大家好，今天我們介紹這篇文章：MicroRNA-143 Activation Regulates Smooth Muscle and Endothelial Cell Crosstalk in Pulmonary Arterial Hypertension.Circ Res（IF 11.0）. 2015 Oct 23;117(10):870-83. （全文下載鏈接：http://pan.baidu.com/s/1nvkw6ed 密碼：ytw9），并在文后總結(jié)部分給大家提升文章檔次的三個(gè)錦囊。

首先我們看文章的機(jī)制圖：

在PASMC（肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞）中，肺動(dòng)脈高壓發(fā)生相關(guān)信號(hào)通路通過(guò)激活miR-143/145啟動(dòng)子活性調(diào)節(jié)miR-143/145的表達(dá)。 在血管重構(gòu)過(guò)程準(zhǔn)哦功能，MiR-143-3p作為旁分泌信號(hào)來(lái)介導(dǎo)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、調(diào)控凋亡。在PAH（肺動(dòng)脈高壓）進(jìn)展過(guò)程中，PASMC分泌包含miR-143-3p的外泌體，并被轉(zhuǎn)運(yùn)到PAEC（肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞）誘導(dǎo)細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)和血管生成。

這篇文章的內(nèi)容包括三部分：

1. MiR-143在PAH動(dòng)物模型、病人樣本中高表達(dá)，而且miR-143/145的表達(dá)激活是由于其啟動(dòng)子上游區(qū)域含PAH相關(guān)信號(hào)通路中轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)所導(dǎo)致；

2. MiR-143體外功能：影響PASMC的運(yùn)動(dòng)和凋亡；而MiR-143敲除或者抑制后改良了缺氧導(dǎo)致的PAH表型；

3. MiR-143通過(guò)PASMC分泌的外泌體傳遞到PAEC，并調(diào)節(jié)PAEC的運(yùn)動(dòng)和血管形成能力。

我們先看一下PASMC與PAEC的共培養(yǎng)體系（與Transwell非常像）：

作者分別用共培養(yǎng)體系和來(lái)源于PASMC的培養(yǎng)基，來(lái)評(píng)估含MiR-143的外泌體從PASMC分泌到PAEC，并對(duì)PAEC運(yùn)動(dòng)能力的影響。

然后評(píng)估PASMC來(lái)源的外泌體中miR143對(duì)PAEC運(yùn)動(dòng)和血管形成能力的影響。

最后總結(jié)一下，這篇文章有幾個(gè)關(guān)鍵詞：microRNA；外泌體；肺高血壓；轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)，這篇文章之所以能發(fā)11分，我們有哪些亮點(diǎn)可供參考，以幫我們提升文章的檔次：

1. 不走下游走上游：作者選microRNA143/145簇（cluster）作為關(guān)鍵分子，對(duì)microRNA的經(jīng)典套路來(lái)說(shuō)，一般會(huì)從下游著手，比如預(yù)測(cè)靶基因，然后在PASMC中驗(yàn)證microRNA143/145在PASMC中的功能（運(yùn)動(dòng)、凋亡），然后通過(guò)熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)證明microRNA143/145對(duì)靶基因的調(diào)控；而作者呢，則反其道而行之，研究microRNA上游的因子對(duì)表達(dá)的調(diào)控，此為亮點(diǎn)一；當(dāng)然，對(duì)microRNA啟動(dòng)子和轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的分析驗(yàn)證、以及對(duì)甲基化等其他可能調(diào)控microRNA表達(dá)因素的排除也是我們學(xué)習(xí)的地方；

2. 引入熱點(diǎn)：外泌體，在通過(guò)PASMC驗(yàn)證了microRNA143的功能后，作者進(jìn)一步研究了外泌體中的microRNA143在PASMC與PAEC細(xì)胞通訊中的作用，在對(duì)外泌體進(jìn)行大小、電鏡、Marker等方式進(jìn)行鑒定后，通過(guò)共培養(yǎng)體系、條件性培養(yǎng)基兩方面驗(yàn)證外泌體在PASMC與PAEC細(xì)胞通訊中的作用，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和方法都很經(jīng)典，所以做microRNA研究的小伙伴，除了常規(guī)實(shí)驗(yàn)外，可以考慮外泌體作為加分點(diǎn)哦！

3. 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表型逆轉(zhuǎn)：考慮到動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的復(fù)雜性，體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的表型有一定概率在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)難以重復(fù)，不可否認(rèn)，作者通過(guò)體內(nèi)動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)對(duì)microRNA143的進(jìn)行了干預(yù)，并逆轉(zhuǎn)了PH的表型，這是本文加分的第三點(diǎn)。