風(fēng)病根據(jù)機(jī)體的免疫、病理變化和臨床表現(xiàn)可將多數(shù)患者分為瘤型，結(jié)核樣型和界線類綜合征。
　　治療原則：早發(fā)現(xiàn)，早治療。治療藥物主要有砜類、利福平、氯苯吩嗪及丙硫異煙胺。一般采用二或三種藥物聯(lián)合治療。麻風(fēng)病目前尚無特異性預(yù)防方法。