李方知 廣州市胸科醫(yī)院

腺苷脫氨酶（ adenosinedeaminase，ADA）有 2種同工酶，即ADA1和ADA2。一個 ADA活性單位是指在測試特定條件下每分鐘脫氨1μmole腺苷成為次黃苷。紅 -9-（2-羥基 -3-壬烷基）腺嘌呤（ EHNA）能完全抑制 ADA1活性，但 ADA2對EHNA抑制作用不敏感 。通過是否加入 EHNA，測定總 ADA活性和 ADA2活性，然后通過總 ADA活性去ADA2活性得出 ADA1活性。 ADA催化腺苷和脫氧腺苷脫氨，分別轉化為次黃苷和脫氧次黃苷，從而使腺苷和脫氧腺苷減少。而腺苷作為內(nèi)源性信號轉導分子，通過結合到細胞上的腺苷受體，調(diào)節(jié)細胞內(nèi)的環(huán)磷酸腺苷水平，在生理和病理條件下都有重要作用。ADA同工酶還有酶以外的功能，即使失去了催化活性， ADA同工酶仍然有參與調(diào)節(jié)免疫的功能。本文對 ADA同工酶生化特性和免疫調(diào)節(jié)作用的研究現(xiàn)狀，還有 ADA同工酶在嚴重復合性免疫缺陷癥、類風濕關節(jié)炎、結核性胸積液、類肺炎胸積液和艾滋病等疾病的診斷意義和可能的發(fā)病機制作一簡要綜述。

ADA同工酶生化特性和免疫調(diào)節(jié)作用

同工酶ADA1普遍存在于人體各種細胞內(nèi)，其中以淋巴細胞、中性粒細胞和單核細胞活性最高。其最適 pH為7～7.5。生物體內(nèi)的 pH值對ADA1發(fā)揮作用是適宜的。 ADA1的米氏常數(shù)（ km）為 5.2×10^-5M。 ADA1的km較小和它的最適 pH覆蓋人體生理 pH，使得 ADA1在生物體內(nèi)具很高的脫氨效率，使血液腺苷濃度維持在 0.1微摩爾 /升的低水平。 ADA1對腺苷及脫氧腺苷的親和力相似。 ADA1酶以外的功能。 ADA1能促進 CD₄ ^T細胞增殖，這一功能不需要依靠酶的作用。因為即使ADA1被coformycin抑制催化腺苷的功能后，仍然能促進CD₄ ^T細胞增殖。

與ADA1普遍存在于人體各種細胞內(nèi)不同， Ungerer檢測正常人全身各種細胞，發(fā)現(xiàn)僅單核巨噬細胞含有 ADA2。Iwaki等用卟啉醇肉豆蔻酸乙酸酯聯(lián)合鈣離子載體刺激體外培養(yǎng)的人外周血單核細胞，激活的單核細胞能胞外分泌 ADA2。ADA2的米氏常數(shù)（ km）為 200×10^-5M，最適 pH為6.5，適宜 pH為5.5～7.0。ADA2且對脫氧腺苷的親和力較弱（脫氧腺苷與腺苷的比值大約為 0.25），這一特點使 ADA2以催化腺苷脫氨為主。ADA2酶以外的功能。和單核細胞共同培養(yǎng)下， ADA2能促進 CD₄ ^T細胞增殖，這一功能同樣不需要依靠 ADA2酶的活性。這一功能可能是通過 ADA2作為協(xié)同刺激因子，結合到單核細胞和 CD₄ ^T細胞上的受體，增加了單核細胞和 CD₄ ^T細胞的相互作用。ADA2具有 ADA1沒有的功能： ADA2能誘導單核細胞分化成巨噬細胞，并且使巨噬細胞增殖。而 ADA1則不能誘導單核細胞分化成巨噬細胞。

ADA1和ADA2的不同生化特性，使它們能在不同的環(huán)境下發(fā)揮作用。如在血液里，由于血液腺苷濃度低而且是弱堿性，所以是 ADA1起主要作用，而 ADA2起作用少。而急性炎癥病灶的腺苷濃度高，且呈弱酸性，適合 ADA2起作用。

ADA同工酶在疾病中表現(xiàn)和臨床應用

嚴重復合性免疫缺陷癥

ADA1缺陷導致嚴重復合性免疫缺陷癥，其患者的紅細胞中檢測不到 ADA活性（因為 ADA2不存在紅細胞，所以一旦 ADA1缺陷，紅細胞就檢測不到 ADA活性）。而其血液中卻能檢測到遠低于正常值 ADA活性，而血清中這部分 ADA活性實際上是 ADA2活性。因為 ADA2在腺苷濃度較高時才起作用，且對脫氧腺苷的親和力較弱，所以 ADA1缺陷使腺苷和脫氧腺苷蓄積，導致 T細胞和 B細胞的缺陷，從而引起免疫功能異常。

類風濕關節(jié)炎

Nakamachi報道在類風濕關節(jié)炎患者的關節(jié)液總 ADA活性和 ADA1活性都高于骨性關節(jié)炎。類風濕關節(jié)炎患者的關節(jié)所有細胞中，成纖維細胞 ADA1活性最高，其 ADA1活性高過其它細胞 10倍。類風濕關節(jié)炎患者的關節(jié)成纖維細胞 ADA1活性比骨性關節(jié)炎高5倍，顯示成纖維細胞 ADA1活性的高水平是類風濕關節(jié)炎的特征。小劑量甲氨蝶呤治療類風濕關節(jié)炎的作用機制之一，通過甲氨蝶呤抑制ADA1活性，使腺苷分解代謝減少，腺苷濃度上升誘導免疫抑制而治療類風濕關節(jié)炎。提示 ADA1活性升高可能是類風濕關節(jié)炎發(fā)病機制之一。

結核性胸積液的鑒別

結核性胸積液和類肺炎胸積液的總 ADA活性都明顯高于腫瘤性胸積液 ，所以測量總 ADA活性可作為結核性胸積液、類肺炎胸積液和腫瘤性胸積液的鑒別診斷。在結核性胸積液，總ADA活性主要由 ADA2組成，大概占 88%，ADA2活性高，可能是在結核感染中，巨噬細胞分泌所致；而類肺炎胸積液總 ADA活性主要由 ADA1組成，大概占 70%，這可能是因為類肺炎胸積液有大量的中性粒細胞，而中性粒細胞含有較多的 ADA1。所以測定 ADA1和 ADA2可鑒別結核性胸積液和類肺炎胸積液 。

艾滋病

Tsuboi報道艾滋病和 HIV^-1陽性者的血清 ADA1和ADA2活性明顯高于 HIV^-1陰性者（ P＜0.001）。艾滋病患者的 ADA2活性明顯高于 HIV^-1陽性者（ P＜0.01），而 ADA1活性在這兩組中無明顯差異。 ADA2活性升高可能是病毒侵犯單核巨噬細胞所致 。在 T細胞激活過程中， ADA1和細胞表面的 CD₂₆結合起了協(xié)同刺激作用。而 HIV的一種糖蛋白 gp120能阻止 ADA1和CD26結合 ，從而明顯減少了 ADA1和CD₂₆結合所致的協(xié)同刺激作用和細胞因子的生成。 gp120的這種作用可能和艾滋病發(fā)病機制高度相關。

總之， ADA同工酶在生理和病理活動中起重要作用。而在以上疾病中， ADA同工酶活性的有不同變化，從而為診斷提供了參考依據(jù)。對ADA同工酶特性和其和這些疾病關系的進一步研究，將更好地了解 ADA同工酶在發(fā)病機制中的作用，提高 ADA同工酶對這些疾病的診斷價值。