  大家好，我是小邦， 今天給大家推送的是細胞之邦論壇微信公眾號的第47期微論壇噢！ 喜歡的話，可以轉(zhuǎn)發(fā)分享給您的小伙伴們噢！
  小陽，最近我在解讀PCR數(shù)據(jù)的時候，有好多概念不懂，真怕解讀錯了呢，你有出現(xiàn)過這種情況嗎？ 是啊，也有出現(xiàn)這種情況，聽說有師兄師姐因為解讀錯了，導(dǎo)致實驗不順利呢。   導(dǎo)讀 有些科研君在解讀PCR數(shù)據(jù)時，經(jīng)常會發(fā)生一些誤讀。本文在此列舉5種常見的PCR誤讀，并揭示其正解到底是什么。)  01 “特異性”和“保真度”意思是相同的 高特異性PCR將只生成針對目標靶點序列的單一擴增產(chǎn)物。 高保真度(即高度準確的) PCR將含有極少量的DNA聚合酶-減少產(chǎn)物中的錯誤。 02 所有的dNTP都是一樣的 要成功完成PCR，反應(yīng)混合物中應(yīng)使用高度純化的dNTP。并非所有供應(yīng)商均提供PCR級的dNTP，污染的雜質(zhì)會降低擴增的靈敏度和產(chǎn)物的產(chǎn)量。 03 PCR量越多越好 如果您在瓊脂糖凝膠中檢測到非特異性的PCR條帶，則應(yīng)減少DNA模板、引物、Taq聚合酶或MgCl2用量，以提高特異性。 04 如果退火溫度在45°C至55°C之間，則大多數(shù)PCR反應(yīng)可發(fā)生 嚴格的Tm優(yōu)化可以獲得最高的產(chǎn)量。不恰當?shù)腡m則會導(dǎo)致非特異性產(chǎn)物形成且產(chǎn)量下降。 05 采用任何Taq聚合酶均可 在PCR設(shè)置過程中會發(fā)生錯配或形成引物二聚體，因此應(yīng)使用熱啟動Taq聚合酶。在高溫下，引物退火的嚴格性提升，且?guī)缀醪粫霈F(xiàn)錯配。 如果你看完了本期微論壇后有什么心得和想法，可以在底部評論區(qū)暢所欲言哦~ 小貼士： 1、評論區(qū)期待看到大家的睿智分析、辛辣點評、歡樂交流、經(jīng)驗分享與反饋。 2、我們會精選優(yōu)秀評論予以顯示，目前的中選率高達40%，把握機會哦！ 3、目前評論區(qū)的微信頭像和昵稱是實名顯示，涉及隱私信息請自行權(quán)衡呦~
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