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專利名稱：一種治療小兒腹瀉的外用軟膏劑的制作方法 技術(shù)領(lǐng)域： 本發(fā)明屬于含有原料或其與不明結(jié)構(gòu)之反應(yīng)產(chǎn)物的醫(yī)用配制品技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及到來源于植物的材料。 背景技術(shù)： 小兒腹瀉是兒科常見病、多發(fā)病之一，6個(gè)月至2歲嬰幼兒發(fā)病率更高，四季均可發(fā)生，尤以夏秋季節(jié)較多。其癥狀多見大便次數(shù)增多，糞質(zhì)稀薄或如水樣，伴有嘔吐，或惡寒發(fā)熱等，對(duì)兒童健康危害較大，若治療不及時(shí)時(shí)或治療不當(dāng)，可轉(zhuǎn)成慢性，出現(xiàn)傷陰、傷陽或陰陽兩傷等危重變證，甚至氣脫液竭而死亡。遷延不愈者，可引起營養(yǎng)不良，影響小兒生長發(fā)育，成為疳證。 目前在臨床上用于治療小兒腹瀉常以口服藥物治療，因口感不佳，患兒懼怕服藥，不易被接受。治療小兒腹瀉常以口服藥物為主，口服藥物主要以抗菌素為主，有綠酶素、四環(huán)素、金霉素、黃連素、增效黃連素等，抗菌素對(duì)小兒患者的胃刺激很大，患者服藥后經(jīng)常出現(xiàn)嘔吐，不進(jìn)食，有的患者還出現(xiàn)皮膚過敏，長期多次服用抗菌素，還會(huì)引起白血球下降，免疫功能下降等疾病，嚴(yán)重著還會(huì)引起白血病。肌肉注射的藥物較少，而且不易為患兒和家長所接受。靜脈注射的藥物仍然以抗菌素為主，同樣存在上述的副作用，另外由于患兒血管細(xì)較細(xì)，暴露不清，針頭不易扎入，常常反復(fù)多次，有時(shí)還在頭部或足部靜脈注射，每注射一次花費(fèi)的時(shí)間較多，而且患兒的家長不易接受。 目前在臨床使用的外用貼膏劑只有丁桂兒瀉貼(原名寶寶一貼靈)，主要是針對(duì)小兒體質(zhì)虛弱使用而不是針對(duì)濕熱證者使用，目前臨床尚未見有相關(guān)用于治療小兒腹瀉的外用軟膏劑。 發(fā)明內(nèi)容 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于克服上述藥物的缺點(diǎn)，提供一種療效顯著的治療小兒腹瀉的外用軟膏劑。 解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案它是以下述重量份配比的中藥原料按常規(guī)制劑方法制成的外用軟膏劑苦參20～60份木香 2～10份冰片0.1～1份制備本發(fā)明藥物的優(yōu)選中藥原料重量份配比是苦參30～50份木香 3～8份冰片 0.1～0.6份制備本發(fā)明藥物的最佳中藥原料重量份配比是苦參40份木香 6份冰片 0.4份在本發(fā)明的配比中選用了苦參、木香、冰片中藥原料。苦參有清熱燥濕，祛風(fēng)殺蟲的功效，主治濕熱瀉痢，腸風(fēng)便血?？鄥⒃诜街袨榫?，針對(duì)小兒腹瀉濕熱主病證而設(shè)。木香味辛，性溫，歸脾、胃、肝、肺經(jīng)，有行氣止痛，調(diào)中導(dǎo)滯的功效，主治胸脅脹滿，脘腹脹痛，嘔吐泄瀉，痢疾后重，木香輔助苦參加強(qiáng)治療腹瀉及腹瀉所出現(xiàn)的腹痛等癥，方中為臣藥。 冰片味辛、苦，性涼，有開竅醒神，散熱止痛的功效，主治中風(fēng)口噤，熱病神昏，驚癇痰迷，冰片在方中可輔助君、臣藥以加強(qiáng)治療作用，為佐使藥。 本發(fā)明藥物的制備工藝如下木香粉碎成細(xì)粉，過100目篩，備用。 冰片研細(xì)，備用。 苦參每次加10倍量的水提取3次，每次1.5小時(shí)，濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對(duì)密度1.35～1.40(70℃)，減壓干燥(70℃，0.09Mpa)，粉碎成細(xì)粉，備用。 取1/9中藥原料重量的明膠加5倍量水使充分溶脹，瀝去多余的水，加甘油，60℃加熱使充分溶解，蒸去水份，加入苦參提取物細(xì)粉、木香細(xì)粉以及冰片細(xì)粉，充分混勻，攪拌至軟硬適中，色澤一致的軟膏狀，制丸，貼于無紡布上，即得。 本發(fā)明經(jīng)藥效試驗(yàn)證明本發(fā)明藥物體外對(duì)腸道感染常見細(xì)菌大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌、綠膿假單胞菌、腸產(chǎn)毒型大腸埃希氏菌、傷寒沙門氏菌、腸炎沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、痢疾志賀氏菌、變形桿菌、糞鏈球菌、白色假絲酵母菌有較明顯的抑制和滅活作用，改變pH和細(xì)菌接種量不影響本發(fā)明藥物對(duì)大腸埃希氏菌和痢疾志賀氏菌的抗菌作用；灌胃給藥，體內(nèi)對(duì)鼠傷寒沙門氏菌感染小鼠有保護(hù)作用。本發(fā)明藥物腹部涂抹給藥，抑制醋酸刺激的小鼠急性滲出性炎癥反應(yīng)和扭體反應(yīng)，減少番瀉葉刺激的小鼠腹瀉次數(shù)，促進(jìn)正常小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)，減慢腸功能亢進(jìn)小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)。本發(fā)明藥物腹部涂抹給藥，增加大鼠胃液分泌量、胃總酸度和總酸排出量。結(jié)果說明，本發(fā)明藥物具有抗菌、抗炎、止瀉、鎮(zhèn)痛作用，促進(jìn)腸功能正常小鼠的小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)，減慢腸功能亢進(jìn)小鼠的小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)，還可促進(jìn)胃液和胃酸分泌。 具體實(shí)施例方式 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說明，但本發(fā)明不限于這些實(shí)施例。 實(shí)施例1以生產(chǎn)本發(fā)明藥物軟膏劑1000貼為例所用中藥原料和輔料及其重量配比為苦參 3827.59g木香574.14g冰片 38.28g明膠 100g甘油 加至2000g其制備工藝按本發(fā)明軟膏劑的制備工藝進(jìn)行。每貼重2g，每克含生藥2.22g，每次貼1貼，貼于神闕穴位，每日貼1次，2個(gè)月至1周歲的嬰幼兒每天貼3～6小時(shí)。 在本實(shí)施例的配比中，中藥原料各組分的重量份為苦參 40份木香6份冰片 0.4份實(shí)施例2以生產(chǎn)本發(fā)明藥物軟膏劑1000貼為例所用中藥原料和輔料及其重量配比為苦參 4018.10g木香401.81g 冰片 20.09g明膠 100g甘油 加至2000g其制備工藝按本發(fā)明軟膏劑的制備工藝進(jìn)行。每貼重2g，每克含生藥2.22g，每次貼1貼，貼于神闕穴位，每日貼1次，2個(gè)月至1周歲的嬰幼兒每天貼3～6小時(shí)。 在本實(shí)施例的配比中，中藥原料各組分的重量份為苦參 20份木香2份冰片 0.1份實(shí)施例3以生產(chǎn)本發(fā)明藥物軟膏劑1000貼為例所用中藥原料和輔料及其重量配比為苦參 3752.11g木香 625.35g冰片 62.54g明膠 100g甘油 加2000g其制備工藝按本發(fā)明軟膏劑的制備工藝進(jìn)行。每貼重2g，每克含生藥2.22g，每次貼1貼，貼于神闕穴位，每日貼1次，2個(gè)月至1周歲的嬰幼兒每天貼3～6小時(shí)。 在本實(shí)施例的配比中，中藥原料各組分的重量份為苦參 60份木香 10份冰片 1份為了驗(yàn)證本發(fā)明藥物對(duì)小兒腹瀉的治療效果，申請(qǐng)人委托西安集賢藥業(yè)有限公司采用本發(fā)明實(shí)施例1配比制備的本發(fā)明藥物(試驗(yàn)時(shí)名稱為小兒參香止瀉貼)軟膏劑，委托西安交通大學(xué)藥學(xué)院進(jìn)行了藥效學(xué)試驗(yàn)，各種試驗(yàn)情況如下試驗(yàn)藥物本發(fā)明藥物軟膏劑，每貼重2g，每貼含生藥4.44g，試驗(yàn)用浸膏每克含生藥2.22g，由西安集賢藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)20030601。 對(duì)照藥和主要試劑以及細(xì)菌結(jié)腸炎丸，陜西中醫(yī)學(xué)院制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)011105；丁桂兒臍貼(寶寶一貼靈)，山西亞寶藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)030415；甲硫酸新斯的明注射液，上海信誼藥廠生產(chǎn)，批號(hào)990501。標(biāo)準(zhǔn)菌株購自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京藥品生物制品鑒定所中國醫(yī)學(xué)細(xì)菌保藏中心，臨床分離菌株由西安交通大學(xué)第一醫(yī)院檢驗(yàn)科、西安交通大學(xué)第二醫(yī)院檢驗(yàn)科、陜西省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科提供，均經(jīng)TAXK-II全自動(dòng)數(shù)字細(xì)菌鑒定儀鑒定。 試驗(yàn)儀器JA1003電子天平，由上海精密科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)；DCCO-20普通培養(yǎng)儀，由日本DICCO株式會(huì)社生產(chǎn)；752C型紫外可見分光光度計(jì)，由上海第三分析儀器廠生產(chǎn)；游標(biāo)卡尺，精度0.02mm，由上海精美量具廠生產(chǎn)。 試驗(yàn)動(dòng)物ICR品系小白鼠，雌雄各半，體重18～22g，質(zhì)量合格證“陜醫(yī)動(dòng)證字第08-004號(hào)”；SD品系大白鼠，雌雄各半，體重200～250gkg，質(zhì)量合格證“陜醫(yī)動(dòng)證字第08-005號(hào)”，均由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。 動(dòng)物分籠飼養(yǎng)，食固體飼料，食水自由，飼料由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心負(fù)責(zé)。室溫18～20℃，相對(duì)濕度60％～70％。 統(tǒng)計(jì)處理進(jìn)行組間比較或自身比較的t檢驗(yàn)。 一、體外抗菌試驗(yàn)參照衛(wèi)生部藥政局《新藥臨床前研究指導(dǎo)原則》中“抗菌藥體外抗菌試驗(yàn)原則”、《微生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)》和《現(xiàn)代藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)研究技術(shù)》中“抗菌、抗病毒藥物的實(shí)驗(yàn)方法與技術(shù)”，采用微量連續(xù)二倍稀釋法測定本發(fā)明藥物對(duì)大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌、綠膿假單胞菌、腸產(chǎn)毒型大腸埃希氏菌、傷寒沙門氏菌、腸炎沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、痢疾志賀氏菌、變形桿菌、糞鏈球菌、白色假絲酵母菌的標(biāo)準(zhǔn)株，以及大腸埃希氏菌、傷寒沙門氏菌、腸炎沙門氏菌、痢疾志賀氏菌、變形桿菌、白色假絲酵母菌臨床分離株的最小抑菌濃度(MIC)，采用平板轉(zhuǎn)染法測定本發(fā)明藥物對(duì)上述細(xì)菌的最小殺菌濃度(MBC)。將大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌、綠膿假單胞菌、沙門氏菌、痢疾志賀氏菌、變形桿菌接種于肉湯，置普通培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)24小時(shí)；白色假絲酵母菌接種于沙保弱氏肉湯，置普通培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)48小時(shí)；糞鏈球菌接種于TPY肉湯(厭氧菌營養(yǎng)肉湯)，置厭氧培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)48小時(shí)。用比濁法計(jì)數(shù)細(xì)菌，轉(zhuǎn)種于平板測定菌液中活菌數(shù)即菌落形成單位(CFU/mL)，用林格氏液調(diào)配成106CFU/mL的菌液備用。 1、本發(fā)明藥物的最小抑菌濃度和最小殺菌濃度測定(1)本發(fā)明藥物對(duì)大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌、綠膿假單胞菌、沙門氏菌、痢疾志賀氏菌、變形桿菌標(biāo)準(zhǔn)株和臨床分離株MIC和MBC的測定將本發(fā)明藥物用含0.05％酚紅的葡萄糖MH肉湯由10％(含生藥量222mg/ml)進(jìn)行連續(xù)二倍梯度稀釋，各濃度藥液分別加到96孔培養(yǎng)板，每孔0.2mL。再依次加入濃度為106CFU/ml的試驗(yàn)菌液，每孔10μL，同時(shí)設(shè)立細(xì)菌對(duì)照以及培養(yǎng)基對(duì)照。置室溫作用12小時(shí)，于普通培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)18小時(shí)觀察結(jié)果。培養(yǎng)孔內(nèi)培養(yǎng)基由紅色變?yōu)辄S色判為有細(xì)菌生長繁殖，培養(yǎng)液保持紅色不變判為無細(xì)菌生長。無細(xì)菌生長孔中所含最小藥物濃度為MIC。再依次將未見細(xì)菌生長孔的培養(yǎng)物分別吸取0.1mL點(diǎn)種于MH平板，置普通培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)24小時(shí)，無細(xì)菌生長接種區(qū)域?qū)?yīng)的最小藥物濃度為MBC。試驗(yàn)結(jié)果見表1～2。 (2)本發(fā)明藥物對(duì)糞鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)株MIC和MBC的測定將本發(fā)明藥物用含0.05％酚紅的葡萄糖TPY肉湯由10％(含生藥量222mg/mL)進(jìn)行連續(xù)二倍梯度稀釋，將各濃度藥液分別加到96孔培養(yǎng)板，每孔0.2mL。再依次加入濃度為106CFU/mL的試驗(yàn)菌液，每孔10μL，同時(shí)設(shè)立細(xì)菌對(duì)照以及培養(yǎng)基對(duì)照。嚴(yán)密封板，置厭氧罐中室溫作用12小時(shí)，于37℃厭氧培養(yǎng)48小時(shí)觀察結(jié)果。培養(yǎng)孔內(nèi)培養(yǎng)基由紅色變?yōu)辄S色判為有細(xì)菌生長繁殖，培養(yǎng)液保持紅色不變判為無細(xì)菌生長。無細(xì)菌生長孔中所含最小藥物濃度為MIC。再依次將未見細(xì)菌生長各孔的培養(yǎng)物分別吸取0.1mL轉(zhuǎn)染到TPY平板，置37℃厭氧培養(yǎng)48小時(shí)，無細(xì)菌生長接種區(qū)域?qū)?yīng)的最小藥物濃度為MBC。試驗(yàn)結(jié)果見表1～2。 (3)本發(fā)明藥物對(duì)白色念珠菌標(biāo)準(zhǔn)株和臨床分離MIC和MBC的測定將本發(fā)明藥物用沙保弱氏(SB)肉湯由10％(含生藥量222mg/mL)進(jìn)行連續(xù)二倍梯度稀釋，將各濃度藥液分別加到96孔培養(yǎng)板，每孔0.2mL。再依次加入濃度為106CFU/mL的試驗(yàn)菌液，每孔10μL，同時(shí)設(shè)立細(xì)菌對(duì)照以及培養(yǎng)基對(duì)照。置室溫作用12小時(shí)，于普通培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)48小時(shí)觀察結(jié)果。培養(yǎng)孔內(nèi)培養(yǎng)基由紅色變?yōu)辄S色判為有細(xì)菌生長繁殖，培養(yǎng)液保持紅色不變判為無細(xì)菌生長。無細(xì)菌生長孔中所含最小藥物濃度為MIC。再依次將未見細(xì)菌生長各孔的培養(yǎng)物分別吸取0.1mL點(diǎn)種于SB平板，置普通培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)48小時(shí)，無細(xì)菌生長接種區(qū)域所對(duì)應(yīng)的最小藥物濃度為MBC。試驗(yàn)結(jié)果見表1～2。 表1本發(fā)明藥物對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株的MIC和MBC表 表2本發(fā)明藥物對(duì)440株臨床分離菌株的MIC、MIC50、MIC90和MBC(mg生藥/mL)表 數(shù)據(jù)處理依照公式MIC50＝lg-1(∑lgx/n)MIC90＝MIC50+t0.01，n-1(s/n-2)計(jì)算對(duì)實(shí)驗(yàn)菌株的MIC50和MIC90。 由表1可見，本發(fā)明藥物對(duì)試驗(yàn)所選用的大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌、綠膿假單胞菌、腸產(chǎn)毒型大腸埃希氏菌、傷寒沙門氏菌、腸炎沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、痢疾志賀氏菌、變形桿菌、糞鏈球菌、白色假絲酵母菌的標(biāo)準(zhǔn)株均有較明顯的抑制和滅活作用，其MBC為MIC的2～4倍。由表2可見，本發(fā)明藥物對(duì)試驗(yàn)所選用的440株臨床分離菌株均有一定的抑制和滅活作用，其MBC為MIC的2～4倍。 2、培養(yǎng)條件對(duì)本發(fā)明藥物MIC的影響選取大腸埃希氏菌ATCC25922株和痢疾志賀氏菌51169株，改變培養(yǎng)條件，分別測定本發(fā)明藥物對(duì)受試細(xì)菌的MIC。 (1)pH的影響參照試驗(yàn)1 MIC測定方法，將培養(yǎng)液的pH分別調(diào)到5.7、7.2、8.5，分別測定各自的MIC，測試結(jié)果見表3。 表3 pH對(duì)本發(fā)明藥物MIC的影響表 由表3可見，改變培養(yǎng)液的pH，不影響本發(fā)明藥物對(duì)大腸埃希氏菌ATCC25922株和痢疾志賀氏菌51169株的MIC。 (2)細(xì)菌接種量對(duì)本發(fā)明藥物MIC的影響參照試驗(yàn)1 MIC測定方法，將試驗(yàn)菌液濃度依次改變?yōu)?06、108、1010CFU/ml，每孔接種10μL，進(jìn)行MIC測定，結(jié)果見表4。 表4細(xì)菌接種量對(duì)本發(fā)明藥物MIC的影響表 由表4可見，改變細(xì)菌接種量，不影響本發(fā)明藥物對(duì)大腸埃希氏菌ATCC25922株和痢疾志賀氏菌51169株的MIC。 二、體內(nèi)抗菌試驗(yàn)參照《衛(wèi)生部藥政局新藥臨床前研究指導(dǎo)》中“體內(nèi)抗菌試驗(yàn)原則”和《中藥藥理研究方法學(xué)》，采用孫氏綜合法測定本發(fā)明藥物對(duì)鼠傷寒沙門氏菌50220株感染小鼠的半數(shù)保護(hù)量，計(jì)算其95％可信限。 1、試驗(yàn)菌最小致死量的測定將ICR小鼠隨機(jī)分組，每組10只，雌雄各半。所有小鼠用濃度為0.01mmol/L、pH為8.5的緩沖液灌胃中和胃酸，0.2mL/10g。15分鐘后，將試驗(yàn)菌液用含5％胃膜素的生理鹽水10倍連續(xù)梯度稀釋，用每一稀釋菌液灌胃感染一組小鼠，感染量0.2mL/10g，以胃膜素及生理鹽水為對(duì)照，觀察7天，記錄各組小鼠死亡情況，以致小鼠全部死亡的最小濃度細(xì)菌量作為最小致死量(MLD)。結(jié)果表明，鼠傷寒沙門氏菌50220株的最小致死量2×108CFU/kg。 2、本發(fā)明藥物對(duì)感染小鼠0％(ED0)和100％(ED100)保護(hù)量的測定ICR小鼠隨機(jī)分組，每組10只，雌雄各半。所有小鼠用濃度為0.01mmol/L、pH為8.5的緩沖液灌胃中和胃酸，0.2mL/10g。15分鐘后，用試驗(yàn)菌100％MLD灌胃感染小鼠。感染6小時(shí)后，將本發(fā)明藥物由20％(0.444g生藥/mL)開始用含5％胃膜素的生理鹽水做4倍連續(xù)梯度稀釋，每一稀釋度藥液灌胃給藥一組小鼠，0.2mL/10g，每日1次，連續(xù)7天，同時(shí)設(shè)立感染對(duì)照和正常對(duì)照組，觀察7天內(nèi)小鼠死亡情況。小鼠全部死亡的最大給藥量為0％保護(hù)量，小鼠全部存活的最小給藥量為100％保護(hù)量。結(jié)果表明，本發(fā)明藥物對(duì)鼠傷寒沙門氏菌50220株感染小鼠的ED100為2.222g生藥/kg，ED0為0.1388g生藥/kg。 3、本發(fā)明藥物對(duì)鼠傷寒沙門氏菌50220株感染小鼠50％(ED50)保護(hù)量的測定ICR小鼠隨機(jī)分組，每組10只，雌雄各半。所有小鼠用濃度為0.01mmol/L、pH為8.5的緩沖液灌胃中和胃酸，0.2mL/10g。15分鐘后，用鼠傷寒沙門氏菌50220株100％MLD菌液灌胃感染小鼠。感染6小時(shí)后，將本發(fā)明藥物用生理鹽水由5％開始做1∶2連續(xù)5個(gè)梯度稀釋，每一梯度藥液灌胃給藥一組小鼠。給藥量0.2mL/10g，每日1次，連續(xù)7天。感染對(duì)照組和正常對(duì)照組同法給等容積生理鹽水，陽性對(duì)照組給結(jié)腸炎丸。觀察7天內(nèi)小鼠死亡情況，計(jì)算本發(fā)明藥物對(duì)鼠傷寒沙門氏菌50220株感染小鼠的ED50及95％可信限。 試驗(yàn)結(jié)果見表5。 表5本發(fā)明藥物對(duì)鼠傷寒沙門氏菌50220株感染小鼠的保護(hù)作用 結(jié)果表明，本發(fā)明藥物對(duì)鼠傷寒沙門氏菌50220株感染小鼠的ED50為0.9024g生藥/kg，95％可信限為0.6470～1.2586g生藥/kg。 三、本發(fā)明藥物的抗炎試驗(yàn)小鼠50只，雌性，隨機(jī)分為5組，每組10只。第一組為陰性對(duì)照組，給等容積蒸餾水；第二組為陽性對(duì)照組，給丁桂兒臍貼4.48g成藥/kg；第三、四、五組為本發(fā)明藥物組，分別給本發(fā)明藥物3.1g生藥/kg、6.2g生藥/kg、12.4g生藥/kg。小鼠腹部正中涂抹給藥，每天1次，0.1mL/10g，連續(xù)3天。末次給藥60分鐘后，每鼠靜脈注射0.5％伊文思藍(lán)0.2mL，然后腹腔注射0.6％醋酸0.4mL/只，20分鐘后頸椎脫臼處死，剪開腹腔，用6mL生理鹽水分次沖洗腹腔，收集洗滌液并加生理鹽水至10mL，3000轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘。取上清夜于590nm比色，由標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算伊文思藍(lán)含量。 結(jié)果見表6。 表6本發(fā)明藥物對(duì)小鼠急性腹腔滲出性炎癥的影響(x±s) 與陰性對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。 由表6可見，本發(fā)明藥物可使小鼠腹腔伊文思藍(lán)滲出量減少，與陰性對(duì)照組比較，大劑量組有顯著性差異(P＜0.01)，提示本發(fā)明藥物可抑制醋酸刺激的小鼠急性滲出性炎癥反應(yīng)。陽性對(duì)照藥丁桂兒臍貼也能抑制醋酸刺激的小鼠急性滲出性炎癥反應(yīng)。 四、本發(fā)明藥物的止瀉試驗(yàn)小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只。第一組為陰性對(duì)照組，給等容積生理鹽水；第二組為陽性對(duì)照組，給丁桂兒臍貼4.48g成藥/kg；第三、四、五組為本發(fā)明藥物組，分別給本發(fā)明藥物3.1g生藥/kg、6.2g生藥/kg、12.4g生藥/kg。小鼠腹部正中涂抹給藥，每天1次，0.1mL/10g，連續(xù)3天。末次給藥60分鐘后，各組小鼠灌胃給8％番瀉葉粉混懸液0.4mL/10g致瀉，計(jì)數(shù)6小時(shí)內(nèi)小鼠排便次數(shù)，結(jié)果見表7。 表7本發(fā)明藥物對(duì)小鼠腹瀉的影響(x±s)表 與陰性對(duì)照組比較，*P＜0.05。 由表7可見，本發(fā)明藥物減少番瀉葉刺激的小鼠腹瀉次數(shù)，與陰性對(duì)照組比較，大劑量組有顯著性差異(P＜0.05)，提示本發(fā)明藥物對(duì)小鼠有止瀉作用。陽性對(duì)照藥丁桂兒臍貼也能減少小鼠腹瀉次數(shù)。 五、本發(fā)明藥物對(duì)小腸推進(jìn)的影響1、本發(fā)明藥物對(duì)正常動(dòng)物小腸推進(jìn)的影響小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只。第一組為陰性對(duì)照組，給等容積生理鹽水；第二組為陽性對(duì)照組，給丁桂兒臍貼4.48g成藥/kg；第三、四、五組為本發(fā)明藥物組，分別給本發(fā)明藥物3.1g生藥/kg、6.2g生藥/kg、12.4g生藥/kg。小鼠腹部正中涂抹給藥，0.1mL/10g，每天1次，連續(xù)2天。第二次給藥后禁食不禁水24小時(shí)，然后第三次給藥，給藥60分鐘后，灌胃給50％碳素墨水，30分鐘后頸椎脫臼處死小鼠，打開腹腔，剪取幽門至回盲部消化管，輕輕將小腸拉成直線，測量小腸長度和墨汁前沿至幽門的距離，按下式計(jì)算墨汁推進(jìn)率。 試驗(yàn)結(jié)果見表8。 表8本發(fā)明藥物對(duì)正常小鼠小腸推進(jìn)的影響(x±s)表 與陰性對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。 由表8可見，本發(fā)明藥物加快正常小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)，與陰性對(duì)照組比較，中、大劑量組有顯著性差異(p＜0.05)，提示本發(fā)明藥物促進(jìn)正常小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)。陽性對(duì)照藥丁桂兒臍貼也加快正常小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)。 2、對(duì)腸功能亢進(jìn)動(dòng)物小腸推進(jìn)的影響小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分為6組，每組10只。第一組為正常對(duì)照組，給等容積生理鹽水；第二組為模型對(duì)照組，給等容積生理鹽水；第三組為陽性對(duì)照組，給丁桂兒臍貼4.48g成藥/kg；第四、五、六組為本發(fā)明藥物組，分別給本發(fā)明藥物3.1g生藥/kg、6.2g生藥/kg、12.4g生藥/kg。小鼠腹部正中涂抹給藥，0.1mL/10g，每天1次，連續(xù)2天。第二次給藥后禁食不禁水24小時(shí)，然后第三次給藥。給藥60分鐘后，除正常對(duì)照組外其余各組用新斯的明制造小腸推進(jìn)功能亢進(jìn)模型，肌肉注射新斯的明0.5mg/kg。15分鐘后灌胃給50％碳素墨水，再過15分鐘后頸椎脫臼處死小鼠，打開腹腔，剪取幽門至回盲部消化管，輕輕將小腸拉成直線，測量小腸長度和墨汁前沿至幽門的距離，按下式計(jì)算墨汁推進(jìn)率。 試驗(yàn)結(jié)果見表9。 表9本發(fā)明藥物對(duì)腸功能亢進(jìn)小鼠小腸推進(jìn)的影響(x±s)表 與模型對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。 由表9可見，肌肉注射新斯的明后，小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)加快，與正常對(duì)照組比較有顯著性差異(p＜0.01)。本發(fā)明藥物明顯減慢腸功能亢進(jìn)小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)，與模型對(duì)照組比較，各劑量組均有顯著性差異(p＜0.01)，提示本發(fā)明藥物抑制腸功能亢進(jìn)小鼠的小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)。陽性對(duì)照藥丁桂兒臍貼也明顯抑制腸功能亢進(jìn)小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)。 六、對(duì)大鼠胃酸分泌的影響大鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組8只。第一組為陰性對(duì)照組，給等容積生理鹽水；第二組為陽性對(duì)照組，給丁桂兒臍貼3.14g成藥/kg；第三、四、五組為本發(fā)明藥物組，分別給本發(fā)明藥物2.18g生藥/kg、4.36g生藥/kg、8.72g生藥/kg。大鼠腹部正中涂抹給藥，0.1mL/10g，每天1次，連續(xù)5天。末次給藥后禁食不禁水24小時(shí)，然后在乙醚麻醉下手術(shù)，結(jié)扎幽門，十二指腸再給藥一次，然后縫合腹壁，2小時(shí)后打開腹腔，結(jié)扎賁門，取出全胃，沿胃大彎剪開胃，收集胃內(nèi)容物，記錄胃液分泌量，2000轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘，按文獻(xiàn)方法測定總酸度、總酸排出量，結(jié)果見表10。 表10本發(fā)明藥物對(duì)大鼠胃酸分泌的影響(x±s)表 與陰性對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。 由表10可見，本發(fā)明藥物增加大鼠胃總酸度和總酸排出量，與陰性對(duì)照組比較，各劑量組均有顯著性差異(p＜0.05或p＜0.01)；增加大鼠胃液分泌量，但與陰性對(duì)照組比較統(tǒng)計(jì)學(xué)無顯著性意義(p＞0.05)。提示本發(fā)明藥物能促進(jìn)大鼠胃酸分泌。陽性對(duì)照藥丁桂兒臍貼也能促進(jìn)大鼠胃酸分泌。 七、鎮(zhèn)痛試驗(yàn)小鼠50只，雌性，隨機(jī)分為5組，每組10只。第一組為陰性對(duì)照組，給等容積蒸餾水；第二組為陽性對(duì)照組，給丁桂兒臍貼4.48g成藥/kg；第三、四、五組為本發(fā)明藥物組，分別給本發(fā)明藥物3.1g生藥/kg、6.2g生藥/kg、12.4g生藥/kg。小鼠腹部正中涂抹給藥，每天1次，0.1mL/10g，連續(xù)3天。末次給藥60分鐘后，腹腔注射0.6％醋酸0.1mL/10g，觀察記錄15分鐘內(nèi)小鼠扭體反應(yīng)(小鼠腹部貼地、內(nèi)凹、伸展后肢、扭曲)次數(shù)，結(jié)果見表11。 表11 本發(fā)明藥物對(duì)對(duì)小鼠扭體反應(yīng)的影響(x±s) 與陰性對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。 由表11可見，本發(fā)明藥物抑制醋酸刺激的小鼠扭體反應(yīng)，與陰性對(duì)照組比較，中、大劑量組有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)，提示本發(fā)明藥物對(duì)醋酸刺激的疼痛有鎮(zhèn)痛作用。陽性對(duì)照藥丁桂兒臍貼也能抑制醋酸刺激的小鼠扭體反應(yīng)。 試驗(yàn)結(jié)論本發(fā)明藥物體外對(duì)腸道感染常見細(xì)菌大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌、綠膿假單胞菌、腸產(chǎn)毒型大腸埃希氏菌、傷寒沙門氏菌、腸炎沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、痢疾志賀氏菌、變形桿菌、糞鏈球菌、白色假絲酵母菌有較明顯的抑制和滅活作用，改變pH和細(xì)菌接種量不影響本發(fā)明藥物對(duì)大腸埃希氏菌和痢疾志賀氏菌的抗菌作用；灌胃給藥，體內(nèi)對(duì)鼠傷寒沙門氏菌感染小鼠有保護(hù)作用。本發(fā)明藥物腹部涂抹給藥，抑制醋酸刺激的小鼠急性滲出性炎癥反應(yīng)和扭體反應(yīng)，減少番瀉葉刺激的小鼠腹瀉次數(shù)，促進(jìn)正常小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)，減慢腸功能亢進(jìn)小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)。本發(fā)明藥物腹部涂抹給藥，增加大鼠胃液分泌量、胃總酸度和總酸排出量。結(jié)果說明，本發(fā)明藥物具有抗菌、抗炎、止瀉、鎮(zhèn)痛作用，促進(jìn)腸功能正常小鼠的小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)，減慢腸功能亢進(jìn)小鼠的小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)，還可促進(jìn)胃液和胃酸分泌。 本發(fā)明藥物的功能清熱燥濕，行氣止痛，和中止瀉。 本發(fā)明藥物主治主治小兒腹瀉。 本發(fā)明藥物的規(guī)格每貼重2g，每克含生藥2.22g。 本發(fā)明藥物的用法用量每次貼1貼，貼于神闕穴位，每日貼1次，2個(gè)月至1周歲的嬰幼兒每天貼3～6小時(shí)。 注意事項(xiàng)皮膚破損者禁止使用。 本發(fā)明的有效期兩年。 權(quán)利要求 1.一種治療小兒腹瀉的外用軟膏劑，其特征在于它是以下述重量份配比的中藥原料按常規(guī)制劑方法制成的外用軟膏劑苦參 20～60份木香 2～10份冰片 0.1～1份 2.按照權(quán)利要求1所述的一種治療小兒腹瀉的外用軟膏劑，其特征在于其中各中藥原料的重量份配比是苦參 30～50份木香 3～8份冰片 0.1～0.6份 3.按照權(quán)利要求1所述的一種治療小兒腹瀉的外用軟膏劑，其特征在于其中各中藥原料的重量份配比是苦參 40份木香 6份冰片 0.4份 全文摘要 一種治療小兒腹瀉的外用軟膏劑，包括(用量為重量份)苦參30～50份、木香3～8份、冰片0.1～0.6份。本發(fā)明藥物經(jīng)藥效試驗(yàn)證明，本發(fā)明藥物具有抗菌、抗炎、止瀉、鎮(zhèn)痛作用，促進(jìn)腸功能正常小鼠的小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)，減慢腸功能亢進(jìn)小鼠的小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)，還可促進(jìn)胃液和胃酸分泌。 文檔編號(hào)A61K9/06GK1628813SQ200410073030 公開日2005年6月22日 申請(qǐng)日期2004年8月27日 優(yōu)先權(quán)日2004年8月27日 發(fā)明者郭衛(wèi)庫 申請(qǐng)人:郭衛(wèi)庫 |
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