我國的結核感染率為44.5%，位于世界第二，由于目前沒有好的診斷試劑盒方法，該病仍然是我國公共衛(wèi)生的重大威脅。結核分枝桿菌（MTB）診斷方法很多，最常用的方法有好幾種，包括涂片法、培養(yǎng)法、T-SPOT、DNA和RNA檢測方法。本文對這些方法的優(yōu)缺點作一一比較。

涂片法和培養(yǎng)法：

目前最常用的是涂片法。痰涂片是一種快速低廉、操作簡便、在臨床上被廣泛應用的方法，該方法無法區(qū)分死活菌，尤其是無法區(qū)分結核分枝桿菌（MTB）和非結核分枝桿菌（NTM），而且受制于痰液中分枝桿菌數量，敏感性較低，涂片中分枝桿菌要達到103～104CFU/ml才可檢測出陽性結果，所以該方法僅能檢出1/2～3/4的活動性結核患者，漏檢率很高。與痰涂片相比，培養(yǎng)法雖然靈敏度增加不少，但檢測周期太長（2-8周），不但貽誤治療，也大大增加了患者傳播給別人的機會。

抗原和抗體檢測：

（1）抗體檢測——該方法主要用于檢測結核病人血清中的特異性抗體。然而結核病患者經常因免疫應答低下，導致體液免疫檢測或細胞免疫檢測假陰性。且由于種屬間共同抗原決定簇的存在，導致結核抗原檢測的特異性和敏感性低下，致使此法難以取得實質性的進展。

（2）抗原檢測——在結核病患者血清或標本中檢出結核分枝桿菌抗原，可以作為病原菌存在的直接證據，也可以避免結核病患者因免疫應答低下導致的假陰性結果。近年來由于單克隆抗體制備技術的提高，可以制備高效價的特異性抗體，從而使得檢測結核病患者血清中的結核桿菌抗原成為結核診斷的新方法。張周云等利用基因工程方法在體外表達結核分枝桿菌的desA蛋白抗原制備成單克隆抗體，利用該抗體采用ELISA雙抗體夾心法檢測了139 例臨床已確診的活動性肺結核患者血清中結核抗原，結果表明，其敏感性為84.17%，特異性為92.19%。

采用ELISA方法檢測痰標本中結核抗原的結果差異甚大，這可能與痰標本中結核菌抗原分布不甚均勻有關，而對血液標本中抗體的檢測其臨床意義尚不明確，主要用于臨床和影像學疑似肺結核而不易獲得痰標本的兒童及痰菌陰性的肺結核患者，但特異性差，敏感性低。

T-SPOT：

T-SPOT即結核感染T細胞斑點實驗，是近幾年剛興起的技術。T-SPOT以血清為樣本，雖號稱可以檢測“活動性結核”，但事實上，該方法不是細菌學檢測方法，而是間接的檢測血液中的結核菌致使T細胞干擾素的釋放，其特異性和敏感性都不高，對T-SPOT檢測結果的簡單且正確的理解是：陽性結果提示可能感染了結核，其感染可在身體任何部位，包括肺外結核。臨床上，由于大約30%左右的患者為肺外結核感染，因此T-SPOT其實并不適合于肺結核的診斷。倒是T-SPOT陰性結果臨床意義較大，提示患者可能沒有感染結核。

DNA檢測：

聚合酶鏈式反應（PCR）技術可將標本中微量的結核菌DNA加以擴增，但仍有假陽性的情況發(fā)生，這是由于DNA樣本提取過程中遭受污染等技術原因，并且不能區(qū)分活菌與死菌，故不能用于評估結核病的治療效果和流行病學調查研究等，僅推薦在非結核分枝桿菌病高發(fā)地區(qū)圖片抗酸抗菌陽性病例中使用，來快速區(qū)分結核與非結核分枝桿菌。

RNA檢測：

在結核診斷領域，目前談論較多的是以RNA為檢測靶標的檢測技術，由于該方法剛剛興起，被稱為下一代分子診斷技術（NGM）。該方法使用16S rRNA為靶標。由于16S rRNA在一個結核分枝桿菌里是可達一萬多個，所以其靈敏度很高，16S rRNA又是細菌分類的依據，所以其特異性也極高，是目前市場上唯一可以區(qū)分結核分枝桿菌（MTB）和非結核分枝桿菌（NTM）的分子生物學檢測方法。

總結：

結核桿菌的特性、感染發(fā)病過程復雜性以及結核病流行程度廣泛性，決定了結核病實驗室檢查較其它傳染性疾病的檢驗項目廣泛。而未來的結核病實驗室診斷應在強調細菌學檢驗的標準化和規(guī)范化的同時加強研究、深入了解結核分枝桿菌的分子生物學特性及與宿主的相互關系；不斷研究開發(fā)簡便、快速、靈敏、特異的結核病實驗室診斷新技術并進行大范圍的驗證，使之逐步完善，促進新的技術早日廣泛進入實驗室常規(guī)應用。