杜氏肌營養(yǎng)不良基因治療是目前罕見遺傳病治療的研究熱點，杜氏肌營養(yǎng)不良的基因診斷對于靶向DMD基因治療具有重要指導(dǎo)意義。從2005年起，鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院遺傳與產(chǎn)前診斷中心已經(jīng)完成2500多個DMD家系的基因診斷，并對有再生育的高風(fēng)險家庭進(jìn)行了精準(zhǔn)產(chǎn)前診斷，目前正在開展DMD患者的靶向基因治療研究。

1.概述：

杜氏肌營養(yǎng)不良癥（DMD,OMIM:310200 )也稱假肥大性肌營養(yǎng)不良，為X-連鎖隱性遺傳。是由于DMD基因缺陷導(dǎo)致肌細(xì)胞膜上的抗肌萎縮蛋白功能異常，肌細(xì)胞受損傷，出現(xiàn)進(jìn)行性壞死、萎縮等，臨床出現(xiàn)肌無力的癥狀與體征。一般男性發(fā)病，占出生男嬰的20-30/10萬例發(fā)病。我國的發(fā)病率約為1/3853，估算全國患者約70000人。 

2.病因：

DMD基因位于Xp21.2-3，是已知人類最大的基因，cDNA長14kb，編碼區(qū)包括79個外顯子，所編碼的蛋白稱為抗肌萎縮蛋白（Dystrophin），分布于骨骼肌和心肌的細(xì)胞膜上，起支架作用，保護(hù)肌細(xì)胞膜在肌肉收縮時不受損傷?；蛲蛔儗?dǎo)致蛋白功能異常，最終造成肌肉進(jìn)行性壞死。DMD患者約1/3為新發(fā)突變，其余為X染色體隱性遺傳；外顯子缺失突變占55%-65%；重復(fù)突變占5%-10%點突變占30%左右（無義突變、引起移碼的突變、內(nèi)含子與外顯子剪接接頭突變）。

3.臨床表現(xiàn)：

杜氏肌營養(yǎng)不良在兒童期起病。表現(xiàn)為運動發(fā)育輕度遲滯，骨骼肌進(jìn)行性無力萎縮，影響肢體運動功能，逐漸出現(xiàn)步態(tài)異常、上肢活動受限，自然病程常在10歲左右喪失行走能力。此后出現(xiàn)脊柱側(cè)彎、關(guān)節(jié)攣縮、呼吸肌無力、擴(kuò)張性心肌病，20歲左右因呼吸衰竭、心功能衰竭死亡。查體可見雙腓腸肌假肥大，同時可有雙前臂及舌肌假肥大，Gower’s征陽性，腰椎前凸、翼狀肩胛等。Becker型肌營養(yǎng)不良為同一疾病的相對良性表型，因DMD基因功能未完全喪失，所以病情明顯輕于Duchenne型肌營養(yǎng)不良?？汕嗄晟踔脸赡昶鸩?，部分患者不影響生存期。假肥大體征明顯，部分患者在肢體無力尚輕時，先出現(xiàn)明顯的擴(kuò)張性心肌病。

4.診斷：

患者幼兒期運動發(fā)育輕度遲滯，兒童期（5～6歲）運動能力開始下降，并出現(xiàn)步態(tài)異常、跟腱攣縮、腰椎前凸等變化，查體可見明顯雙腓腸肌假肥大現(xiàn)象。結(jié)合血肌酶譜肌酸激酶明顯升高（20～200倍）、肌電圖呈肌源性損害，可臨床疑診DMD/BMD。確診需基因檢測，一般先用多重連接探針擴(kuò)增技術(shù)（MLPA）檢測DMD基因大片段缺失和重復(fù)，如果未發(fā)現(xiàn)此類拷貝數(shù)異常再用高通量測序技術(shù)（NGS）檢測微小突變。