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科學(xué)家Luca Gattinoni 和他的團(tuán)隊(duì)首次提出人的外周血中存在著一群細(xì)胞，它們既具有記憶T細(xì)胞的特性，同時(shí)又具有干細(xì)胞的特征，因此命名為T(mén) memory stem cell (Tscm) (Nat Med. ; 17(10): 1290–1297)。為了研究Tscm的功能，他們首創(chuàng)了Tscm的體外培養(yǎng)方案。首先分選出外周血的CD45RO?CD62L 細(xì)胞，然后用α-CD3/CD28 磁珠和細(xì)胞1：1混合，300 IU ml?1IL-2， 5 μM TWS119培養(yǎng)兩周即可獲得大量的Tscm。其中TWS119是一種GSK-3β抑制劑，能夠誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞的分化，并且有助于細(xì)胞獲得干性。雖然Tscm具有很多類(lèi)似初始T細(xì)胞的分子表型（CD45RA CD62L ），但是它們又表達(dá)記憶T細(xì)胞的分子特征分子（CD95 ，IL2Rβ），因此具有部分初始T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞的雙重特性。 在發(fā)現(xiàn)Tscm后的四年里，研究人員不斷優(yōu)化Tscm的培養(yǎng)方案（后期也建立IL-7/IL-15的培養(yǎng)方案），并進(jìn)行了一系列體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)。階段性里程碑結(jié)果在去年二月的Science Translational Medicine發(fā)表。研究人員利用逆轉(zhuǎn)錄整合位點(diǎn)高通量測(cè)序（High-throughput sequencing of retroviral vector integration sites (ISs)）發(fā)現(xiàn)體外培養(yǎng)的Tscm回輸?shù)饺梭w，可以長(zhǎng)期存活達(dá)12年，并維持其正常的活力。 丿 NIH著名的免疫學(xué)教授rosenberg是世界上最早從事免疫細(xì)胞過(guò)繼治療的科學(xué)家，在他的文章中鮮明的指出Tscm的增殖能力和抗腫瘤活性在所有T細(xì)胞亞群中是最強(qiáng)的。 近年來(lái)，腫瘤免疫治療突飛猛進(jìn)，CAR-T/TCR-T等特異性T細(xì)胞療法在臨床上取得了巨大成就。在攻克了血液瘤和淋巴瘤等循環(huán)系統(tǒng)的腫瘤后，正在朝著實(shí)體留的戰(zhàn)場(chǎng)邁進(jìn)。國(guó)內(nèi)的CAR-T/TCR-T技術(shù)也在飛速發(fā)展，我們可以從CD19-CART臨床試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，國(guó)內(nèi)外不同公司的臨床反應(yīng)是不一樣的，甚至還有較大差異。我相信這里面的影響因素會(huì)很多，比如SCFV差異，共刺激分子不同，入組病人病情不一致，病人的預(yù)處理方案不同等等。但是也非常重要的一個(gè)因素，我認(rèn)為沒(méi)有得到應(yīng)有的重視，即培養(yǎng)的T細(xì)胞的表型和功能。事實(shí)上，國(guó)際最為知名的CAR-T大師Carl H.June和rosenberg在制備T細(xì)胞的過(guò)程中，無(wú)一例外的都采用了α-CD3/CD28磁珠來(lái)激活擴(kuò)增T細(xì)胞。 目前國(guó)內(nèi)從事細(xì)胞治療的公司和醫(yī)院基本都采用IL-2 OKT-3來(lái)擴(kuò)增T細(xì)胞，當(dāng)然國(guó)外也有很多公司采用這一方案。這樣的事實(shí)在部分程度上是由于α-CD3/CD28磁珠制備工藝比較復(fù)雜，放眼全球僅life和美天旎兩家企業(yè)具備生產(chǎn)能力（可能?chē)?guó)外還有其它公司，如有疏忽，請(qǐng)多多見(jiàn)諒）。國(guó)際上已有研究人員比較了IL-2 OKT-3和α-CD3/CD28 磁珠培養(yǎng)T細(xì)胞的表型和功能差異。因此，國(guó)內(nèi)企業(yè)突破技術(shù)瓶頸，生產(chǎn)出安全有效的磁珠產(chǎn)品迫在眉睫。非常慶幸，據(jù)可靠消息證實(shí)，近岸蛋白在這一領(lǐng)域已提前布局，相應(yīng)產(chǎn)品也即將面世。 因?yàn)門(mén)scm的重要功能，將其運(yùn)用到過(guò)繼免疫細(xì)胞治療領(lǐng)域毫無(wú)疑問(wèn)具備先天優(yōu)勢(shì)，在此基礎(chǔ)上建立的CAR-T/TCR-T治療方案也將表現(xiàn)出更好的效果。 參考文獻(xiàn) 1. Gattinoni L, Lugli E,Ji Y, et al. A human memoryT cell subset with stem cell-like properties. Nat Med2011;17:1290-7. 2. Biasco L, Scala S, BassoRicci L, et al. In vivo tracking ofT cells in humans unveils decade-longsurvival and activityof genetically modified T memory stem cells. Sci TranslMed 2015;7:273ra13; 3.Relation of clinical culture method to T-cell memorystatus and efficacy in xenograft models of adoptive immunotherapy.Barrett DM, SinghN, Liu X, Jiang S, June CH, Grupp SA, Zhao Y, Cytotherapy (2014) ; 4.Simplified process for the production of anti-CD19-CAR-engineeredT cells. Tumaini B, Lee DW,Lin T, Castiello L, Stroncek DF, Mackall C, Wayne A, Sabatino M, Cytotherapy (2013) 15:1406-1415.
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