無論是母種、原種或栽培種,如果未及時(shí)使用,其菌絲就會很快衰老,降低生產(chǎn)力,影響產(chǎn)量和質(zhì)量。因此,菌種必須進(jìn)行適當(dāng)?shù)谋４?。其目的是保持菌種的生活力,降低死亡速度,保持菌種原有的優(yōu)良性狀,防止退化,確保菌種純一,防止雜菌感染。

       菌種保存的基本原理,主要是通過采用低溫、干燥與缺氧的條件,以中止菌種的繁殖,降低其新陳代謝,使之處于休眠狀態(tài)。菌種保存的方法很多,常用的為斜面低溫保存法,液體石蠟保存法等。有條件的還可采用冷凍真空干燥保存法。

      1.斜面低溫保存法

         這是最簡便最普通的保存方法。即將菌絲生長良好的斜面菌種,置于冰箱內(nèi);在4℃左右低溫下保存;以后每隔2~3個(gè)月轉(zhuǎn)管移接一次。這種保存方法適于大多數(shù)食用菌菌種。但草菇菌種在5℃以下很快死亡;所以草菇的菌種,不斷放在冰箱中,置于室溫保存即可,每隔2~3個(gè)月,也須重新移接一次,防止菌種老化。為防止菌種在保存過程中積累過多的酸,在配制保存母種培養(yǎng)基時(shí)添加0.2%磷酸二氫鉀或0.02%碳酸鈣等鹽類,對培養(yǎng)其PH 值的變化能起緩沖作用。

        為了延長保存時(shí)間,試管口處要用塑料薄膜包扎,以防培養(yǎng)基干固。在農(nóng)村沒有冰箱設(shè)備的,可把母種試管,用石蠟封口,再用塑料薄膜包封,沉放于清涼的井底保存。

         2.液體石蠟保存法

         食用菌的菌絲體都可用此法保存,方法簡單,只在斜面菌種試管內(nèi),注入一層已滅過菌的液體石蠟,注入量以高出斜面1厘米為宜,使菌種與空氣隔絕,降低其新陳代謝的活動,然后在棉塞外包以塑料薄膜,直立存放于室內(nèi)干燥處或低溫下保存,一般可保存一年以上。液體石蠟使用前,要在且公斤/厘米2的壓力下維持1小時(shí),連續(xù)滅菌兩次。徹底滅菌后方可使用。滅菌后的液體石蠟,由于有水蒸氣滲入,會影響菌種保存質(zhì)量,因此,需要放在44℃烘箱中,烘烤數(shù)小時(shí),使水蒸氣蒸發(fā)。在室溫下也可以,不過所需的時(shí)間要長些。

         使用液體石蠟菌種時(shí),只要用接種計(jì)從斜面上挑取少許菌體,放在新鮮的培養(yǎng)基上;經(jīng)過培養(yǎng),即可應(yīng)用。原種則重新蠟封,繼續(xù)保存。

        3.木屑試管菌種保存法

         用雜木屑按原種的培養(yǎng)基配制裝入大號試管,容量為管高的三分之二,擦凈管口塞緊棉塞,用牛皮紙包扎管口后高壓滅菌,然后移入母種,在25~28℃下培養(yǎng),待長滿菌絲后,立即移到低溫干燥環(huán)境保存、或埋于尿素、硝酸銨或地洞中保存,效果更好,并能延長保存時(shí)間。

         4.冷凍干燥保藏法

        這種方法采用真空、干燥、低溫等手段,使菌種新陳代謝活動處于相對靜止?fàn)顟B(tài),在低溫下快速冷凍,又在低溫下真空干燥,而使菌細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與成分保持原來狀態(tài)而保存菌種。還有沙土保存法、液氮超低溫保藏法、濾紙片保存法、菌絲球生理鹽水保藏法、麥粒保藏法、干孢子真空保藏法等。要根據(jù)自己的工作需要及具體條件而定。一邊保存,一邊還要分離,復(fù)壯,做好選育工作,延續(xù)菌種的憂良性能。

        原種和栽培種培養(yǎng)好后,應(yīng)立即用于擴(kuò)接栽培種或栽培生產(chǎn),不宜保存過久,時(shí)間越長,生活力越差,也越容易感染雜菌。若因特殊情況不能及時(shí)使用,原種瓶口用牛皮紙包好,置4~14℃條件下可保藏一年左右。栽培種短期保存也可放于陰涼、干燥通風(fēng)的室內(nèi),但種瓶不宜堆疊過高,以免堆內(nèi)發(fā)熱,加速菌絲老化。