磁珠法提取的優(yōu)點

1.生物磁珠具有小尺寸效應(yīng)和表面效應(yīng)，能夠用高效DNA提取，滿足微量生物樣本DNA提取的要求。

   2.磁珠表面能夠進(jìn)行化學(xué)修飾，從而與DNA進(jìn)行特異性吸附，去除樣品DNA溶液中的抑制物質(zhì)，如：有機(jī)溶劑、去污劑、金屬離子、燃料等。

   3.生物磁珠表面功能團(tuán)數(shù)量可以控制獲得可提取DNA溶液的濃度信息，實現(xiàn)定量的要求。

   4.生物磁珠可以通過特殊的合成工藝使其具有超順磁特性，因此，能夠通過儀器進(jìn)行自動化操作，滿足數(shù)據(jù)庫建設(shè)對大批量樣本提取的需要，減少人為因素。

   5.用時少，操作簡單，是用于大多數(shù)生物檢材。

   6.低廉，便于廣泛應(yīng)用。由于納米生物磁珠合成采用的都是低價無機(jī)和有機(jī)原料。無須特殊的儀器設(shè)備，使得最終的合成和研發(fā)成本都很便宜，適合于我國的基本國情和經(jīng)濟(jì)現(xiàn)狀。

   7.適應(yīng)了建立DNA數(shù)據(jù)庫所需的大量生物樣本的提取，為我國DNA數(shù)據(jù)庫的建設(shè)鋪平了道路，打下了基礎(chǔ)。

與傳統(tǒng)提取DNA法相比速度更快！純度更高！一般情況下不需離心操作，單一樣品多應(yīng)在1h內(nèi)提取完畢。對全血、骨骼、植物等提取DNA在不pcr擴(kuò)增的情況下能在凝膠電泳中看到較為明亮的條帶。

特點

◎BIOG Tissue DNA Mag-B Kit操作簡便快速，可在30分鐘內(nèi)獲得理想的DNA，適用于一次處理較多樣本的批量提取；

◎提取DNA純度高，無抑制劑，A260/A280為1.7-1.9；

◎采用自主研發(fā)的改性硅基磁珠，同樣的樣本量提取的DNA更多。

實驗步驟

請自行準(zhǔn)備：無水乙醇、異丙醇、1.5mL離心管，生理鹽水。

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取出洗滌液，按70%比例加入無水乙醇，如6mL加入14 mL無水乙醇，12mL加入28 mL無水乙醇，混勻。

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取10-20mg左右的組織，用液氮研磨為粉末，轉(zhuǎn)入1.5mL 離心管內(nèi)，加入100 μL 生理鹽水，振蕩15秒 （或直接在100 μL 生理鹽水中將組織勻漿為細(xì)胞懸液），加入200 μL 裂解液， 20 μL 復(fù)合消化液，充分混勻，56℃溫育12分鐘（如組織勻漿不充分，可適當(dāng)延長消化時間至組織完全消化）。                                          

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冷卻到室溫，加入300μL異丙醇，充分混勻，再加入20μL磁珠復(fù)合液（每次使用前須充分混勻），振蕩混勻3min（注意不要顛倒混勻，以防磁珠粘附于管蓋內(nèi)壁），靜置2min。

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將離心管置于磁力架上放置約20s至磁珠完全吸附，開蓋，徹底吸棄上清液（注意槍頭不要接觸磁珠）。

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加入800μL配制后的洗滌液，將離心管從磁力架上取下，充分振蕩2min，確保磁珠完全分散。將離心管置于磁力架上放置約20s至磁珠完全吸附，開蓋，徹底吸棄上清液（注意槍頭不要接觸磁珠）。

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將離心管從磁力架上取下，開蓋，干燥約3-5min，至無明顯乙醇?xì)馕丁?/span>

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加入50-100 μL洗脫液，振蕩至磁珠充分散開，室溫靜置2min，再振蕩混勻1min。

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將離心管置于磁力架上，待磁珠完全吸附后，小心吸取上清液至一新的1.5mL離心管中，提取的核酸可直接用于下游實驗，或-20℃保存?zhèn)溆?/span>