“藥有個性之特長，方有合群之妙用”，中藥復方臨證治病是中醫(yī)藥學科的特色和靈魂^[1]。中醫(yī)學認為，中藥復方配伍是在中醫(yī)基礎理論指導下，針對一定疾病證候，按“七情”和“陰陽和合”的原則，以“君、臣、佐、使”的原則遣藥成方組藥，以達到增效減毒的目的。以往大量的研究推動了中藥配伍由傳統(tǒng)的藥材層面配伍向微觀的組分層面配伍研究的轉變，但要進一步形成組分中藥配伍創(chuàng)制新藥的研究格局尚存在困難。

面對中藥與人體2個巨復雜體系，首先亟需解決的關鍵問題是運用現代科學理論解釋中藥復方配伍的本質內涵。本課題組前期用超分子化學理論解釋中醫(yī)藥基礎理論、中藥四性、炮制及成藥性等^[2-5]，在此基礎上，提出用超分子“印跡模板”理論解釋中藥復方配伍，主要基于2點：（1）超分子化學法源于自然，也應回歸于自然；（2）中藥與人體是來源于自然界的巨復超分子體，自然界的生物體進化過程本質上是生命體的超分子化學過程。生物體內各種分子以超分子“印跡模板”為母體，由小分子到大分子，由單分子到多分子，由多分子到細胞器、細胞、組織、系統(tǒng)，乃至整個生物體，逐步演化，超分子“印跡模板”貫穿始終。中藥復方配伍理論正是對中藥與人體這種分子間作用的表達。中醫(yī)理論的經絡臟腑是生物體各級超分子“印跡模板”有序體；中藥有效成分群是與經絡臟腑“印跡模板”相一致的聚集體；中藥配伍能顯著地改變這一“印跡模板”的作用規(guī)律^[6]。

中醫(yī)藏象證候、中藥復方配伍、中醫(yī)經絡理論這3者形成了完備的中醫(yī)藥理論體系，其中中藥復方配伍規(guī)律研究最為核心，備受歷代醫(yī)家重視^[7]。為此，本文對其歷史與現代研究現狀進行梳理，剖析亟需解決的關鍵問題，并運用超分子“印跡模板”理論解釋中藥復方配伍科學內涵，提出解決之策。

1  中藥配伍傳統(tǒng)理論為中藥復方現代研究提供整體指導思想

由于“藥食同源”，早期的中藥復方配伍理論直接來源于對食物的感官認識，如食之五味與藥之五味，食之五味配合與藥之五味配合。歷代本草著作、方劑學著作及教材，對幾千年配伍治療理論進行詳盡的總結，主要有“君、臣、佐、使”配伍，四性五味配伍，七情配伍，標本配伍。中醫(yī)學經典著作《黃帝內經》記載：“氣有高下，病有遠近，證有中外，治有輕重，適其至所為故也”，體現了標本配伍，是中藥配伍理論的萌芽；“辛甘發(fā)散為陽，酸苦涌泄為陰，咸味涌泄為陰，淡味滲泄為陽”，體現了“五味”陰陽配伍^[8]。東漢以前的《神農本草經》曰：“上藥一百二十種為君，中藥一百二十種為臣，下藥一百二十種為佐、使”，首次根據藥物的善惡劃分君、臣、佐、使；又將藥物的配伍關系歸納為“有單行者，有相須者，有相使者，有相畏者，有相惡者，有相反者，有相殺者，凡此七情，合和視之”^[9]。又曰：“治寒以熱藥，制熱以寒藥”，在“五味”的基礎上，提出依據“四氣”原則組方。傳統(tǒng)中藥配伍理論主要研究中藥材整體配伍作用于機體后，機體宏觀證候走向的動態(tài)平衡，以“七情”及陰陽和合定性表述，與超分子化學理論的整體綜合觀不謀而合，為中藥復方配伍現代研究提供了整體指導思想。

2  中藥復方配伍的現代研究及關鍵問題

中藥復方配伍的現代研究始于1959年^[10]，已近60年，按對中藥組方物質形式可分為體外、體內兩大方面。

2.1  中藥體外配伍形式的藥物作用規(guī)律研究

2.1.1  中藥飲片及組（成）分的分析  （1）有效成分分析：可用于分析配伍前后效應成（組）分改變；（2）指紋圖譜研究：可用于分析配伍中組（成）分的整體改變，2種方法也可以結合使用。

2.1.2  中藥飲片配伍  通過正交設計，對中藥飲片取“用”和“不用”2水平進行拆配方研究，經方差分析可獲得中藥配伍后復方的治療作用。如宋佳^[11]通過拆方研究提出人參四逆湯配伍規(guī)律本質是附子配伍干姜和甘草的增效減毒作用，揭示了人參四逆湯中甘草對附子中雙酯型生物堿的減毒作用成分。

2.1.3  中藥化學成分配伍  該研究最具標志性的項目是以王永炎院士為首的“方劑關鍵科學問題的基礎研究”，針對中藥復方多藥物（多部位、多組分、多成分）、多靶點、多藥效指標及非線性的特征，提出了“多成分多靶點的復方劑量配比優(yōu)化的實驗設計（ED）-非線性擬合（NM）-多目標優(yōu)化（MO）三聯法”研究策略。王睿等^[12]將該法應用于丹參-三七配比優(yōu)化的研究，建立了能與主要效應指標關聯的預測模型，取得了良好效果。中藥指紋圖譜技術與藥效學結合構成中藥譜效學，再與Hill量效關系結合建立“ED-Hill量效關系（HQE）-NM-MO-總量統(tǒng)計矩（TQSM）五聯法”，使體外分析中藥有效（毒）成分更為完善。

2.1.4  中藥組分配伍  張伯禮院士于2005年正式提出了中藥復方組分配伍研究新模式，即以中醫(yī)理論為指導，根據復方組方原則、主要功效和主治病癥，選取每味藥在方中的有效成分或部位，采用現代藥理學方法進行有效成分劑量的最佳配伍研究，最后確定組成和劑量，形成組分清楚的現代復方^[13]。

2.2  中藥配伍體內的藥物作用規(guī)律研究

2.2.1  體內物質基礎研究  不同藥物配伍可能產生新藥效成分或毒性成分，也有可能血藥濃度增大或減小，這都是復方毒與效的產生機制，因此藥動學與物質基礎研究密不可分，與藥效學研究更為密切。但是，中藥有很多未知成分，且有些成分含量極低難以檢測，物質基礎的研究指標只能是其中某幾種有效成分，很難從整體上反映藥物配伍后的變化。2.2.2  量-時-效（毒）關系研究  藥動學（以指紋圖譜表征為譜動學）和藥效動力學（以指紋圖譜表征為譜效學）相結合可以研究藥物在機體內的量-時-效（毒）關系。單成分藥動學及藥效學研究方法成熟，但對于多成分體系，除中藥譜動學總量統(tǒng)計矩外^[14-15]，多借鑒單成分研究思路，即對標志性成分進行研究，不能適應多成分量-時-效（毒）研究的需要。

2.2.3  系統(tǒng)生物學和網絡藥理學  系統(tǒng)生物學和網絡藥理學可以整體預測活性成分及其作用靶點，有助于深入研究中藥復方活性成分的作用機制，不過現有藥物分子數據庫、靶點數據庫等準確性和完整性不夠，不能完整揭示中藥藥理作用，采用其他方法對預測結果進行實驗驗證也存在難點^[16]。

2.2.4  方證關聯 方證關聯強調臨床辨治中“有是證用是方”“證變方變”的組方原則，然而臨床中“一方多證”和“一證多方”的現象比比皆是。這些表明方劑與病證之間的辨證關系并不是“一方一證”，而是“方證異同”的關系^[17]。

2.3  關鍵問題

目前中藥復方研究多圍繞著拆方配伍、組分配伍、劑量配比、藥理作用、物質基礎、譜動學、譜效學、譜效動力學等方面^[18-20]。通過對歷史沿革及研究現狀分析，仍存在以下7個關鍵問題^[21-22]：（1）缺乏將中藥配伍復方治療理論置于中醫(yī)藥基礎理論現代化全局中的考慮，沒有找到能全面詮釋中醫(yī)藥基礎理論的現代科學理論體系^[23-25]；（2）宏觀與微觀表征沒有統(tǒng)一^[18]，對中藥及復方成千上萬成分的宏觀綜合性質及作用規(guī)律無法預測和判斷；（3）目前的研究方法“多分析少綜合”^[6]；（4）中藥復方成分群與“證”作用網絡靶點研究沒有從生物學微觀物質作用的本源上進行定量分析；（5）定性研究多，定量研究少，沒有形成體內量-時-效（毒）的定時研究方法^[26-27]；（6）沒有建立定量的毒與效整合策略^[28]；（7）沒有對定量關系式的數學表征及測算方法進行研究。上述問題互相交織，核心問題是中藥復方配伍理論應采用怎樣的現代科學理論進行全面的詮釋，循生物演化軌跡，可用超分子化學進行詮釋。

3  超分子化學能科學詮釋中藥復方配伍理論

3.1  中藥與人體都是超分子體，超分子作用貫穿始終

中藥與人體為來源于自然界逐級構成的生物超分子體，包括客體分子（印跡模板）和主體分子（空穴通道），主客體按“印跡模板”自主進行作用，包括自識別、自組織、自組裝、自復制這4種自然現象^[2]。中藥有效成分群和機體內各種小分子群為客體分子；不溶于水的成分藥渣和人體經絡臟腑空穴為主體分子。當人體的主體孔穴通道結構與中藥有效成分群發(fā)生化學信息聯系時，亦人體在心臟搏血推動下，水為溶劑，溶于其中的各類客體“印跡模板”與組織器官主體孔穴通道產生印跡作用，體現出共“印跡模板”各向異性的“氣析”作用^[3]，宏觀上表現出中藥藥性和藥效作用，而中藥配伍可以顯著性地改變這一“印跡模板”的“氣析”作用規(guī)律，由此便形成了中藥復方配伍的微觀物質基礎運行規(guī)律，這是中藥配伍能用超分子化學研究的現代科學基礎^[29]。

3.2  超分子“印跡模板”理論的提出

中藥與人體均為按超分子“印跡模板”自主作用逐級構成的生物超分子體，其產生藥（毒）效的成分都是生物超分子“印跡模板”的聚集體，包括單分子、超分子、聚合超分子及巨復超分子。在由小分子構成整個人體有序超分子過程中，其超分子主體保留了客體小分子的印跡模板，形成孔穴通道結構與外界發(fā)生化學反應，具有相同“印跡模板”的中藥與人體能夠進行物質能量交換，否則生命現象難以為繼。印跡模板是指以某一特定的目標分子為模板，制備對該分子具有特異選擇性聚合物的空間結構，屬于超分子化學中主客體化學研究范疇，體現自識別、自組織、自組裝與自復制的特點^[4,30-32]。超分子印跡模板是在空間結構和結合位點上能完全匹配的模板物，對中藥成分來說既是其分子結構的空間活性結構，也可以說是活性原子團的空間排列點陣。

3.3  方-證關聯的中藥復方配伍超分子“印跡模板”理論

中藥復方是經絡臟腑內部超分子印跡模板（證素）與中藥分子群外部印跡模板（藥素）按“七情和合”陰陽配伍的結果，中藥對人體產生作用取決于中藥固有藥理效應和機體狀態(tài)兩方面，故方證關聯是中藥配伍的核心。中藥復方有效成分群通過分子間“自主作用”組成一個“分子社會”，也就是印跡模板聚合物（鑰），如糖類、苷類、氨基酸類，而有一定空間通道結構的人體經絡臟腑空穴就是超分子主體（鎖），“證”與“方”的對應關系與超分子主客體“鎖”與“匙”的關系不謀而合，故超分子印跡模板理論可以詮釋方證關聯的中藥復方配伍理論^[4]。

從中醫(yī)藥長期臨床治病過程就能看出藥物與人體之間印跡模板作用的辨證關系：中醫(yī)治病側重的是證候而非單純的疾病表象，對于疾病表象相似但證候懸殊的“同病”現象以不同方法去施治，即“同病異證異治”；反之對于疾病表象不同但證候相同的“異病”現象則以相同方法治療，即“異病同證同治”?！爱惒⊥巍币嗤环N印跡模板可作用于不同疾病的同一位點，如慢性胃炎、慢性遷延性肝炎、粒細胞減少癥等疾病都表現出脾氣虧虛證，均可選用健脾益氣法進行治療^[33]?！巴‘愔巍币嘟Y構不同的物質通過相同印跡模板作用于同一疾病，如感冒一般分為2個證型，即風熱犯衛(wèi)和風寒束表，前者用辛涼解表法，后者用辛溫解表法。

“證-方”關系對應“鎖（經絡臟腑通道結構）-匙”（中藥有效成分群）關系，指印跡模板對應關系，而非藥物分子結構對應關系^[34]。因此，同一藥物結構對于不同病證可體現不同的印跡模板作用特性，可以選擇性地與之具有相同（似）的印跡模板空穴通道產生作用，用于治療不同病證，如《傷寒論》中心腎陽虛欲脫證、腎陰陽俱虛證、陽虛寒厥證、肝寒血虛證、下利諸證均可用四逆湯治療，這體現了一方多證；同時，不同結構藥物分子可以體現相同（似）印跡模板的特征，可以用來治療同一病證，再如《婦科臨床方劑學》中生地黃散、兩地湯、加味純陰湯、地骨皮飲、腹痛丸5個處方，都用于治療陰虛血熱證，體現了一證多方。

故從中醫(yī)的“同病異治”與“異病同治”規(guī)律到用藥“一證多方”與“一方多證”關聯是建立在動態(tài)變化了的印跡模板作用基礎之上，即中藥與人體病證生物標志物（網絡靶點）相對穩(wěn)定，而對藥物結構相對動態(tài)，實際上是變化了的藥物有效成分群卻遵循不變的印跡模板匹配規(guī)律。不同復方的分子印跡模板可以相同（似），用來治療同一病證，即“一證多方”；同時，同一種復方可以體現出不同印跡模板的特征，用于治療不同病證，即“一方多證”。因此，超分子印跡模板理論可為從宏觀狀態(tài)函數和微觀物質基礎相對應、動態(tài)與靜態(tài)相結合揭示方證關聯的中藥配伍本質內涵奠定基礎。

4  中藥復方配伍研究思路及方法

4.1  超分子“印跡模板”理論可科學詮釋中藥配伍

中藥配伍以中醫(yī)基礎理論為指導，相輔相成或相制相成，整體綜合發(fā)揮作用。根據配伍后的效果可分為4種情況：減毒增效、減毒減效、增毒減效、增毒增效。中藥復方盡管也有物質基礎、作用機制、量-時-效（毒）關系的定性定量研究，但僅從單個或幾個指標成分、靶點入手，無法全面評價配伍前后印跡模板特征，與中醫(yī)理論的整體觀、系統(tǒng)觀相悖。中藥成分不僅受到中藥材基原、產地、采收季節(jié)、入藥部位、加工炮制方法、煎煮辦法等隨域隨種隨株變化，還受到配伍影響。無論配伍前后藥材中成分的量和種類如何變化，只要藥（毒）效成分靶點（印跡模板）不變，中藥毒與效的綜合作用就不變。因此，只能將中藥多成分群抽象成一個“分子社會”，先宏觀分析其超分子結構特征，再微觀剖析其微觀物質基礎及作用機制。將作為單成分印跡模板屬性特例引入到現代中醫(yī)藥理論體系之中，既體現單分子印跡模板特征化學屬性，又體現多分子的超分子印跡模板疊加的表觀化學屬性，形成以結合中藥化學、網絡藥理學、網絡動力學、定量中藥藥理學、超分子化學等方法先進行物質基礎、作用機制、成分與靶點關聯分析、超分子結構特征的定性表征與確認，再結合中藥定量譜學、計算信息學及數學優(yōu)化算法等現代多學科對復方成分展開吸收、分布、代謝、排泄定量研究，獲得以印跡模板表征的組分配伍新藥處方的研究思路。

4.2  中藥客體“印跡模板”特征研究可解決宏觀與微觀沒有統(tǒng)一的問題

（1）對主、客體進行提取分離得到有效組分，采用HPLC-Q-TOF-MS、HPLC-MS等傳統(tǒng)中藥化學方法對微觀物質基礎進行系統(tǒng)解析；（2）計算成分結構拓撲指數并對其進行統(tǒng)計分析，用總體平均拓撲指數預測藥材配伍前后宏觀印跡模板特征，并通過藥效實驗驗證和確認其理化性質、生物活性，建立分子拓撲指數-印跡模板-臨床療效的關系，實現宏觀與微觀的統(tǒng)一。分子拓撲指數是由Kier和Hall等人根據拓撲理論，在分子圖頂點度和價概念的基礎上發(fā)展起來的一種新的分子拓撲方法。本課題組前期研究^[35-36]表明具有相同（近）分子拓撲指數的藥物往往具有相同（似）的理化和生物學性質，最終將此理論運用到金（山）銀花之爭。

4.3  超分子“印跡模板”特征及其自主作用規(guī)律研究可解決“多分析少綜合”的問題

包括量子化學法、波譜法、吸附熱測定法、色譜法、測定表觀相對分子質量、電鏡掃描法等方法^[5]，通過測定不同超分子的吸附熱、結構信息、分子間作用等參數探討超分子形成的可能性及穩(wěn)定性。首先測定單個成分的印跡模板特征，再測定中藥復方整體效（毒）印跡模板特征，比較兩者間異同，探究中藥復方減毒增效的作用機制，反過來又能實現中藥替代化學藥治療疾病的目標。

4.4  方-證關聯的超分子作用機制研究可定性定量描述成分與靶點間的作用關系

（1）運用網絡藥理學對中藥成分與靶點拓撲網絡進行關聯，采用理論計算化學和統(tǒng)計學方法對化合物結構與活性間的定量構效關系（quantitative structure-activityrelationship）進行化學對接^[37]，結合印跡模板特征及大型文獻庫的數據，以無尺度、相似度、貝葉斯概率、空間與時間等參數形式關聯成拓撲網絡；（2）再經拓撲網絡特征計算，分析網絡節(jié)點間團聚、子群、中心性測度等參數，進行靶點拓撲網絡分析；（3）采用網絡動力學等方法，建立成分群與靶點間的作用平衡常數以表征印跡模板和量-時-效關系，達到以實驗驗證拓撲網絡、闡明拓撲網絡特征、鎖定成分與靶點定性定量作用關系的目標。

4.5  中藥配伍安全性、有效性的定量研究可形成體內量-時-效（毒）的定時研究方法

（1）在單成分的藥動學數學模型基礎上，運用藥物濃度累加法、單成分藥動學解析式的疊加、泰勒展開成級數后疊加、總量統(tǒng)計矩疊加、最優(yōu)化模型和方法進行譜動（毒）學研究，獲得量-時關系；（2）在單成分的Hill量-效（毒）關系基礎上進行非線性疊加，先建立多成分與單個靶點的Hill量效關系，然后采用主成分分析法對藥物成分、靶點數目降維處理，最終對中藥指紋圖譜的“譜”信息與機體的“效”作用之間量-效（毒）代謝關系進行譜效（毒）學研究；（3）在單成分藥（毒）效動力學研究基礎上，采用Michaelis-Menten動力學原理關聯譜動（毒）學、譜效（毒）學，采用多目標非線性擬合獲得參數，據此可確定各成分體內量-時-效（毒）曲線與“治療窗”內外圍成的面積，就能定量分析中藥各成分群的毒與效整合作用的強度與程度，再結合總量統(tǒng)計矩和誤差傳遞關系求得各譜動學參數，能對多成分量-時-效（毒）關系進行藥效（毒）動力學研究。

4.6  中藥配伍毒與效的定量整合策略

（1）確定“治療窗”，結合該劑量下各成分的藥物動力學曲線，分析其在“治療窗”的分布規(guī)律，即毒與效成分的整合分布規(guī)律，并與單成分的治療指數比較，能定量表征中藥配伍后毒與效整合規(guī)律；（2）再結合各成分印跡模板與效（毒）濃度的關系研究，采用總量統(tǒng)計矩方法分析各成分相互受控影響規(guī)律，特別是藥（效）毒、增效（毒）成分印跡模板影響規(guī)律，探討“單獨毒性成分與方中毒性成分”整合受控規(guī)律^[38]。

4.7  通過數學優(yōu)化算法、軟件研究，構建中藥配伍數據庫

結合數學算法用軟件計算各味藥材分子結構拓撲指數，建立中藥復方拓撲指數數據庫，在此基礎上建立客體成分總體拓撲指數平均值（印跡模板）與中藥復方臨床療效、藥理活性之間的數學關系式，能以分子拓撲指數反推藥材藥效，并最終實現以數學定量表征中藥各成分、靶點的目標。

5  結語

本文以中藥與人體間超分子“印跡模板”自主作用為核心，從體外與體內、多成分與多靶點、宏觀與微觀、動態(tài)與靜態(tài)等全方位相結合定性定量揭示中藥復方配伍規(guī)律，從而實現作用物質基本清晰、表征科學、與證作用靶點明確、量-時-效（毒）關系清楚的中藥復方配伍理論的解析目標。再結合中藥復方配伍現代化研究的7條關鍵核心策略，為最終搭建起中藥復方配伍理論研究和組分配伍創(chuàng)制現代中藥技術規(guī)范的研究平臺奠定基礎。

參考文獻（略） 

來  源：李海英，賀  鵬，賀玉婷，樊啟猛，肖美鳳，劉潤南，鄧凱文，潘  雪，賀福元. 中藥復方配伍研究的關鍵問題及超分子化學解決對策 [J]. 中草藥, 2019, 50(12):2757-2762.