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隨著分子生物學(xué)的迅速發(fā)展，在實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建各種載體、克隆及分析目標(biāo)基因，使疾病深入至分子水平研究成為可能，基因診斷及基因治療技術(shù)也隨之誕生。 目前基因治療研究的熱門方法是將外源基因DNA或RNA片段導(dǎo)入靶細(xì)胞或組織，研究靶基因的上調(diào)或抑制情況。從而，選擇合適高效的基因?qū)虢橘|(zhì)系統(tǒng)尤為關(guān)鍵，而病毒載體也隨之成為了當(dāng)前基因治療載體研究的熱點(diǎn)，其優(yōu)勢(shì)在于： 1、技術(shù)經(jīng)歷了多年的研究，已趨于成熟，可用于產(chǎn)業(yè)化大量生產(chǎn)； 2、病毒基因組的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、分子背景比較清楚，穩(wěn)定易于改造、易于制備； 3、病毒的宿主范圍廣，且具有高效的靶向特異性； 4、在目的基因表達(dá)方面相對(duì)于脂質(zhì)體介導(dǎo)的效果更明顯、長(zhǎng)時(shí)、穩(wěn)定； 5、通過載體改造的方式形成了復(fù)制缺陷型結(jié)構(gòu)，安全性高； 6、可提高RNA干擾和基因過表達(dá)效率，增加實(shí)驗(yàn)成功率。 用于病毒包裝的載體主要有腺病毒載體和慢病毒載體。 和技術(shù)服務(wù)，慢/腺病毒包裝穩(wěn)定性好、滴度高、純度高，價(jià)格優(yōu)惠、周期短。 那么，慢病毒和腺病毒應(yīng)該如何選擇呢？ 慢病毒可以插入細(xì)胞基因組，穩(wěn)定表達(dá)，持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)。 包裝周期較短（一般要兩個(gè)月），感染效率相對(duì)于腺病毒要低很多。不能擴(kuò)增，一次包裝的病毒用完后如果再需要只能重新包裝，成本高。一次包裝所得到的的病毒滴度也相對(duì)較低，不大適合直接用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。 腺病毒感染效率高，很多細(xì)胞都能達(dá)到近 99%。純化后的腺病毒可以直接進(jìn)行動(dòng)物活體注射?？梢栽隗w外擴(kuò)增，每次使用完后，可以自己用包裝細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增，節(jié)約成本。一次包裝所得到的滴度較高。不整合到基因組，無法穩(wěn)定表達(dá)。包裝過程相對(duì)繁瑣，腺病毒包裝周期比慢病毒較長(zhǎng)（一般要兩個(gè)半月到三個(gè)月）。 總之，慢病毒包裝簡(jiǎn)單、周期短、可穩(wěn)定表達(dá)；腺病毒滴度高、感染及表達(dá)蛋白的能力強(qiáng)。在實(shí)驗(yàn)中，需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪M(jìn)行實(shí)際選擇。 腺病毒及慢病毒特點(diǎn)綜合整理如下：
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