在上一篇關(guān)于癌癥與基因突變的文章《為什么說(shuō)癌癥是基因突變引起的？》中，我們主要從科學(xué)發(fā)展史的角度，粗略梳理了一下經(jīng)過(guò)幾千年的科學(xué)發(fā)展和進(jìn)步，人類對(duì)癌癥認(rèn)識(shí)的變化，最后落腳到現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)對(duì)癌癥的認(rèn)識(shí)上：癌癥，歸根結(jié)底，是由基因突變引起的。而由于篇幅所限，文章并沒(méi)有圍繞這個(gè)問(wèn)題本身做更加深入和全面的討論，從而使這個(gè)結(jié)論下的略顯倉(cāng)促而籠統(tǒng)，更有一些讀者朋友在與筆者的私下交流中，對(duì)這個(gè)結(jié)論本身提出了一些異議：基因突變并非癌癥發(fā)生的“因”，而是“果”。今天，我們就針對(duì)這個(gè)看起來(lái)類似“雞生蛋，還是蛋生雞”的問(wèn)題與讀者作進(jìn)一步的討論。

撰文 木東

編輯 李娟

在筆者開(kāi)始學(xué)習(xí)癌癥生物學(xué)之前，作為癌癥研究領(lǐng)域的理論基礎(chǔ)，“癌癥由基因突變引起”這個(gè)結(jié)論，早已作為被生物醫(yī)學(xué)科學(xué)界廣泛接受的主流觀點(diǎn)，寫(xiě)進(jìn)教科書(shū)；而且，這個(gè)觀點(diǎn)與筆者已有的其他生物學(xué)知識(shí)也十分契合，也就沒(méi)有產(chǎn)生對(duì)此提出異議的想法。然而這顯然不符合“賽先生”的科學(xué)質(zhì)疑精神；歷史也多次證明，如果這樣的做法上升到整個(gè)科學(xué)界的層面，有時(shí)還會(huì)嚴(yán)重阻礙科學(xué)的發(fā)展和進(jìn)步。因此，有必要嘗試對(duì)癌癥和基因突變兩者的因果關(guān)系做更全面和系統(tǒng)的梳理。

在正式討論癌癥和基因突變之前，我們有必要先稍微研究一下什么是“因果關(guān)系”。對(duì)因果關(guān)系，哲學(xué)家已經(jīng)討論了幾千年，今天仍是現(xiàn)代哲學(xué)的重要課題——要享受形而上的思維樂(lè)趣固然很好，但面對(duì)生物醫(yī)學(xué)這樣的實(shí)驗(yàn)科學(xué)問(wèn)題，我們最好避免深陷其中，否則就是自找麻煩，問(wèn)題恐怕會(huì)永遠(yuǎn)得不到解決——要討論癌癥和基因突變的因果關(guān)系問(wèn)題，我們只需要一點(diǎn)“樸素”的認(rèn)識(shí)就夠了。

維基百科對(duì)因果關(guān)系是這樣描述的：因果關(guān)系是一個(gè)事件（即“因”）和第二個(gè)事件（即“果”）之間的關(guān)系，其中第一個(gè)事件對(duì)第二個(gè)事件的發(fā)生負(fù)有責(zé)任（至少是部分責(zé)任），而第二個(gè)事件的發(fā)生依賴第一個(gè)事件的發(fā)生。一般來(lái)講，一個(gè)事件的發(fā)生有很多原因，都屬于誘發(fā)該事件發(fā)生的因素，而它們?cè)谑录l(fā)生之前已經(jīng)出現(xiàn)。”（“Causality is the agency or efficacy that connects one process (the cause) with another process or state (the effect), where the first is understood to be partly responsible for the second, and the second is dependent on the first. In general, a process has many causes, which are said to becausal factors for it, and all lie in its past.”）^[1]

從對(duì)因果關(guān)系的簡(jiǎn)單闡述，我們可以看到，要想得出“基因突變”是“癌癥發(fā)生”的“因”而非“果”的結(jié)論，至少要弄清以下幾個(gè)問(wèn)題：1）癌癥發(fā)生是否總會(huì)伴隨基因突變？ 2）基因突變?cè)诎┌Y發(fā)生之前是否已經(jīng)存在？3）誘導(dǎo)基因突變，能否引起或促進(jìn)癌癥發(fā)生？ 接下來(lái)，我們嘗試就此作進(jìn)一步的討論。

一、癌癥發(fā)生是否總會(huì)伴隨基因突變？

隨著分子生物學(xué)技術(shù)，特別是DNA測(cè)序技術(shù)的進(jìn)步，生物信息學(xué)的發(fā)展以及癌基因組計(jì)劃的推進(jìn)，我們對(duì)癌細(xì)胞基因組的認(rèn)識(shí)不斷全面、細(xì)化和深入，也在不斷修正對(duì)“癌癥發(fā)生是否總會(huì)伴有基因突變”這一問(wèn)題的認(rèn)識(shí)。對(duì)癌癥基因突變理論的質(zhì)疑，其中某些很重要的依據(jù)，或者是來(lái)源于以前存在局限的研究結(jié)果，或者是對(duì)這些研究的錯(cuò)誤理解和解讀。

例如，基因突變理論的反對(duì)者經(jīng)常提到，只有30%的腫瘤細(xì)胞能檢測(cè)到常見(jiàn)的致癌基因突變，而有些腫瘤中根本沒(méi)有發(fā)現(xiàn)任何基因變異。這些結(jié)論的根據(jù)是發(fā)表于2007年的一項(xiàng)大規(guī)模（大約1000例腫瘤組織樣本）癌基因測(cè)序分析^[2,3]。 在這項(xiàng)研究當(dāng)中，研究人員分析了17個(gè)已知的重要癌基因，發(fā)現(xiàn)有大約30%的腫瘤樣品中含有至少這17個(gè)突變癌基因的一個(gè)。

首先，該研究?jī)H僅關(guān)注了已知的一些重要癌基因突變，對(duì)其他基因未能進(jìn)行深入的分析。其次，限于測(cè)序技術(shù)和分析手段，迄今為止大部分針對(duì)癌細(xì)胞基因組的研究，僅局限于編碼區(qū)，而占整個(gè)基因組98.5%的非編碼區(qū)，在染色體高級(jí)結(jié)構(gòu)的形成以及基因表達(dá)調(diào)控過(guò)程中，發(fā)揮至關(guān)重要的作用 ^[4]。（圖1）

圖1. 人類基因組組成，蛋白編碼區(qū)DNA僅占1-2%。（圖片來(lái)源：http:///slide/5771877/）

發(fā)生在編碼區(qū)的突變可以產(chǎn)生變異蛋白，而非編碼調(diào)控區(qū)的DNA突變，雖然不能改變基因表達(dá)的產(chǎn)物，卻能夠使基因表達(dá)失去控制，同樣誘發(fā)癌癥。例如，最近在T細(xì)胞急性白血病方面的研究發(fā)現(xiàn)，在轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)域的幾個(gè)DNA堿基的缺失或插入，甚至單個(gè)堿基的突變，就能夠使癌細(xì)胞高表達(dá)原本不表達(dá)的癌基因TAL1，LMO1或者LMO2 ^[5,6,7]。隨著對(duì)基因組認(rèn)識(shí)的深入，會(huì)有越來(lái)越多非編碼區(qū)DNA突變的功能得到解析。事實(shí)上，隨著癌基因測(cè)序結(jié)果的積累，每個(gè)癌細(xì)胞都含有大量的基因突變，已經(jīng)是一個(gè)不爭(zhēng)的科學(xué)事實(shí)。

二、基因突變?cè)诎┌Y發(fā)生之前是否已經(jīng)存在？

2015年，發(fā)表在Science上的一項(xiàng)研究，分析了人皮膚上皮細(xì)胞的基因組，著重研究了74個(gè)已知癌基因的突變情況^[8]。研究結(jié)果表明，正常上皮細(xì)胞的基因組中，大約每1百萬(wàn)DNA堿基，平均有2到6個(gè)堿基發(fā)生突變，而且其突變模式顯示大部分突變是由于長(zhǎng)期紫外線照射引起。更重要的是，一些含有某些已知癌基因突變的“正常”細(xì)胞，與其它細(xì)胞相比，已經(jīng)或多或少具有了生存和分裂的競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)。比如，具有NOTCH1突變的皮膚細(xì)胞克隆所獲得的競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)使它們得以開(kāi)疆?dāng)U土，擴(kuò)增到占到細(xì)胞總數(shù)的20%。而具有其他癌基因突變或者突變組合的細(xì)胞，也在不同程度上得到擴(kuò)增。

之前針對(duì)白血病的一系列研究也發(fā)現(xiàn)，正常造血細(xì)胞基因組中同樣積累了某些已知的與白血病有關(guān)的癌基因突變，并發(fā)生某些細(xì)胞克隆不同程度的擴(kuò)增現(xiàn)象^[9-12]。 可以說(shuō)，機(jī)體組織環(huán)境中的這類“正?！奔?xì)胞克隆，已經(jīng)開(kāi)始相互角逐，其生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)超過(guò)其他細(xì)胞。它們摩拳擦掌，吹響癌變的號(hào)角，等待著最終沖破囹圄、修煉成“癌”的“機(jī)會(huì)”——或者是其他關(guān)鍵基因的突變，或者是機(jī)體免疫力的下降，或者是生存微環(huán)境的某些改變（圖2）。

圖2. 從正常細(xì)胞基因突變到癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移（圖片來(lái)源：Genetics Home Reference-NIH）

另一個(gè)廣為人知的例子恐怕要數(shù)BRCA1/2的基因突變。家族性BRCA1/2突變攜帶者患乳腺癌或卵巢癌的幾率高至60％以上^[13,14,15]。

通過(guò)以上的分析，我們可以清晰地看到，基因突變確實(shí)在癌癥發(fā)生之前已經(jīng)發(fā)生。由于癌癥的復(fù)雜性，癌變不僅僅是含有突變基因的細(xì)胞克隆的個(gè)體行為，也與其所處環(huán)境有關(guān)。因此，基因突變雖然不是癌癥發(fā)生的充分條件，但癌癥發(fā)生依賴基因突變的積累。

當(dāng)然，在癌細(xì)胞里檢測(cè)到的突變絕非都發(fā)生在癌變之前。事實(shí)上，由于分裂迅速、DNA損傷修復(fù)機(jī)制異常等原因，癌細(xì)胞的基因組變得更加不穩(wěn)定，DNA突變更容易發(fā)生。正因如此，患者體內(nèi)的癌細(xì)胞進(jìn)入更加快速的進(jìn)化之中，每個(gè)癌細(xì)胞各自積累不同的新突變，變得各不相同。這也是癌癥難治、復(fù)發(fā)的一個(gè)重要原因——大量不同的癌細(xì)胞中，總可能有一個(gè)在進(jìn)化中獲得了抵抗現(xiàn)有治療手段的能力，存活了下來(lái)。然而，這改變不了正常細(xì)胞癌變需要最初的基因突變積累的事實(shí)。

三、誘導(dǎo)基因突變，能否引起或促進(jìn)癌癥的發(fā)生？

在這三個(gè)問(wèn)題當(dāng)中，這個(gè)問(wèn)題至關(guān)重要。在《為什么說(shuō)癌癥是基因突變引起的？》中，筆者曾提到致癌物質(zhì)的致癌性與引起基因突變的能力之間的聯(lián)系：誘發(fā)基因突變能力越強(qiáng)的化學(xué)物質(zhì)，其誘發(fā)癌癥的能力也越強(qiáng)。另外，大量癌癥相關(guān)的家族遺傳病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，某些基因突變，比如BRCA1/2對(duì)于卵巢癌和乳腺癌，以及NF1對(duì)于兒童成神經(jīng)細(xì)胞瘤（Neuroblastoma），能夠極大增加突變基因攜帶者患癌的幾率。這些可以看作支持“誘導(dǎo)基因突變能夠引起癌癥發(fā)生”在流行病學(xué)和統(tǒng)計(jì)學(xué)上的間接證據(jù)。

除此以外，借助基因工程，特別是基因編輯技術(shù)，已有大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明基因突變能夠引起并促進(jìn)癌癥發(fā)生。比如，通過(guò)基因編輯技術(shù)，在斑馬魚(yú)的造血細(xì)胞中高表達(dá)人類白血病關(guān)鍵癌基因MYC，能夠使幾乎100％的斑馬魚(yú)患上T細(xì)胞急性白血病^[16]；而在相應(yīng)神經(jīng)細(xì)胞中過(guò)表達(dá)兒童成神經(jīng)細(xì)胞瘤關(guān)鍵癌基因MYCN ^[17]，或者敲除關(guān)鍵的抑癌基因NF1 ^[18]，也能夠誘發(fā)神經(jīng)細(xì)胞瘤。

同樣，以較低等的果蠅，或更高等的哺乳動(dòng)物、與人類基因組有高度同源性的小鼠作為模式生物，也得出更多類似的結(jié)果，不勝枚舉。也正因如此，科學(xué)家得已建立起模擬人類不同癌癥的各種動(dòng)物模型（圖3），一方面進(jìn)行癌癥基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究，探索癌變機(jī)理，另一方面用來(lái)研發(fā)癌癥治療藥物。

圖3. 模式生物：小鼠、斑馬魚(yú)和果蠅（圖片來(lái)源：Genetic Science Learning Center, University of Utah）

四、一點(diǎn)補(bǔ)充：關(guān)于表觀遺傳學(xué)

近幾年來(lái)，隨著表觀遺傳學(xué)（表觀遺傳學(xué)這個(gè)名詞，現(xiàn)在的內(nèi)涵與早先經(jīng)典遺傳學(xué)時(shí)期的內(nèi)涵有很大不同，變得更寬泛，這里不做進(jìn)一步討論）越來(lái)越引起癌癥研究領(lǐng)域的重視，癌癥基因突變理論的反對(duì)者更以此作為立論依據(jù)，認(rèn)為表觀遺傳的變化同樣能夠誘發(fā)癌癥。

毫無(wú)疑問(wèn)，表觀修飾在基因表達(dá)的調(diào)控中起著重要作用。很多表觀遺傳蛋白因子的小分子抑制劑在癌癥治療方面展現(xiàn)出了令人鼓舞的前景^［19]。癌細(xì)胞與正常細(xì)胞相比，其表觀修飾確實(shí)發(fā)生了很大的變化。然而，造成癌細(xì)胞表觀修飾異常的原因，很大程度上仍然是基因突變。由基因突變所引發(fā)的細(xì)胞信號(hào)通路網(wǎng)絡(luò)的變化，通過(guò)轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控，自然能夠引起表觀修飾的異常；更重要的，在許多癌癥當(dāng)中，參與DNA和組蛋白修飾的表觀遺傳調(diào)控蛋白也出現(xiàn)了基因突變。

例如，超過(guò)20%的癌癥中都存在SWI/SNF染色質(zhì)重塑復(fù)合物（SWI/SNF chromatin-remodeling complex）突變，而它僅僅是細(xì)胞中存在的100多種染色質(zhì)重塑復(fù)合物之一^[20]。另外，DNA甲基化修飾因子TET2和DNMT3a的突變，在白血病發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮重要作用^[21]。除此以外，某些基因，如異檸檬酸脫氫酶（IDH）的突變，導(dǎo)致代謝產(chǎn)物的異常積累，或者改變某些重要細(xì)胞信號(hào)通路的調(diào)控，從而間接影響癌細(xì)胞表觀遺傳修飾^[22]。因此，癌細(xì)胞中表觀遺傳學(xué)的變化，歸根結(jié)底還是落腳在相關(guān)基因的突變。

通過(guò)以上分析，筆者更加相信基因突變是癌癥發(fā)生的“因”，而非“果”。但反對(duì)該觀點(diǎn)的人又要說(shuō)了：如果癌癥確實(shí)是由基因突變引起的，那么得證明阻斷了基因突變，人就不會(huì)得癌癥了。然而，想要徹底阻斷基因突變——這個(gè)千百萬(wàn)年來(lái)生物進(jìn)化的源泉——無(wú)異于逆天而行，這讓現(xiàn)代科學(xué)的研究者們從何下手呢？

參考資料：

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延伸閱讀：

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