采血指征：對(duì)入院的危重患者未進(jìn)行系統(tǒng)性抗生素治療前，應(yīng)及時(shí)進(jìn)行血液
 
     1．發(fā)熱（≥38℃）或低溫（≤36℃）。
     2．寒戰(zhàn)。
     3．白細(xì)胞增多（>10×10 9/L，特別有“核左移”未成熟的或帶狀的白細(xì)胞
 
     4．粒細(xì)胞減少（成熟的多核白細(xì)胞<1×10 9/L）。
     5．血小板減少。
     6．皮膚粘膜出血。
     7．昏迷。
     8．多器官衰竭。
  或同時(shí)具備上述幾種體征時(shí)應(yīng)采血培養(yǎng)。
  在評(píng)估可疑新生兒敗血癥時(shí)，除發(fā)熱或低燒外，很少培養(yǎng)出細(xì)菌，應(yīng)該補(bǔ)充
2歲以下
一般多見于門診，常伴有明顯發(fā)熱（≥38.5℃）和白細(xì)胞增多（≥20×109/L）。
可能不發(fā)熱或不低熱，如伴有身體不適，肌痛或中風(fēng)可能是感
 

 
  血培養(yǎng)為防止皮膚寄生菌污染，可使用消毒劑（碘酊或碘伏）對(duì)皮膚進(jìn)行嚴(yán)
最大限度地減低皮膚污染。感染性心內(nèi)膜炎，特別是心臟瓣
可能由皮膚寄生的微生物引起（例如：表皮葡萄球菌或棒桿菌

除非靜脈穿刺無(wú)法得到血液或用來(lái)評(píng)價(jià)
如果抽取了導(dǎo)管血，也應(yīng)同時(shí)在其他部位穿刺獲取非導(dǎo)
 
  皮膚消毒嚴(yán)格按以下步驟進(jìn)行：
     1．首先用70%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30秒鐘以上。
     2．然后用一根碘酊或碘伏棉簽消毒皮膚（1%-2%碘酊30秒或10%碘伏消
60秒），從穿刺點(diǎn)向外以1.5cm~2cm直徑畫圈進(jìn)行消毒。
     3．最后用70%酒精脫碘。
  嚴(yán)格執(zhí)行三步消毒后，可行靜脈穿刺采血。注意對(duì)碘過(guò)敏的患者，只能用70%
60秒鐘，待穿刺部位酒精揮發(fā)干燥后穿刺采血。

  培養(yǎng)瓶消毒程序：
     1．用70%酒精或碘溶液（不要使用碘）消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞子。
     2．酒精作用待60秒。
     3．在血液注入血培養(yǎng)瓶之前，用無(wú)菌紗布清除橡皮塞子表面剩余的酒精，
 
  要點(diǎn)：血培養(yǎng)的關(guān)鍵是防止皮膚寄生菌或環(huán)境引起的污染，由污染菌引起的
延長(zhǎng)了住院日，延誤病情診斷并增加了經(jīng)濟(jì)
3%~5%血培養(yǎng)中混有污染菌，它們


不同類無(wú)菌部位標(biāo)本培養(yǎng)中生長(zhǎng)同一種微生
48h內(nèi)）。上述情況下，應(yīng)考慮是真正的感染。臨床實(shí)驗(yàn)
建立良好的交流關(guān)系對(duì)各方面都
1995~1999年血中分離的70例凝固酶陰
入院48h內(nèi)檢出者，39.3%（24例）為污染菌，48h后檢出者（9例）
為污染菌，污染菌檢出時(shí)間顯著長(zhǎng)于病原菌。提示血培養(yǎng)中凝固酶陰性葡
 

   采血量：
   對(duì)從菌血癥或真菌菌血癥患者血培養(yǎng)中獲得微生物，每個(gè)培養(yǎng)瓶抽取的血量
2ml增加到20ml時(shí)，血培養(yǎng)的陽(yáng)性率增加
，因?yàn)榕囵B(yǎng)的血液量增加1ml，陽(yáng)性率增加3%~5%。
   用靜脈穿刺獲得的血量，成人和兒童不同。兒童，特別是新生兒很難獲得大
1ml~5ml用于血培養(yǎng)，當(dāng)細(xì)菌濃度足
1ml也足以檢測(cè)菌血癥。標(biāo)本量大于1ml，細(xì)菌量也增加，對(duì)
對(duì)于成人血培養(yǎng)的標(biāo)本量少于
不易培養(yǎng)出細(xì)菌，每瓶最低限量應(yīng)是10ml血液，20ml~30ml最合適，血液
1:5至1:10。幾乎所有現(xiàn)代的血培養(yǎng)系統(tǒng)假如血液量均在
以上。雖然靜脈采血30ml可增加細(xì)菌量，但這不太切合實(shí)際，這很容易造
 

   血培養(yǎng)的數(shù)量和采血時(shí)間：
   血培養(yǎng)的數(shù)量和采血時(shí)間關(guān)系到菌血癥的病理生理學(xué)，一次靜脈采血注入到
研究已經(jīng)證實(shí)，采集適量的血液注入2~3瓶血
對(duì)間歇性菌血癥，用于培養(yǎng)的血
因?yàn)榧?xì)菌流入血液與寒戰(zhàn)發(fā)作通常間
1h，在發(fā)燒時(shí)血液可能沒(méi)有細(xì)菌，實(shí)際上，血培養(yǎng)通常是在寒戰(zhàn)或發(fā)燒后進(jìn)

我們一般不推薦在任意時(shí)間抽取靜脈血進(jìn)行培養(yǎng)，研究資料
24h內(nèi)同一時(shí)
無(wú)論何時(shí)，采集血培養(yǎng)應(yīng)該在使
推薦同時(shí)采集2~3瓶，每瓶20ml~30ml血樣進(jìn)行培養(yǎng)來(lái)做最
這也更切合實(shí)際。先前的抗生素治療可能導(dǎo)致血培養(yǎng)結(jié)果陰性，微生
 
  有研究證實(shí)，對(duì)鏈球菌心內(nèi)膜炎患者，在做血培養(yǎng)的前兩周內(nèi)患者接受了抗
97%下降到91%。由于有很好的血培養(yǎng)技術(shù)，對(duì)
95%以上。
  
  對(duì)特殊的全身性和局部感染患者采集血培養(yǎng)的建議：
    1．懷疑急性原發(fā)性菌血癥、真菌菌血癥、腦膜炎、骨髓炎、關(guān)節(jié)炎或肺炎
2或3份血培養(yǎng)瓶，快速進(jìn)行血培養(yǎng)。
    2.  不明病源的發(fā)熱，如隱性膿腫，傷寒熱和波浪熱：發(fā)熱開始采集2或3份
24h至36h后，估計(jì)溫度升高之前（通常在下午）立即采集2份以上血培
 
    3．懷疑菌血癥或真菌菌血癥，血培養(yǎng)結(jié)果持續(xù)陰性，應(yīng)改變學(xué)培養(yǎng)方法，
 
    4．感染性心內(nèi)膜炎，對(duì)急性心內(nèi)膜炎患者1h（2h內(nèi)）采集3份血培養(yǎng)，如
24h后陰性，再采集3份血培養(yǎng)瓶。入院前兩周內(nèi)接受抗生素治療的
2份。
  要點(diǎn)：大部分臨床醫(yī)生對(duì)成年患者采集血量不足，采集血培養(yǎng)份數(shù)不夠，采
24h內(nèi)采集一瓶血培養(yǎng)，降低了血培養(yǎng)
 

  運(yùn)輸標(biāo)準(zhǔn)：
  采血后血培養(yǎng)瓶或采集管應(yīng)立即送到臨床微生物實(shí)驗(yàn)室。血培養(yǎng)瓶和采集管
不要冷藏，如果血培養(yǎng)瓶在送往實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)或
35℃~37℃孵箱中。但含血
若有細(xì)菌生長(zhǎng)會(huì)釋放出一些氣體，采集管有破裂或
 
   采用自動(dòng)化連續(xù)檢測(cè)血培養(yǎng)系統(tǒng)，有一點(diǎn)很讓人憂慮，那就是標(biāo)本運(yùn)送有時(shí)
這樣會(huì)導(dǎo)致微生物檢測(cè)延遲（盡管微生物生長(zhǎng)不受影響）目前很少有人

 

  接收標(biāo)準(zhǔn)：
  實(shí)驗(yàn)室收到血培養(yǎng)后，應(yīng)按以下步驟操作：
    1．檢查培養(yǎng)瓶確保它們被安全地放置。
    2．用肉眼觀查微生物生長(zhǎng)的情況，注意血液層上面是否有絮狀沉淀、均勻

 
    3．檢查瓶子上的標(biāo)簽，確認(rèn)資料是否齊全，與申請(qǐng)單上的患者資料是否一
 
    4．保證獲得適量的血液。
    5．檢查血液是否超過(guò)要求的基線。
    6．放置在孵箱中或上機(jī)進(jìn)行檢測(cè)。
  由于菌血癥和真菌菌血癥的檢測(cè)對(duì)臨床感染性基本的診斷十分重要，實(shí)驗(yàn)室
對(duì)兒童和成人，不管抽血量多少，均應(yīng)該進(jìn)行培養(yǎng)
 

  不規(guī)范處理方法：
  送到實(shí)驗(yàn)室的血標(biāo)本應(yīng)認(rèn)真處理，減少標(biāo)本錯(cuò)誤和標(biāo)本污染。標(biāo)本處理不當(dāng)
醫(yī)院及實(shí)驗(yàn)室工作人員本身攜帶的病菌均可能造成標(biāo)本污染。因
 

   1. 血培養(yǎng)或培養(yǎng)管無(wú)標(biāo)簽或貼錯(cuò)標(biāo)簽、培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)管有滲漏、破裂或明
12h以上、用不適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)瓶或培養(yǎng)管收集標(biāo)本。
   處理方法：立即與臨床醫(yī)師聯(lián)系，報(bào)告：“標(biāo)本不規(guī)范的具體理由”。
   2. 用失效的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)管收集標(biāo)本。
   處理方法：與醫(yī)生聯(lián)系，報(bào)告：“用過(guò)期培養(yǎng)瓶收集血標(biāo)本，請(qǐng)用效期內(nèi)的培
 
   3. 送交血標(biāo)本的量不足或只送一瓶血培養(yǎng)。
   處理方法：與醫(yī)生聯(lián)系，報(bào)告：“送交的血培養(yǎng)標(biāo)本量不足，請(qǐng)補(bǔ)送足量血液
”。
   4. 未送推薦的培養(yǎng)瓶數(shù)或類型
   處理方法：與醫(yī)生聯(lián)系，報(bào)告：如“只送需氧瓶不符合規(guī)程，血培養(yǎng)的基本規(guī)
”。
   要點(diǎn)：每位臨床醫(yī)師都應(yīng)該對(duì)患者負(fù)責(zé)任，實(shí)驗(yàn)室工作人員發(fā)現(xiàn)不規(guī)范的血
 

   微生物室處理血培養(yǎng)預(yù)防感染的安全程序：
      1．細(xì)菌室工作人員，在所有的血培養(yǎng)處理過(guò)程中都應(yīng)戴乳膠手套。
      2．拒收不符合安全標(biāo)準(zhǔn)的血培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)管。
      3．在生物安全柜內(nèi)打開或穿刺培養(yǎng)瓶或加一個(gè)膠膜防護(hù)裝置（如：把培
 
      4．在生物安全柜內(nèi)操作肉眼觀察有微生物生長(zhǎng)跡象的培養(yǎng)瓶。
      5．操作產(chǎn)生的氣溶膠，可能含有高濃度的致病菌或真菌，利用實(shí)驗(yàn)室的
 
      6．用于培養(yǎng)基的塞子和膠帶可能含有高濃度的致病菌，應(yīng)防止接觸。
      7．正確處理與血培養(yǎng)有關(guān)的污染物。
      8．立即報(bào)告血培養(yǎng)結(jié)果及抗生素敏感試驗(yàn)結(jié)果。

   血培養(yǎng)檢測(cè)——陽(yáng)性結(jié)果的處理：
   傳統(tǒng)手工法血培養(yǎng)應(yīng)該每天至少檢查一次，對(duì)48h~72h未生長(zhǎng)的培養(yǎng)瓶至少
對(duì)培養(yǎng)瓶進(jìn)行肉眼檢查，注意下列幾點(diǎn)提示有微生物
 
      1．血與肉湯混合物出現(xiàn)渾濁。
      2．在血液層上有絮狀沉淀，某些鏈球菌在沉積的紅細(xì)胞表面上，會(huì)有小
“棉球樣”生長(zhǎng)。
      3．肉湯內(nèi)出現(xiàn)渾濁生長(zhǎng)。
      4．肉湯表面有薄膜生長(zhǎng)。
      5．出現(xiàn)溶血。
       6．產(chǎn)生氣體，許多發(fā)酵菌可產(chǎn)氣，梭菌屬會(huì)產(chǎn)生大量的氣體，出現(xiàn)明顯
 
       7．血液層表面或深層有白色顆粒。
        8．液體培養(yǎng)基凝固。
   如果懷疑血培養(yǎng)陽(yáng)性，應(yīng)立即進(jìn)行革蘭染色，以無(wú)菌操作從培養(yǎng)瓶中取肉湯
滴涂片，自然干燥，加熱固定并染色。染色結(jié)果應(yīng)盡快報(bào)告，如革蘭陽(yáng)性球
革蘭陰性桿菌為小桿菌或球桿菌等。革蘭染色結(jié)果可指
并作為實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行細(xì)菌鑒定補(bǔ)充試驗(yàn)的參考
它對(duì)于鑒別葡萄球菌和鏈球菌非常有用。如果血培養(yǎng)陽(yáng)性革蘭染色未發(fā)現(xiàn)
應(yīng)做吖啶橙染色進(jìn)行二次鏡檢，這對(duì)檢測(cè)彎曲菌菌血癥和布魯菌菌血癥很
而革蘭染色很少發(fā)現(xiàn)這些細(xì)菌。依據(jù)細(xì)菌革蘭染色形態(tài)特點(diǎn)，選擇適當(dāng)
1。
1。
 
 5%~10%CO2孵育
 
&ordf;
 
 
EMB 血瓊脂 PEA或CAN
 
 
 × ××
 × ××
 
 × ×××
 × ××××
b × ×
 × ××
c  
 
48h；EMB；伊紅美藍(lán)瓊脂；PEA；苯乙基醇瓊脂；CAN；多
-萘啶酮酸瓊脂。
30℃培養(yǎng)。
 
   當(dāng)革蘭染色顯示細(xì)菌形態(tài)均一時(shí)，厭氧培養(yǎng)的價(jià)值不大。對(duì)所有培養(yǎng)陽(yáng)性，
 
   革蘭染色為純的細(xì)菌，可進(jìn)行初步鑒定并做直接抗生素藥敏試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)程序，
FDA批準(zhǔn)的市售產(chǎn)品?？捎糜诔醪借b定的商品試劑，包括：膽汁溶解，
酶，乳膠凝集分型實(shí)驗(yàn)等。
   美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（NCCLS）推薦的抗生素敏感試驗(yàn)沒(méi)有血培養(yǎng)

 
   對(duì)各種血培養(yǎng)法中的陽(yáng)性肉湯培養(yǎng)物進(jìn)行傳種并且立即孵育培養(yǎng)，為進(jìn)一步
5h-7h后有明顯的菌落生長(zhǎng)，取瓊脂表面的菌落用于細(xì)菌鑒定和抗

 
DNA擴(kuò)增技術(shù)可以鑒定血培養(yǎng)中的細(xì)菌和檢測(cè)抗生素
FDA不推薦常規(guī)使用。
萬(wàn)一需要進(jìn)一步的研究，至少保存幾個(gè)星期。為了讓細(xì)菌活
兼性需氧菌和兼性厭氧菌應(yīng)傳種到半固體培養(yǎng)基中，例如動(dòng)力培養(yǎng)基。嚴(yán)格
苛養(yǎng)
為長(zhǎng)期儲(chǔ)存，細(xì)菌可懸浮于15%
-70℃冷凍。

  血培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果的報(bào)告程序：
  血培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果十分重要，應(yīng)立即口頭報(bào)告給患者的主治醫(yī)生，報(bào)告的日期
應(yīng)向臨床醫(yī)師提供重要
包括革蘭染色的形態(tài)，血培養(yǎng)陽(yáng)性的數(shù)量和其他的鑒定資料，如革蘭陽(yáng)

口頭報(bào)告后應(yīng)立即進(jìn)行書面初步報(bào)告。除
否則不應(yīng)更改初步報(bào)告的結(jié)
 
   當(dāng)培養(yǎng)24h和48h后，對(duì)陰性血培養(yǎng)結(jié)果在最短的時(shí)間內(nèi)發(fā)出初步報(bào)告。有些
“血培養(yǎng)3天后無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)”。

   真菌培養(yǎng)：
   多種方法可提高血液中真菌的檢出率，包括使用通氣的真空血培養(yǎng)瓶、雙相
-離心技術(shù)和特殊營(yíng)養(yǎng)的肉湯培養(yǎng)基（如腦心浸液肉湯等）。裂解-
特別是對(duì)于營(yíng)養(yǎng)要求苛刻的雙相真菌。實(shí)
5至7天）可提供充足的營(yíng)養(yǎng)支持白

-離心技術(shù)可獲得最高的檢出率。霉菌抑
lsolator管結(jié)合使用。對(duì)于分離糠秕
可在培養(yǎng)基表面覆蓋一層橄欖油或其他長(zhǎng)鏈脂肪酸。陰性的真菌血培養(yǎng)
22-30℃孵育4周后再仍棄。