德國的藥企多為家族企業(yè)或私有企業(yè)，如今享譽全球的拜耳、格蘭泰、勃林格殷格翰、費森尤斯和默克或多或少都是從家族企業(yè)發(fā)展而來，歷史向上可追溯很多代，有些藥廠的歷史甚至可以追溯到德意志第二帝國時期。德國制藥業(yè)發(fā)跡于第一次工業(yè)革命后期，蒸汽機的出現(xiàn)使得采礦業(yè)和冶金業(yè)等需要大量人力的重工業(yè)得以飛速發(fā)展，從而推動了化工行業(yè)的進步。可以說，德國制藥業(yè)與化工行業(yè)是密不可分的。然而隨著兩次世界大戰(zhàn)的戰(zhàn)敗，以及冷戰(zhàn)時期德國的分裂，使得德國制藥業(yè)并沒能跟上時代的潮流。20世紀70年代，生物技術開始進入制藥行業(yè)，而當時，拜耳、默克、勃林格殷格翰還在鉆研化學合成藥，費森尤斯則專耕于大輸液產(chǎn)品，另一個大廠格蘭泰則陷于臭名昭著的“反應?！笔录凶灶櫜幌尽缀醮髲S們都沒有太把生物技術當回事兒，而本文的主角——Rentschler在1974年就成立了生物技術部門，并于1979年開始進行重組細胞株的開發(fā)。

圖1 Rentschler公司發(fā)展歷史（版權為作者所有）

Rentschler公司自稱為一家中型生物制藥公司，總部位于德國的勞普海姆鎮(zhèn)上，總面積超過4萬平米。作為生物技術的先鋒，其能提供基于哺乳動物細胞的代工開發(fā)和生產(chǎn)。目前已為全球100多個客戶提供了外包服務，經(jīng)手了超過200個不同的分子，運行了超過350批生產(chǎn)，其中30%為連續(xù)培養(yǎng)模式?，F(xiàn)任管理層主要來自安進，勃林格殷格翰和默克等大廠。

下面我們來從幾個維度考察一下Rentschler的實力具體如何：硬件設施、技術儲備和領導力。

首先是硬件設施，3x 3000L不銹鋼反應器，2x 2000L和2x 1000L一次性生物反應器，支持灌流培養(yǎng)（ATF-10配合XDR-1000），?KTAprocess，最大80cm內(nèi)徑層析柱，60000瓶量的罐裝和凍干線[1]。

圖2 2012年獲獎設施，左起分別為XDR-50, XDR-200和XDR-1000一次性生物反應器（來自Rentschler官網(wǎng)）

直觀感受，確實如其自稱的是個中型體量的CDMO公司，但是體量不大，質(zhì)量卻很出色。2012年德國總部更是獲得了年度設施獎。硬件設備都來自知名供應商。2015年更是與GE Healthcare官宣了其新產(chǎn)線的落成[2]，因為其不僅在當年購買了XDR-50, XDR-200, XDR-500和XDR-2000, 更是第1000臺?KTAprocess的客戶，且所有這些設備在6個月內(nèi)就交付并完成了調(diào)試。后續(xù)又與GE Healthcare 聯(lián)合發(fā)布了White Paper，看來GE Healthcare會作為Rentshler的長期合作伙伴[3]。

圖3 2015年擴充的2000L生產(chǎn)線，右起分別為XDR-50, XDR-200, XDR-500和XDR-2000一次性生物反應器（來自Rentschler官網(wǎng)）

2016年其又擴充了一個2000L一次性生物反應器，筆者暫未了解到其品牌信息，不過根據(jù)其彩頁中宣稱的“不同類型的一次性生物反應器”字眼來看，也可能不是XDR，希望有知情人能夠后臺留言一下。

今年年初，Rentschler又完成了對Shire位于麻省Milford市的GMP設施的收購，終于在美國本土有一個CDMO基地了，2006年其只是在美國成立代理公司承接美國業(yè)務，并未建設工廠[4]。

再來看其技術儲備。2014至2018年，Rentschler在期刊上發(fā)表了26篇論文，面向客戶推出了17篇應用文獻，在各大生物制藥論壇上發(fā)表了58場演講。內(nèi)容涵蓋分子構建、細胞株優(yōu)化、灌流培養(yǎng)工藝、病毒去除方法、層析工藝優(yōu)化、SPR技術和制劑。Rentschler對一次性技術的應用案例還被收錄在了由中國食品藥品國際交流中心組織編寫的《國際制藥一次性使用系統(tǒng)應用及技術指南》一書中。

下面我們快速看幾篇比較有意思的文獻，更多內(nèi)容請各位讀者自行前往Rentschler官網(wǎng)查閱。如果有讀者感興趣，可以底下留言，后面小編可以把大家感興趣的文獻著重拿出來解析。

1. 高密度細胞建庫應用于快速擴種[5]

通過ReadyToProcess WAVE 25波浪式生物反應器及灌流細胞培養(yǎng)袋，將24天的擴種時間縮短至10天左右，同時保持一致的細胞密度、細胞活力和表達量。 

圖4 快速擴種路線

2. 通過SPR技術（Biacore）測定一種IgG對CD16和GD2的結合常數(shù)作為ADCC效應的替代評估方案[6]

使用Biacore C將GD2偶聯(lián)在CM05芯片上，讓IgG流過芯片，計算其與GD2的結合常數(shù)；

使用Biacore T200將蛋白A固定化在CM05芯片上，讓IgG流過芯片，讓CD16流過芯片，計算其與CD16的結合常數(shù)。

 

圖5 上：IgG與GD2的結合；下：IgG與CD16的結合

3. 通過STORY方法優(yōu)化親和層析填料和得率[7]

減少層析填料體積，提高cycle數(shù)，將裝填高度降低以縮短cycle時間。從空間和時間兩個層面對工藝成本進行平衡?？梢怨?jié)省約900,000歐元的成本。

 

圖6 上：兩種方法的填料成本；下：層析工藝流程

4. 應用不同的工藝路線生產(chǎn)復雜分子：長效融合蛋白及雙抗[8]

案例一：長效凝血因子VII

圖7 左：不同糖基化融合片段的分子構建；右：不同的下游工藝路線

案例二：CTLA-4 Fc片段融合的貝拉西普

圖8 上：該分子能結合CD80和CD86；下：上游工藝及補料策略

5. 一次性技術的優(yōu)勢與劣勢[9]

在操作、公用系統(tǒng)和維護方面，對于一個普遍的mAb工藝來說，全部使用一次性設備可以降低>20%的操作成本和>10%的人力成本。對于CDMO來說，一般2000L以上的規(guī)模不是經(jīng)常會遇到，因此最近出現(xiàn)的4000L SUB（來自ABEC）并不是十分需要。因為現(xiàn)代工藝完全可以通過優(yōu)化或新技術來提高效率和產(chǎn)量，以盡可能避免2000L以上規(guī)模的生產(chǎn)要求。

一年24批生產(chǎn)的3000L不銹鋼線的成本大約為€250/g蛋白；而一年36批生產(chǎn)的2000L一次性線的成本約為€280/g蛋白。

最后再看Rentschler的領導力。

• 現(xiàn)任CEO Frank Mathias博士，25年以上的工業(yè)經(jīng)驗。之前曾在施維雅和安進慕尼黑分公司的CEO，同時擔任德國生物制藥促進交流協(xié)會VFA的主席。來自德國本土的生物制藥人才資源應該是有所保障的。

• 現(xiàn)任COO Ralf Otto博士，20年以上的工業(yè)經(jīng)驗。之前在勃林格殷格翰負責細胞和生物制造板塊的整體運營，后又擔任勃林格位于美國加州弗里蒙特公司的副總裁。

• Thomas R?sch博士，生物制藥工程板塊副總，16年的工業(yè)經(jīng)驗，參與設計、建設和改造了勃林格殷格翰位于德國和美國的多個生產(chǎn)和研究中心。

• Jesús Zurdo博士，工藝科學與創(chuàng)新板塊高級副總裁，15年工業(yè)經(jīng)驗。分管CDMO業(yè)務中從細胞株構建至制劑的所有工藝的開發(fā)和優(yōu)化。之前在龍沙公司（Lonza）擔任戰(zhàn)略創(chuàng)新總監(jiān)，負責新技術應用及新劑型開發(fā)。他也是一系列新藥公司的聯(lián)合創(chuàng)始人，如Zyentia和Zapaloid，這些經(jīng)歷可以更好地吸引新藥公司的業(yè)務。

• Henning Gerschewski博士，生產(chǎn)科學與技術副總裁，15年工業(yè)經(jīng)驗。分管CDMO業(yè)務的生產(chǎn)、開發(fā)和質(zhì)量工作。之前擔任勃林格殷格翰位于美國加州弗里蒙特公司的工藝轉移和單元操作平臺的總監(jiān)。

• Christian Hunzinger博士，項目管理高級副總裁，15年工業(yè)經(jīng)驗。之前擔任Merck的CMC項目主管，通過與Pfizer的戰(zhàn)略聯(lián)盟，最終成功將Bavencio?(avelumab)推上市場。

可以看出這些管理層主要是來自于德國本土，其中勃林格殷格翰成為其最大的“高管市場”。勃林格作為全球最大的CDMO公司之一，從該公司走出的高管們，相信能在Rentschler發(fā)揮重大作用，將CDMO業(yè)務和技術革新推向更高的水平。

參考文獻 (所有文章或新聞均來自Rentschler官網(wǎng)，點擊原文可鏈接到官網(wǎng)，進入news板塊即可查看）

[1] cGMP Biomanufacturing. Flyer. Rentschler Biopharma.

[2] Rentschler Biotechnologie expands European manufacturing capabilities with GE Healthcare Life Sciences bioprocess technologies. News.

[3] Modular approaches for diverse molecules: Reinventing smart bioprocessing. White Paper.

[4] Rentschler Biopharma Completes Acquisition of U.S. Manufacturing Site. News.

[5] Marvin Kadisch, Lisa Wei?er, Kurt Russ. High-density cell banking for intensified seed trains.

[6] Marco Bareth, Stefan Stranner, et al. FcγRIII(CD16) and GD2 binding assay for an IgG using surface plasmon resonance (SPR; Biacore)  as a surrogate for evaluation of Antibody-Dependent Cell-mediated Cytotoxicity (ADCC). 

[7] Marlene Holder, Sabrina Graser, et al. SCALE-UP OF AN AFFINITY CHROMATOGRAPHY TO 1000 L MANUFACTURING SCALE USING SPACE-TIME OPTIMIZED RESIN AND YIELD (STORY) APPROACH.

[8] Stefan R. Schmidt. Manufacturing of Complex Biobetters: Half-life Extended Fusion Proteins and Bispecifi c Molecules 

[9] Tina Lütke-Eversloh, Peter Rogge. Biopharmaceutical Manufacturing in Single-Use Bioreactors. Pham. Ind. 80, Nr. 2,281-284 (2018)