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背景技術(shù)： 非洲菊（Gerbera jamesonii Bolus）是世界五大鮮切花之一屬多年生宿根草本花卉。其花色繁多，花枝挺拔，花期長(zhǎng)且不易衰敗，深受花卉種植者和消費(fèi)者喜愛，具有極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。近年來(lái)，隨著種植面積的不斷擴(kuò)增，非洲菊病害尤其是根腐病日益嚴(yán)重，已成為制約我國(guó)非洲菊產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的重要難題。 印度梨形孢宿主范圍廣、對(duì)其宿主植物具有廣泛的促進(jìn)生長(zhǎng)和增強(qiáng)植物對(duì)生物和非生物脅迫抗性的作用。將印度梨形孢接種至非洲菊根系，利用印度梨形孢對(duì)植物的有益作用有可能是提高非洲菊根腐病抗性的有效方法。 技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素： 本發(fā)明的目的在于提供一種提高非洲菊根腐病抗性的方法，進(jìn)而解決生產(chǎn)上非洲菊根腐病帶來(lái)的問(wèn)題。 本發(fā)明的技術(shù)方案： 一種提高非洲菊根腐病抗病性的方法，其中包括印度梨形孢發(fā)酵液的制備，非洲菊組培苗的移栽，隱地疫霉發(fā)酵液的制備，隱地疫霉接種及發(fā)病情況觀察。其特征在于，通過(guò)接種印度梨形孢提高非洲菊的根腐病抗性。本發(fā)明步驟簡(jiǎn)單、可操作性強(qiáng)、效果顯著。 具體方法為： （1）印度梨形孢發(fā)酵液的制備 從保存在非洲菊組培苗生根培養(yǎng)基中的印度梨形孢菌落邊緣挑取直徑為5 mm的菌塊2塊，置于PDA液體培養(yǎng)基內(nèi)，在28℃，120 r/min的搖床內(nèi)培養(yǎng)3天，經(jīng)單層紗布過(guò)濾后收集濾液，加水稀釋獲得孢子濃度為5×105個(gè)/ml的印度梨形孢發(fā)酵液； （2）印度梨形孢接種及非洲菊組培苗的移栽 將生根良好的非洲菊組培苗開蓋煉苗2天后，洗凈根系，在印度梨形孢發(fā)酵液中浸泡2 h，之后移栽至基質(zhì)中； （3）隱地疫霉發(fā)酵液的制備 活化隱地疫霉菌株，然后挑取菌落邊緣的氣生菌絲接種于PDA固體培養(yǎng)基上；于28℃培養(yǎng)箱內(nèi)暗培養(yǎng)5 d，挑取菌落邊緣直徑為5 mm的菌塊2-3塊于PDA液體培養(yǎng)基內(nèi)，在溫度為28℃，轉(zhuǎn)速為120 r/min的搖床內(nèi)培養(yǎng)2天，加水稀釋獲得孢子濃度為2×105個(gè)/ml的隱地疫霉發(fā)酵液； （4）隱地疫霉接種及發(fā)病情況觀察 將移栽1個(gè)月的接種印度梨形孢的非洲菊幼苗用刀片傷根后浸泡于隱地疫霉發(fā)酵液中2小時(shí)，取出后移栽至裝有腐殖質(zhì)的花盆中，置于25±2℃的恒溫培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)室光照強(qiáng)度為1500±200lx，光照時(shí)間為12 h/d，接種第2天開始觀察植株的發(fā)病情況，以未接種印度梨形孢的非洲菊幼苗作為對(duì)照。 本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)： 1、本發(fā)明所用印度梨形孢保存于活體植株生根培養(yǎng)基中，對(duì)宿主的定殖能力更強(qiáng)。 2、本發(fā)明可以顯著提高非洲菊根腐病抗性，具有較高的應(yīng)用和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。 3、本發(fā)明操作簡(jiǎn)單，可行性強(qiáng)。 附圖說(shuō)明 圖1 印度梨形孢對(duì)非洲菊根腐病抗性的影響.A：接種了印度梨形孢的非洲菊；B：未接種印度梨形孢的非洲菊。 具體實(shí)施方式 下面結(jié)合具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步說(shuō)明，但本發(fā)明并不僅限于此。 實(shí)施例1 1、印度梨形孢發(fā)酵液的制備 從保存在非洲菊組培苗生根培養(yǎng)基中的印度梨形孢菌落邊緣挑取直徑約為5 mm的菌塊2塊，置于裝有100 ml滅菌的PDA液體培養(yǎng)基的250 ml三角瓶?jī)?nèi)，在28℃，120 r/min的搖床內(nèi)培養(yǎng)3天，經(jīng)單層紗布過(guò)濾后收集濾液，加水稀釋獲得孢子濃度為5×105個(gè)/ml的印度梨形孢發(fā)酵液； 2、印度梨形孢接種及非洲菊組培苗的移栽 將生根良好的‘玲瓏’非洲菊組培苗開蓋煉苗2天后，洗凈根系，在印度梨形孢發(fā)酵液中浸泡2 h，之后移栽至基質(zhì)中； 3、隱地疫霉發(fā)酵液的制備 活化隱地疫霉菌株，然后挑取菌落邊緣菌絲接種于PDA固體培養(yǎng)基上；于28℃培養(yǎng)箱內(nèi)暗培養(yǎng)5 d，挑取菌落邊緣直徑為5 mm的菌塊3塊于裝有100 ml滅菌的PDA液體培養(yǎng)基的250 ml 三角瓶?jī)?nèi)，在溫度為28℃，轉(zhuǎn)速為120 r/min的搖床內(nèi)培養(yǎng)2天，加水稀釋獲得孢子濃度為2×105個(gè)/ml的隱地疫霉發(fā)酵液； 4、隱地疫霉接種及發(fā)病情況觀察 將移栽1個(gè)月的接種印度梨形孢的‘玲瓏’非洲菊幼苗用刀片傷根后浸泡于隱地疫霉發(fā)酵液中2小時(shí)，取出后移栽至裝有腐殖質(zhì)的花盆中，置于25±2℃的恒溫培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)室光照強(qiáng)度為1500±200lx，光照時(shí)間為12 h/d，接種第2天開始觀察植株的發(fā)病情況。以未接種印度梨形孢的‘玲瓏’非洲菊幼苗作為對(duì)照。 隱地疫霉侵染6天后，使用印度梨形孢發(fā)酵液處理的‘玲瓏’非洲菊生長(zhǎng)良好（圖1A），而對(duì)照組‘玲瓏’非洲菊第2天開始出現(xiàn)輕微失水，于第6天時(shí)，葉片失水嚴(yán)重，根部腐爛脫落，植株萎蔫而死（圖1B）。 因此可以看出：印度梨形孢可以提高非洲菊根腐病的抗病性。 本發(fā)明利用浸根法獲得有印度梨形孢定殖的非洲菊，顯著提高非洲菊根腐病抗病性，對(duì)于非洲菊生產(chǎn)意義重大，具有較高的應(yīng)用和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
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來(lái)自： 海底叢林 > 《移栽成活包衣蘸根》
