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      血小板計數(shù)做光學(xué)法就放心了?別太自信!

       開心100mm05xkw 2019-03-17

      案例經(jīng)過

      在周日值班審核血常規(guī)時發(fā)現(xiàn)一個診斷為“脊髓壓迫癥”的患者出現(xiàn)異常的血小板計數(shù)升高,該患者血小板近期一直在50×109/L左右波動,可這次的血常規(guī)卻一下子高達225×109/L。更換儀器復(fù)查,結(jié)果一致。這是怎么一回事呢?是輸注血小板了,藥物引起的升高還是其它原因呢?

      案例分析

      由于儀器報警提示血小板分布異常,且血小板數(shù)前后差異巨大觸犯了Delta復(fù)檢規(guī)則。因此進行推片復(fù)檢,但在鏡下對血小板數(shù)進行估計時卻發(fā)現(xiàn)血小板數(shù)目并不多且散在分布,大約40×109/L左右。由于該患者同時檢測了網(wǎng)織紅細胞,我便去查看了網(wǎng)織紅通道中的光學(xué)法血小板結(jié)果(PLT-O),結(jié)果為160×109/L。PLT-O通道其實就是網(wǎng)織紅細胞檢測通道,由于血小板內(nèi)部殘存一部分RNA,而網(wǎng)織紅細胞也是殘存RNA的非成熟紅細胞,因此兩者都可以跟同樣的熒光染料結(jié)合,然后根據(jù)側(cè)向熒光強度(SFL)和代表細胞大小的前向散射光(FSC)區(qū)分兩者。因為小成熟紅細胞及紅細胞碎片均不含有RNA所以不會對PLT-O結(jié)果產(chǎn)生干擾。正因為PLT-O相比阻抗法PLT(PLT-I)更具有特異性,往往遇到這種情況時,只要沒有聚集現(xiàn)象,出于一種慣性思維其實很容易將其作為最終結(jié)果。即使鏡下估計PLT明顯不多,也會認為這是由于涂片過薄或者視野分布不均所導(dǎo)致的估算誤差。

      雖然當時我也是這么想時,但注意到PLT-O通道的散點圖有明顯的異常,見圖1、2。

      圖1. 正常PLT-O通道散點圖

      圖2. 本例PLT-O通道散點圖

      為了確認結(jié)果,我?guī)е蓡栍脽晒夥≒LT(PLT-F)通道又復(fù)查了一次。令人意外的是,其計數(shù)值僅為58×109/L,明顯低于PLT-I和PLT-O的結(jié)果,而跟我們鏡下估計的PLT數(shù)接近。根據(jù)以往的經(jīng)驗,初步判斷這極有可能是一起血小板的假性升高。那么導(dǎo)致血小板假性升高的原因是什么呢?一般來說如果存在明顯干擾血小板檢測的因素,那么在以前的檢查應(yīng)該也會有所體現(xiàn)才對。比如小紅細胞干擾,總不可能今天突然就冒出來吧,畢竟都是sysmex XN系列儀器做出來的結(jié)果。于查看既往幾次結(jié)果和儀器圖形時,發(fā)現(xiàn)該患者本次的血小板直方圖跟以前并不一樣,見圖3及圖4。但是前面幾次都只用阻抗法通道就得到了正確的結(jié)果,難道這是一次偶然因素引起的血小板假性升高?

      圖3. 本次PLT直方圖

      圖4. 前次PLT直方圖

      這時候我還注意到了,其實PLT-F通道的散點圖也有明顯的異常,在紅細胞群的下方出現(xiàn)了許多異常散點見圖5、6.

      圖5. 正常PLT-F通道散點圖

      圖6. 本例PLT-F通道散點圖

      該區(qū)域的散點通常表示碎片,于是我又返回去查看血片,果然在多個視野中看到了紅細胞碎片如下圖箭頭所示。

      圖7. 本例標本外周血涂片紅細胞(箭頭標識為紅細胞碎片)

      那血涂片中這些碎片又從何而來?這時候已經(jīng)過去了一段時間,重新查看靜置后的標本時發(fā)現(xiàn)有嚴重的溶血。于是馬上打電話溝通要求重新抽血,重抽血后上機直測其阻抗法結(jié)果為48×109/L,靜置后上層清亮。因此這些紅細胞碎片是由標本體外溶血的結(jié)果。

      但是,還有一個疑問沒有解決,如果是單純紅細胞碎片引起的PLT假性升高,那為什么也會引起PLT-O結(jié)果不準呢?很遺憾這個問題沒有找到相關(guān)資料,張時民老師也寫過一例類似的案例《血小板計數(shù)阻抗法還是光學(xué)法準,有時真的不絕對!》(戳藍字轉(zhuǎn)鏈接),但最后也沒有說明具體原因。就我個人推測可能是該標本為采血不規(guī)范所導(dǎo)致的嚴重體外溶血,可能也會引起白細胞破壞并形成白細胞碎片。因為也只有白細胞碎片才同時兼?zhèn)潴w積小和攜帶RNA這樣的特點,從而使PLT–O也出現(xiàn)了假性增高。不過可惜的是,后面才意識到這點,因此沒能找到具體證據(jù)。PLT–O和F通道其實都是光學(xué)法,那PLT–F為何沒有影響呢?這是因為該通道采用的是新型核酸染料,特異性更強。那是不是說PLT–F就是完美的呢?那也不是,對于巨大血小板仍有可能漏掉,具體可以參考《一例巨大血小板病例引發(fā)的深思》。

      總結(jié)

      血常規(guī)標本不比生化血清標本,容易忽視一些不易察覺的標本本身存在的干擾情況。此外,雖然現(xiàn)在的血液分析儀越來越先進,但始終存在一定的局限性。因此更需要我們在審核報告時,一定不能只關(guān)注報告上的數(shù)字,做到“眼中有圖形,鏡下有細胞,心中有患者”。血小板假性增高往往比降低更有迷惑性,如果這次沒有注意儀器報警和血小板異常圖形,結(jié)果的歷史對照或者沒有注意到PLT-O散點圖的異常,那是不是這樣錯誤的報告就發(fā)出去?

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