相信很多小菜鳥在初遇Q—PCR時(shí),就聽說(shuō)這是個(gè)實(shí)驗(yàn)黑洞,大部分實(shí)驗(yàn)菜鳥都會(huì)深陷其中,無(wú)法自拔。但是當(dāng)小菜鳥在Q—PCR這個(gè)坑里跌爬滾打后,一定會(huì)積累不少經(jīng)驗(yàn)。 今天小科鼠就跟大家分享下做Q—PCR的干貨視頻教程吧。 實(shí)驗(yàn)方法原理 利用熒光信號(hào)的變化實(shí)時(shí)檢測(cè)PCR擴(kuò)增反應(yīng)中每一個(gè)循環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物量的變化,通過(guò)Ct值和標(biāo)準(zhǔn)曲線的關(guān)系對(duì)起始模板進(jìn)行定量分析。 閾值:是循環(huán)開始3~15個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍,設(shè)定在擴(kuò)增曲線指數(shù)增長(zhǎng)期。
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