“發(fā)汗”炮制法是常用的中藥產(chǎn)地加工方法之一，即將鮮藥材加熱或半干燥后，密閉堆積發(fā)熱，使其內(nèi)部水分向外蒸發(fā)，并凝結(jié)成水珠附于藥材的表面，尤如人體出汗，故稱為“發(fā)汗”^[1]。在古代本草中，產(chǎn)地初加工最早記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》：“陰干、爆干、采造時(shí)日、土熟土地所出?！薄肚Ы鹨矸健芬舱撌龅溃骸胺蛩幩?，不依陰干、爆干，雖有藥名，終無藥實(shí)?！闭f明藥材進(jìn)行初加工的重要性，有利于保證藥材的質(zhì)量^[2]。只有在近代相關(guān)書籍中才能找到中藥材“發(fā)汗”炮制的相關(guān)記載，因此推測(cè)“發(fā)汗”炮制法是在藥材產(chǎn)地初加工的實(shí)踐中逐漸發(fā)展起來的?！吨袊?guó)藥典》2010年版規(guī)定玄參、杜仲、茯苓、厚樸、續(xù)斷等藥材采用“發(fā)汗”炮制法進(jìn)行產(chǎn)地加工^[1]。另外，在《中草藥初加工技術(shù)》中，大黃、川芎、天麻、何首烏、藿香、梔子、石斛等也有采用“發(fā)汗”炮制法進(jìn)行初加工的記載^[3]。在實(shí)際生產(chǎn)中，板蘭根、薄荷、黃芪等藥材也采用“發(fā)汗”法炮制^[4]。

1  中藥材的“發(fā)汗”炮制工藝

有些根類、根莖類、皮類和全草類藥材在采收后初加工過程中要進(jìn)行“發(fā)汗”處理?！吨袊?guó)藥典》2010年版規(guī)定“發(fā)汗”炮制的具體操作方法為直接堆置“發(fā)汗”炮制法，即將中藥材直接堆置“發(fā)汗”至藥材變色，如杜仲、秦艽^[1]。除《中國(guó)藥典》規(guī)定外，在實(shí)際生產(chǎn)中常用的“發(fā)汗”炮制法還有以下幾種。

1.1  反復(fù)“發(fā)汗”炮制法

藥材除去雜質(zhì)堆置“發(fā)汗”后，攤開晾至表面干燥，堆積“發(fā)汗”反復(fù)幾次至藥材表面出現(xiàn)皺紋，其內(nèi)部水分大部分散失后陰干，此方法適用于不易干燥的藥材，如玄參、茯苓等^[5]。

1.2  “水汗”炮制法

將藥材放入容器內(nèi)，以水蒸或者置沸水中微煮，至藥材蒸軟、表面顏色變深時(shí)取出，堆置陰濕處（如土坑內(nèi)），蓋上青草“發(fā)汗”干燥，如白厚樸^[5]。

1.3  “火汗”炮制法

將藥材用微火烘至半干，堆置“發(fā)汗”至內(nèi)部變色時(shí)再烘干，如茯苓、川續(xù)斷、白術(shù)、地黃、川芎、天麻、大黃、何首烏等^[6]。

1.4  加輔料“發(fā)汗”炮制法

將新鮮的藥材放人甑中，以少量花椒、白礬及水蒸煮，待蒸氣均勻后取出，堆于青草中“發(fā)汗”，如厚樸^[6]。

2  “發(fā)汗”炮制法對(duì)中藥材化學(xué)成分及藥效的影響

現(xiàn)代研究將焦點(diǎn)集中于分析“發(fā)汗”炮制對(duì)藥材化學(xué)成分、藥理活性和藥效作用等方面產(chǎn)生的影響。劉紅亮等^[7]用色差儀和電子鼻測(cè)得厚樸“發(fā)汗”前后顏色及氣味的特征參數(shù)，并以數(shù)值的形式表述。杜偉鋒等^[8]通過分析“發(fā)汗”前后的指紋圖譜，并加以比較，再通過先進(jìn)的分析檢測(cè)手段，確認(rèn)化合物，進(jìn)而闡明“發(fā)汗”的物質(zhì)基礎(chǔ)；針對(duì)藥材的主要藥效，開展“發(fā)汗”前后藥效差異的比較，并通過多維譜效關(guān)系尋找發(fā)汗物質(zhì)基礎(chǔ)與藥效之間的相關(guān)性，最終闡明其“發(fā)汗”機(jī)制。

2.1  “發(fā)汗”炮制法對(duì)中藥材化學(xué)成分的影響

中藥“發(fā)汗”后能增加其活性前體化合物的來源，同時(shí)起到減毒增效的作用，使無效化學(xué)成分轉(zhuǎn)變?yōu)橛行Щ瘜W(xué)成分，促進(jìn)活性成分的吸收，減少中藥的生產(chǎn)成本，為中藥組分代謝機(jī)制研究提供輔助手段，實(shí)現(xiàn)將微生物轉(zhuǎn)化技術(shù)應(yīng)用于中藥生產(chǎn)的目標(biāo)。

“發(fā)汗”炮制法是厚樸常用的一種產(chǎn)地初加工方法，其中厚樸中的主要成分為和厚樸酚與厚樸酚、揮發(fā)油等成分，在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，主治食積氣滯、腹脹便秘、濕阻中焦、脘痞吐瀉、痰壅氣逆、胸滿喘咳^[1]。余盛賢等^[9]采用高效液相色譜（HPLC）與氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）檢測(cè)，“發(fā)汗”炮制后厚樸酚類成分和揮發(fā)油類成分的量均產(chǎn)生變化，與未“發(fā)汗”厚樸比較有顯著差異，“發(fā)汗”炮制后的樣品較未處理樣品在厚樸酚與和厚樸酚量均有明顯提高，桉葉醇量下降。韋熹苑等^[10]研究發(fā)現(xiàn)“發(fā)汗”炮制能提高厚樸中揮發(fā)油的量，“發(fā)汗”炮制1周后厚樸揮發(fā)油的量提高將近1倍。另外有研究報(bào)道表明蒸后或煮后再進(jìn)行“發(fā)汗”炮制的厚樸其酚類成分的量較高，與未“發(fā)汗”相比質(zhì)量較佳，而揮發(fā)油的量在“發(fā)汗”炮制后有所降低^[11]。采用《中國(guó)藥典》中浸出物測(cè)定法測(cè)定后，發(fā)現(xiàn)厚樸經(jīng)“發(fā)汗”炮制處理后，浸出物量提升23%^[12]。以上研究表明“發(fā)汗”炮制法能提高厚樸中酚類成分的量，而對(duì)揮發(fā)油量的影響尚不明確，還需要進(jìn)一步的研究分析。

另一種主要采用“發(fā)汗”炮制法處理的藥材為續(xù)斷?，F(xiàn)代研究已明確續(xù)斷總皂苷可促進(jìn)成骨細(xì)胞分化和形成，有抗骨質(zhì)疏松，治療骨折、阿爾茨海默病（AD）和白血病的作用，而川續(xù)斷皂苷Ⅵ是續(xù)斷中治療AD和白血病的活性物質(zhì)。續(xù)斷“發(fā)汗”炮制后醇溶性浸出物的量降低5%，總皂苷的量也降低，川續(xù)斷皂苷Ⅵ的量則升高了23%^[13]。杜偉鋒等^[14]采用HPLC-ESI/MS研究發(fā)現(xiàn)川續(xù)斷經(jīng)“發(fā)汗”處理后綠原酸量下降了2.34%，川續(xù)斷皂苷Ⅵ量升高4.43%。王初^[15]測(cè)得不“發(fā)汗”續(xù)斷中的水溶性浸出物和川續(xù)斷皂苷Ⅵ量較“發(fā)汗”續(xù)斷高，分別提高0.8%和2.88%。由此可見，續(xù)斷“發(fā)汗”后川續(xù)斷皂苷Ⅵ量升高，其他成分亦有變化。

另外，丹參經(jīng)“發(fā)汗”后，迷迭香酸的量降低，丹酚酸B的量無明顯變化，而隱丹參酮和丹參酮Ⅱ_A的量顯著升高^[16]。另外，傳統(tǒng)“發(fā)汗”法能提高丹參中丹參酮Ⅱ_A的量^[17]。許臘英等^[18]研究表明茯苓發(fā)汗能使茯苓多糖的量升高。不同初加工方法對(duì)茯苓中多糖的量有極顯著影響，用“發(fā)汗”處理后再切制的方法，其多糖的量高于趁鮮切制法，而對(duì)三萜類成分則無顯著影響^[19]?！鞍l(fā)汗”干燥對(duì)禹白芷藥材中揮發(fā)性成分的量有較大的影響，不適于在產(chǎn)地加工中使用^[20]。

2.2  “發(fā)汗”炮制法對(duì)中藥材藥效的影響

目前對(duì)中藥材“發(fā)汗”前后化學(xué)成分變化的研究遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于對(duì)藥理學(xué)變化的研究，對(duì)于藥物毒理方面研究甚少。尹愛武等^[21]研究表明，厚樸“發(fā)汗”后改善大鼠胃動(dòng)力障礙和抗?jié)冏饔酶鼜?qiáng)，厚樸“發(fā)汗”炮制工藝是必要的。金奇等^[13]、杜偉峰等^[14]、王初^[15]發(fā)現(xiàn)續(xù)斷“發(fā)汗”后川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量升高，相關(guān)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)^[22]亦表明川續(xù)斷皂苷Ⅵ具有增加骨密度的作用，與中醫(yī)臨床應(yīng)用續(xù)斷“補(bǔ)肝腎，強(qiáng)筋骨，續(xù)折斷”的主治和功能相吻合，同時(shí)亦具有神經(jīng)及心肌保護(hù)作用。王麗楠等^[23]采用HPLC法，以血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制率為指標(biāo)，考察了杜仲“發(fā)汗”前后其降壓作用的變化，發(fā)現(xiàn)未“發(fā)汗”樣品對(duì)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶的抑制率顯著低于“發(fā)汗”樣品。

2.3  不同“發(fā)汗”炮制方法對(duì)中藥材質(zhì)量的影響

“發(fā)汗”炮制法為一種產(chǎn)地初加工方法，在不同的產(chǎn)地“發(fā)汗”炮制法存在著差異。研究證明不同產(chǎn)地采用不同“發(fā)汗”方法的玄參中核苷含量差異較大，經(jīng)反復(fù)“發(fā)汗”處理后，其有效成分的量顯著高于普通堆積“發(fā)汗”法^[24]。陳佩東等^[25]發(fā)現(xiàn)厚樸經(jīng)水蒸15 min后，以薄膜代替青草覆蓋“發(fā)汗”8 d時(shí)所含厚樸酚與和厚樸酚的量最高。許臘英等^[18]以茯苓多糖為主要考察目標(biāo)，在《中國(guó)藥典》規(guī)定的基礎(chǔ)上，確定了茯苓的最佳炮制工藝：直接堆積發(fā)汗2次，加12倍量水，洗2次，每次洗3 min，蒸20min，趁熱去皮切成大小約為0.5 cm×0.5cm×0.5 cm的茯苓丁于60 ℃烘8 h，其間翻動(dòng)2次。

3  “發(fā)汗”炮制法相關(guān)機(jī)制探討

3.1  生物酶的作用

“發(fā)汗”炮制的過程中由于藥材還處于新鮮的狀態(tài)，含水量較高，其中的生命活動(dòng)仍在進(jìn)行，化學(xué)成分間的相互轉(zhuǎn)化等理化變化沒有停止。酶是一種具有生物活性的特殊蛋白質(zhì)，“發(fā)汗”能促進(jìn)生物組織內(nèi)部酶發(fā)揮作用。藥材在“發(fā)汗”的過程中，組織細(xì)胞的呼吸作用使其自身產(chǎn)熱，溫度升高，為一系列復(fù)雜的酶促、水解、氧化、聚合等生化反應(yīng)創(chuàng)造了有利條件，從而導(dǎo)致了藥材外觀性狀和內(nèi)在品質(zhì)的變化^[3]，進(jìn)而對(duì)藥材的化學(xué)成分、藥理活性產(chǎn)生影響。在“發(fā)汗”過程中涉及到的常見酶有多酚氧化酶、過氧化物酶、水解酶等。厚樸藥材經(jīng)水法“發(fā)汗”后，其中木蘭苷A的量較未“發(fā)汗”者顯著下降，其原因推測(cè)與酶的活性有關(guān)^[9]。

3.1.1  多酚氧化酶的作用  多酚氧化酶是自然界分布很廣的一種酶，在昆蟲、植物、真菌等機(jī)體中廣泛存在，在果蔬以及茶葉加工中對(duì)其品質(zhì)產(chǎn)生重要的影響^[26]。多酚氧化酶是使藥材在“發(fā)汗”炮制中發(fā)生色澤和藥效的變化的重要酶之一。

多酚氧化酶存在于植物細(xì)胞中，在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)形成，通過一定的方式轉(zhuǎn)運(yùn)至質(zhì)體內(nèi)而成為活性形式。細(xì)胞中，多酚氧化酶與底物通常存在于不同的區(qū)域，多酚氧化酶在質(zhì)體中以潛伏狀態(tài)存在，其作用底物存在于液泡中。然而中藥材在“發(fā)汗”的過程中，隨著內(nèi)部溫度的升高，植物體內(nèi)發(fā)生生理紊亂或組織受損，多酚氧化酶與底物的亞細(xì)胞區(qū)域化被打破，其活性隨之增高并與底物發(fā)生反應(yīng)^[27]。

中藥材地黃中含有豐富的酚類物質(zhì)如咖啡酰葡萄糖苷等，這些物質(zhì)在多酚氧化酶催化作用下形成對(duì)應(yīng)的醌類產(chǎn)物，呈淺色的醌式結(jié)構(gòu)分子，其進(jìn)一步聚合或與其他芳香化合物結(jié)合形成更大的共軛體系，產(chǎn)生黑色或褐色，即產(chǎn)生褐變，從而導(dǎo)致藥材品質(zhì)的改變^[3]。

3.1.2  過氧化物酶的作用  過氧化物酶是廣泛而大量存在于植物體內(nèi)且活性較高的一種氧化還原酶。過氧化物酶是一種保護(hù)酶類，對(duì)逆境脅迫常以升高自身酶活力作為反應(yīng)，以保護(hù)機(jī)體的生理活性。藥材在“發(fā)汗”炮制過程中，在特定的濕度條件下，溫度不斷升高，細(xì)胞的呼吸作用加強(qiáng)，從而使過氧化物酶的活性升高。在過氧化物酶的催化作用下，藥材的化學(xué)成分也隨之發(fā)生改變。含有單萜類物質(zhì)的中藥材“發(fā)汗”炮制前后可能存在氧化還原反應(yīng)，生成單萜類芳香產(chǎn)物，進(jìn)而改變藥材的品質(zhì)與氣味，如檸檬^[28]。

3.1.3  水解酶的作用  在藥材“發(fā)汗”炮制的過程中，植物組織細(xì)胞受損或解離，在一定的濕度和溫度條件下，水解酶類開始發(fā)揮其作用。細(xì)胞壁及細(xì)胞間質(zhì)中的纖維素、半纖維素、果膠質(zhì)等成分被水解，導(dǎo)致細(xì)胞壁的致密構(gòu)造被破壞，植物細(xì)胞壁及細(xì)胞間質(zhì)結(jié)構(gòu)產(chǎn)生局部疏松、膨脹、破碎等變化，細(xì)胞壁及細(xì)胞間質(zhì)等傳質(zhì)屏障的作用減弱，存在于不同部位的化學(xué)成分得以接觸，進(jìn)而發(fā)生一系列生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)，最終引起中藥材“發(fā)汗”炮制前后化學(xué)成分和藥材品質(zhì)的變化^[29]。王建華等^[30]研究表明，堆積發(fā)汗的玄參藥材與未“發(fā)汗”藥材相比，其哈巴俄苷的量降低，哈巴苷和肉桂酸量升高，其原因可能是“發(fā)汗”使哈巴俄苷的肉桂?；猓闪斯蛙蘸腿夤鹚?。

3.1.4  糖苷水解酶的作用  糖苷水解酶在部分藥材的“發(fā)汗”炮制過程中發(fā)揮著重要的作用。糖苷水解酶能專一性、選擇性地對(duì)糖苷鍵產(chǎn)生水解作用，釋放出相應(yīng)的糖配體和糖基。

天麻類藥材含有天麻苷等化合物，在“發(fā)汗”炮制前后發(fā)生糖基化反應(yīng)，其功效成分天麻苷在酶催化下水解釋放出葡萄糖和天麻素。而糖基化通常是植物或微生物中天然產(chǎn)物生物合成的最后一步。地黃、玄參在堆置“發(fā)汗”過程中，其中富含的環(huán)烯醚萜類成分發(fā)生了一系列的氧化、聚合、轉(zhuǎn)化等反應(yīng)，地黃中梓醇在β-葡萄糖苷酶的作用下發(fā)生酶解或在酸性環(huán)境下發(fā)生水解，生成穩(wěn)定的顯色物質(zhì)^[31]。

3.2  熱脅迫作用

在植物生長(zhǎng)發(fā)育過程中，如果周圍的環(huán)境條件顯著偏離于植物適宜的環(huán)境條件，那么該環(huán)境就會(huì)對(duì)植物的生長(zhǎng)構(gòu)成脅迫。在脅迫的條件下植物為了提高對(duì)生態(tài)環(huán)境的適應(yīng)性，一方面會(huì)在形態(tài)結(jié)構(gòu)上發(fā)生改變，另一方面會(huì)在生理生化上發(fā)生改變，生成一些與抗環(huán)境脅迫密切相關(guān)的次級(jí)代謝產(chǎn)物^[32]。藥材在“發(fā)汗”炮制過程中，內(nèi)部溫度隨著“發(fā)汗”炮制的時(shí)間逐漸升高，當(dāng)達(dá)到一定溫度時(shí)藥材細(xì)胞相當(dāng)于處于高溫脅迫的環(huán)境中，相關(guān)的基因得以誘導(dǎo)表達(dá)，從而最終產(chǎn)生并累積某些次生代謝產(chǎn)物。植物次生代謝產(chǎn)物是由次生代謝產(chǎn)生的一類細(xì)胞生命活動(dòng)或植物生長(zhǎng)發(fā)育正常運(yùn)行的非必需的小分子有機(jī)物。研究表明，許多中藥的藥理作用與其所含的次生代謝產(chǎn)物有關(guān)，次生代謝產(chǎn)物通常也是其主要藥效成分，如黃酮類、酚類、香豆素類等^[33-37]。

特定的環(huán)境刺激可以誘導(dǎo)植物細(xì)胞內(nèi)控制次生代謝產(chǎn)物合成過程相關(guān)酶的基因表達(dá)，最終促進(jìn)次生代謝產(chǎn)物的生成。外界環(huán)境對(duì)細(xì)胞外部的信號(hào)受體產(chǎn)生刺激，從而激活次生代謝信使發(fā)出信號(hào)分子，通過一系列的信號(hào)傳遞途徑轉(zhuǎn)入細(xì)胞，啟動(dòng)關(guān)鍵合成酶基因的表達(dá)，最終促進(jìn)相關(guān)次生代謝產(chǎn)物的合成。也就是說，次生代謝產(chǎn)物在植物體內(nèi)的合成和積累是一定的環(huán)境條件誘導(dǎo)作用下相關(guān)基因表達(dá)而產(chǎn)生的最終結(jié)果。

目前，有多項(xiàng)研究已經(jīng)證明植物受到各種環(huán)境脅迫后，會(huì)引起體內(nèi)物質(zhì)成分的變化。雞爪槭經(jīng)高溫脅迫后，葉片的相對(duì)電導(dǎo)率和丙二醛（MDA）量分別為對(duì)照組的137.41%和139.91%，超氧化物歧化酶（SOD）和過氧化物酶（POD）的活性分別為對(duì)照組的304.06%和258.88%，脯氨酸和可溶性蛋白量分別為對(duì)照組的215.98%和368.85%^[38]。黃連經(jīng)高溫脅迫后，可溶性糖量最高值比對(duì)照組增加了1倍，脯氨酸量增加了7倍^[39]。焉申堂等^[40]采用HPLC法測(cè)定熱脅迫后黃柏中小檗堿量的變化，結(jié)果表明根中小檗堿量高于莖和葉，說明高溫對(duì)小檗堿的合成具有促進(jìn)作用。

4  結(jié)語與展望

“發(fā)汗”是在民間長(zhǎng)期生產(chǎn)和加工中總結(jié)出的一種炮制方法，現(xiàn)代對(duì)“發(fā)汗”炮制法的研究主要集中于對(duì)比“發(fā)汗”炮制前后化學(xué)成分的變化，對(duì)其作用機(jī)制的研究很少，因此無法制定規(guī)范化的“發(fā)汗”炮制法標(biāo)準(zhǔn)，從而大大局限了“發(fā)汗”炮制法的應(yīng)用范圍。未來對(duì)于“發(fā)汗”炮制法的研究應(yīng)該著眼于對(duì)其內(nèi)在作用機(jī)制的探究，可以從生物酶的作用以及植物抗熱脅迫等方面入手，為“發(fā)汗”炮制法的應(yīng)用提供理論依據(jù)，為大規(guī)模推廣“發(fā)汗”炮制法奠定理論基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)（略） 

來  源：陳  茹，陳  成，楊興鑫，俞  捷，趙榮華，顧  雯. 中藥“發(fā)汗”炮制法的現(xiàn)代研究進(jìn)展 [J]. 中草藥, 2018, 49(2):489-493.