Capivasertib (AZD5363) 是一種有效的 pan-AKT 激酶抑制劑，抑制 Akt1，Akt2 和 Akt3，IC50 分別為 3，7 和 7 nM。

　　MCE 的所有產(chǎn)品僅用作科學研究，我們不為任何個人用途提供產(chǎn)品和服務

　　AZD5363生物活性

　　體外研究

　　新型吡咯并嘧啶衍生化合物Capivasertib以10nM或更低的效力抑制所有AKT同種型，并抑制細胞中AKT底物的磷酸化，效力為約0.3-0.8μM。 Capivasertib抑制這些底物的磷酸化，在3種細胞系中IC50值為0.06至0.76μM。 Capivasertib有效抑制這些細胞系中S6和4E-BP1的磷酸化，而它增加了ser473和thr308處AKT的磷酸化。 在BT474c細胞中，Capivasertib誘導FOXO3a核轉位，EC50值為0.69μM; 濃度為3μM足以使FOXO3a幾乎完全定位于細胞核。 AZD5363Capivasertibhibitor MK-2206活性低得多（IC50>30μM）。

　　體內(nèi)研究

　　將Capivasertib（AZD5363）口服給予裸鼠導致BT474c異種移植物中PRAS40，GSK3β和S6磷酸化的劑量和時間依賴性降低（PRAS40磷酸化EC50~0.1μM總血漿暴露），血糖濃度的可逆增加和劑量 U87-MG異種移植物中2 [18 F]氟-2-脫氧-D-葡萄糖（18 F-FDG）攝取的依賴性降低。 Capivasertib的慢性口服給藥引起源自各種腫瘤類型的異種移植物的劑量依賴性生長抑制，所述腫瘤類型包括對曲妥珠單抗具有抗性的HER2 +乳腺癌模型。 Capivasertib還顯著增強多西紫杉醇，拉帕替尼和曲妥珠單抗在乳腺癌異種移植物中的抗腫瘤活性

　　實驗參考方法

　　AZD5363細胞分析

　　細胞增殖測定通過MTS和Sytox Green兩種方法測定。 簡而言之，將細胞接種在96孔板中（密度允許在72小時測定期間進行對數(shù)生長）并在37℃，5％CO 2下孵育過夜。 然后將細胞暴露于30至0.003μM的Capivasertib濃度72小時。 對于MTS終點，通過CellTiter AQueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay試劑測量細胞增殖。 使用Tecan Ultra儀器測量吸光度。 對于Sytox Green終點，將在TBS-EDTA緩沖液中稀釋的Sytox Green核酸染料加入細胞（終濃度為0.13μM），并使用Acumen Explorer檢測死細胞數(shù)。 然后通過加入皂苷（0.03％終濃度，在TBS-EDTA緩沖液中稀釋）使細胞透化，孵育過夜并測量總細胞計數(shù)。 對MTS和Sytox Green終點進行預測量測量，并且使用吸光度讀數(shù)（MTS）或活細胞計數(shù)[1]確定將處理細胞的生長減少至未處理細胞（GI50）值的一半所需的濃度。

　　MCE尚未獨立確認這些方法的準確性。 它們僅供參考。

　　Animal Administration

　　小鼠

　　使用特異性，無病原體的雌性裸鼠（nu / nu：Alpk）和雄性SCID小鼠（SCID / CB17; 786-0異種移植物研究）。 當平均腫瘤大小達到約0.2cm 3時，將小鼠隨機分為對照組和治療組。 治療組接受通過口服強飼法溶解于10％DMSO 25％w / v Kleptose HPB（Roquette）緩沖液中的Capivasertib（AZD5363）的不同劑量方案，在第1天通過靜脈內(nèi)注射將多西紫杉醇溶于2.6％乙醇的可注射水中。 每周一次15或5毫克/千克。 當組合施用時，在口服劑量的Capivasertib（AZD5363）之前1小時施用多西紫杉醇。 對照組單獨接受DMSO / Kleptose緩沖液，每天兩次通過口服強飼法。 在研究期間每周兩次記錄腫瘤體積（通過厚度測量），動物體重和腫瘤狀況。 通過CO 2安樂死處死小鼠。 使用下式計算腫瘤體積（使長度為腫瘤的最長直徑，寬度為相應的垂直直徑）:(長×寬）×√（長×寬）×（π/ 6）。 通過比較對照組和治療組之間腫瘤體積的差異來評估治療開始時的生長抑制。