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      患者反復發(fā)熱、心包積液---心內膜炎:長奈瑟氏菌

       洞天禪悟 2019-07-14

      前言

      感染性心內膜炎的主要致病菌是草綠色鏈球菌,其次是金黃色葡萄球菌,同時有少量的肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌等,病原學的診斷對于感染性心內膜炎的診療尤其重要,本例中患者血培養(yǎng)結果為長奈瑟氏球菌,究竟是污染菌還是致病菌呢?

      臨床病史資料

      患者:男性,36歲,因「反復發(fā)熱50天,咳嗽、咯痰1周」于2019年3月27日入住華西醫(yī)院感染科。

      患者于50天前受涼后出現(xiàn)發(fā)熱,體溫未測,伴畏寒、寒戰(zhàn),口服藥物后好轉(具體不祥),但癥狀間斷反復,最高體溫39℃,無頭昏、頭痛、咽痛、咳嗽、心累、氣促、尿頻、尿痛等,曾使用「小柴胡、頭孢」等治療,但癥狀仍反復且發(fā)熱無明顯規(guī)律,1周前出現(xiàn)咳嗽、咯痰,白色泡沫痰,于外院住院治療1天,具體檢查結果及用藥不詳,為進一步診療,門診以「發(fā)熱待診」收入感染科。

      患病以來,體重下降約3kg。既往史:一般情況良好,否認肝炎、結核及其他傳染病史,否認手術史。

      入院查體 

      T:36.4℃,P102次/分布,R20次/分,BP80/56mmHg。神志清楚,急性病容,心界不大,心律齊,二尖瓣區(qū)可聞及雜音,雙肺未聞及雜音。

      輔助檢查 

      本院2019-2-28 甲乙型流感抗原檢測陰性,免疫全套、ANCA、TORCH試驗IgM抗體、CMV-DNA、EB-DNA陰性。外院2019-3-26胸部CT:1.右肺上葉前段小結節(jié),考慮炎性結節(jié)。2.雙肺下葉少許慢性炎性灶。3.心包中量積液。

      2019-3-27心臟彩超:二尖瓣前葉稍強回聲團,考慮贅生物(請結合臨床,建議治療后復查),左房增大,左室收縮功能測值正常,舒張功能正常,心包積液(少量)。

      初步診斷:發(fā)熱待查:感染性心內膜炎可能性大。

      入院后治療情況 

      入院后患者最高體溫40℃,先后給予左氧氟沙星,哌拉西林他唑巴坦,頭孢曲松聯(lián)合萬古霉素聯(lián)合抗感染,奧司他韋抗病毒治療。經治療后,患者發(fā)熱癥狀明顯好轉,于4.7日轉入心臟行主動脈瓣及二尖瓣機械置換術+心臟表面臨時起搏導線安置術,術后繼續(xù)抗感染治療。

      輔助檢查 

      2019-3-30心臟彩超:心瓣膜病,二尖瓣脫垂、穿孔繼發(fā)反流(中度),左室收縮功能測值正常,心包積液少量。增強CT:雙肺感染,心包積液,雙側胸腔少量積液。

      實驗室檢查 

      呼吸道13項病毒檢測:乙型流感病毒陽性,生化白蛋白21.5g/L,HIV抗原抗體復合檢測、丙肝抗體、梅毒螺旋體抗體、乙肝表面抗原、G試驗、GM試驗、TB-IGRA陰性。

      白細胞數(shù)(參考范圍3.5-9.5×10^9/L)、中性粒細胞數(shù)(參考范圍1.8-6.3×10^9/L)、C-反應蛋白(參考范圍<5mg/L)、PCT(參考范圍<0.046ng/mL)、白介素(參考范圍0~7pg/mL)變化趨勢如下圖:

      【圖一】白細胞和中性粒細胞數(shù)變化

      【圖二】CRP和白介素-6變化

      【圖三】PCT變化

      細菌學檢驗 

      2019-3-27行血培養(yǎng),于18:42和23:40分別各采集 2 套外周血送培養(yǎng),共4套血培養(yǎng)送檢,4套血培養(yǎng)的需氧瓶分別于放入培養(yǎng)箱后22小時32分、1天9小時25分、19小時38分、20小時8分報陽,厭氧瓶均陰性,涂片染色可見革蘭陰性球桿菌,轉種血平板,35℃,5%CO2培養(yǎng),24h后血平板上可見1~2mm、淡黃色、圓形、半透明、光滑、反光、邊緣整齊、黏稠小菌落,經培養(yǎng)質譜鑒定后為長奈瑟氏球菌屬某些種,分值1.915,氧化酶 陽性,觸酶陰性,按一般陰性桿菌上VITEK2-Compact GN卡鑒定為殺蛙氣單胞菌,鑒定可信度95%。經16S rRNA 序列分析法測定為長奈瑟氏球菌硝酸鹽還原亞種(Neisseria elongate subsp.nitroreducens strain),測序結果如下:GGTTAGGTAGTCGTATAGCGTGATCCTGGGTCAGGAGGGCGTAACAAGGTAGCCCGTAATGCCGTGAGAGTGGCGAACGGGTGAGTAATATATTGGAACGTACCGGGTAATGGGGGATAACCAATCGAAAGATTGGCTAATACCGCATACGCTCTGAGGAGGAAAGCAGGGGACCTTCGGGCCTTGCGTTATTCGAGCGGCCAATATCTGATTAGCTAGTTGGTGGGGTAAAGGCCTACCAAGGCGACGATCAGTAGCGGGTCTGAGAGGATGATCCGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATTTTGGACAATGGGCGCAAGCCTGATCCAGCCATGCCGCGTGTCTGAAGAAGGCCTTCGGGTTGTAAAGGACTTTTGTTAGGGAAGAAAAAGGAGCGGTTAATACCCGTTTCTGTTGACGGTACCTAAAGAATAAGCACCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGTGCGAGCGTTAATCGGAATTACTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGACGGTTACTTAAGCAGGATGTGAAATCCCCGGGCTCAACCTGGGAACTGCGTTCTGAACTGGGTAGCTAGAGTATGTCAGAGGGGGGTAGAATTCCACGTGTAGCAGTGAAATGCGTAGAGATGTGGAGGAATACCGATGGCGAAGGCAGCCCCCTGGGATAATACTGACGTTCATGCTCGAAAGCGTGGGTAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCCTAAACGATGTCGATTAGCTGTTGGGCAGCTTGACTGCTTTAGTAGCGTAGCTAACGCGTGAAATCGACCGCCTGGGGAGTACGGGTCGCAAGATTAAAAACTCAAAGGAAATTT。藥敏結果采用K-B法,參照腦膜炎奈瑟球菌判斷標準,對美羅培蘭、復方新諾明、頭孢曲松、氯霉素敏感。2019-3-29送檢的2套血培養(yǎng)均未報陽。痰培養(yǎng)(標本不合格)、痰真菌培養(yǎng)、痰查抗酸桿菌未見異常。

      【圖四】血培養(yǎng)直接涂片鏡下×1000

      【圖五】血平板菌落形態(tài)

      【圖六】純培養(yǎng)革蘭染色×1000

      討論:目前一般醫(yī)院單套送檢,可能會被當做污染菌處理,嚴重影響診療

      感染性心內膜炎是由病原菌感染心臟內膜表面引起的,血培養(yǎng)陽性是確診感染性心內膜炎的重要依據(jù),能為臨床用藥提供依據(jù)。

      文獻表明,細菌性心內膜炎主要致病菌是草綠色鏈球菌,其次是金黃色葡萄球菌,同時有少量的肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌,除此之外,一些少見的細菌,包括HACEK群細菌、沙門菌、纖毛菌屬、真菌等都可以引起感染性心內膜炎,較多的感染性心內膜炎有先天性心臟病、風濕性心臟病等心臟基礎疾病或心臟介入等病史。

      本病例中,患者病程長,心臟超聲提示心臟贅生物,考慮感染性心內膜炎,經血培養(yǎng)后確診,但該病例培養(yǎng)細菌為長奈瑟氏球菌,四瓶血培養(yǎng)均為此菌,可除外污染,長奈瑟菌所致感染的病例國內報道甚少,目前國內只有兩例,未有該菌引起其他疾病的報道。國外作為個案報告也較少。

      感染性心內膜炎血培養(yǎng)送檢要求,對于懷疑感染性心內膜炎的患者,應在發(fā)病12~24h內從不同的靜脈抽取3套血培養(yǎng),每套至少間隔1h。24h內仍報告陰性者,或者治療期間患者發(fā)熱或沒有好轉還應再采集2套血培養(yǎng),全部培養(yǎng)一共5套。

      長奈瑟氏球菌(Neisseria elongata)屬于奈瑟菌屬,從人體分離的大多數(shù)奈瑟菌被認為是健康者口咽部和鼻咽部黏膜共生定居的細菌,長奈瑟氏球菌同樣也是口咽部的正常菌群。但在少數(shù)情況下可引起敗血癥、骨髓炎和感染性心內膜炎。1969年Bovre和Holten1首次對該菌進行了描述,直到1983年Simor和Salit才報道了該菌的潛在致病性,主要見于牙科手術后及介入性心血管操作后。

      長奈瑟氏球菌有三種亞型,分別為硝酸鹽還原亞種,長亞種、解糖亞種,硝酸鹽還原亞種為主要的致病亞種。該菌為專性需氧菌,在巧克力平板上為灰棕色,光滑,半透明,直徑1~2mm,干燥,像黏土一樣黏稠。

      奈瑟氏球菌種大多革蘭染色為革蘭染色雙球菌,氧化酶陽性,觸酶陽性,而長奈瑟氏球菌為革蘭陰性球桿菌,氧化酶陽性,觸酶弱陽性或陰性,易與金氏桿菌相混淆,該菌氧化酶陽性,觸媒陰性,文獻資料顯示可通過生化反應鑒別,金氏桿菌分解葡萄糖產酸,硝酸鹽產氣(+),而長奈瑟菌不分解葡萄糖產酸(解糖亞種除外),硝酸鹽產氣(-)。我國之前報告的兩例分離菌株按一般的革蘭陰性桿菌在 VITEK-2Compac用GN鑒定卡,結果錯誤鑒定為解脲寡源桿菌(鑒定可信度 97%)和殺蛙氣單胞菌(鑒定可信度 98%);其中一例用苛養(yǎng)菌鑒定卡鑒定為為長奈瑟菌(鑒定可信度97%),一例用Bruker MS質譜鑒定為長奈瑟菌(分值1.901),最終兩例用16 SrRNA分子生物學方法測序結果為長奈瑟菌。

      在該案例中,長奈瑟氏球菌雖然為人體口咽部的正常菌群,但是在口咽部以外的地方尤其是血液中分離到此菌,應該引起檢驗人員的重視,血培養(yǎng)規(guī)范的送檢至關重要,患者一天內共送檢4套血培養(yǎng),需氧培養(yǎng)均為該菌,可除外污染,但目前一般醫(yī)院單套送檢,有可能會被當做污染菌處理,嚴重影響患者的診療。此外,該菌的鑒定比較困難,較多的醫(yī)院沒有時間飛行質譜,如果采用梅里埃的GN卡,可能會出錯。再次,檢驗科微生物室與臨床的溝通也很重要,當一些特殊的感染培養(yǎng)出少見的該部位致病菌時或者血培養(yǎng)中出現(xiàn)某些部位的正常菌群時,更應加與強臨床的溝通。

      參考文獻 (可上下滑動瀏覽)

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      作者:龍小平、戴仲秋、謝軼 - 四川大學華西醫(yī)院;審閱:劉穎梅 - 中日友好醫(yī)院、王占偉 - 北京大學人民醫(yī)院

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