清軍對李定國也緊追不舍，二月底，永州被攻陷，李定國移駐龍虎關(guān)（湖南桃川西）。三月，廣東義師羅錦鼐迎接大西軍入粵，廣東再次掀起抗清運(yùn)動。李定國連破開建（廣東封開）、德慶，直抵肇慶城下，又分兵攻克四會、廣寧、三水，完成對肇慶城的包圍。三月二十六日，大西軍三面圍攻肇慶 ，但由于清軍拚死抵抗，圍攻一月未破，清將耿繼茂發(fā)鐵騎兵來救，農(nóng)民軍被迫撤圍退軍柳州。洪承疇聞其敗，曾派人招降，李定國置之不理。

李定國深感自己的力量不足以平定廣東，便于六月主動致書鄭成功，邀他會攻廣州，但由于聯(lián)絡(luò)不便，鄭成功誤期，鄭、李第一次聯(lián)合行動未能實現(xiàn) 。

李定國不僅在廣東失利，在廣西的進(jìn)展也不順利。七月十三日，他率兵兩萬進(jìn)攻桂林，圍攻七晝夜未克，只得退回柳州，然而孫可望仍要置他于死地。八月，派馮雙禮偷襲柳州。李定國早有準(zhǔn)備，暗地伏兵于江口蘆荻中。當(dāng)馮雙禮來攻，便以精銳抵擋。馮連忙退兵，伏兵四起，馮只得自投水中。李定國傳令勿殺，曉以大義，從此馮雙禮投順李定國。

公元1654年（清順治十一年、明永歷八年）初，南明魯王政權(quán)定西侯張名振率海艦攻入長江，直抵鎮(zhèn)江。鄭成功也遣兵攻崇明，清廷沿海一帶告急。形勢的好轉(zhuǎn)，使李定國再度東征。三月，他率領(lǐng)數(shù)萬農(nóng)民軍和十三匹戰(zhàn)象，連破廉州（廣東合浦）、雷州（廣東海康），并占領(lǐng)羅定、新興、石成、電白、陽紅、陽春等縣。五月，進(jìn)攻高州，清守將張月舉兵來歸。六月，再攻梧州，雖因清兵有備，不克，但廣東、廣西各地義師群起響應(yīng)。李定國控制了廉、雷、高一帶，各地的百姓紛紛響應(yīng) ，抗清形勢再度出現(xiàn)高潮。李定國準(zhǔn)備約鄭成功合攻廣州，平定全廣，再擴(kuò)大到全國。于是他題字“一匡天下”，自比管仲復(fù)出 ，產(chǎn)生了驕傲情緒。

李定國明白，要想攻克廣州，首先要打開廣州的門戶新會。這一計劃必須要有鄭成功的配合才能完成。七月，李定國再次致書鄭成功，邀他合攻新會。信中指出：“會城兩酋（尚可喜、耿繼茂）恃海攖城，尚稽戎索。茲不谷已駐興邑，刻日直搗五羊；然逆虜以新會為鎖鑰樞牖，儲糧悠資，是用悉所精神，援餉不絕。不谷之意，欲就其地以芟除，庶省城可不勞而下?！?信中注明援兵不得遲于十月以后。同時，李定國又聯(lián)絡(luò)了粵東水陸義師王興、陳奇策等部，號稱二十萬大軍，將新會包圍得水泄不通。

十月十四日，攻城開始，農(nóng)民軍采用炮擊，掘地道、伐木填壕等戰(zhàn)術(shù)均被擊退，連攻兩月，未能奏效。這時李定國輕信了間諜城中糧盡的謊言，命令罷攻，采用圍困戰(zhàn)術(shù)，并且建造行宮，設(shè)置官倉，向諸縣征收鹽米， 使清軍有了喘息之機(jī)，大西軍中也遭受了瘟疫，士氣不振， 處于不利的境地。

十二月，尚可喜、耿繼茂及清廷靖南將軍朱瑪喇率十萬滿漢兵趕來，清軍以鐵騎兵沖垮李定國左軍，李定國依恃的戰(zhàn)象也被驚散，致使大西軍全線崩潰。 清軍乘勝追殺二十里，尸橫遍野。李定國只得渡橫江焚浮橋解新會之圍。

李定國撤出新會后，沿途六、七十萬百姓跟隨撤退，李定國安撫百姓跟隨大軍撤退 ，連夜退走南寧。從此，廣東高、雷、廉三府，肇慶、羅定所屬三州十八縣及廣西橫州、郁林一帶全部淪入清軍之手，廣東義師也隨之失敗。新會慘敗，從主觀上講，與李定國的驕傲輕敵不無關(guān)系；從客觀上講，鄭成功此時正與清廷議和，拖延了援粵之師，等十二月議和失敗，鄭成功才派林察率舟師赴粵，李定國早已敗退，貽誤了戰(zhàn)機(jī)。同時，孫可望又切斷了滇黔的物資援助，這一切終于導(dǎo)致了新會之戰(zhàn)的失敗。當(dāng)李定國退抵南寧時，身邊僅剩下六千人，從此他企圖恢復(fù)兩粵的事業(yè)終于化成了泡影。