“基因工程的基本操作程序”測(cè)試題

一、選擇題

1. 基因工程技術(shù)也稱DNA重組技術(shù)，其實(shí)施必須具備的4個(gè)必要條件是（　 ）

A. 目的基因、限制酶、載體、受體細(xì)胞  

B. 工具酶、目的基因、載體、受體細(xì)胞

C. 模板DNA、mRNA、質(zhì)粒、受體細(xì)胞    

D. 重組DNA、RNA聚合酶、限制酶、DNA連接酶

2. 以下有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（　 ）

A. 利用PCR技術(shù)可以大量擴(kuò)增目的基因

B. 目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞最常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法

C. 用同一種限制酶分別切割載體和目的基因的目的是能夠產(chǎn)生不同的黏性末端

D. 利用載體上標(biāo)記基因的相關(guān)特性就可檢測(cè)出目的基因已導(dǎo)入受體細(xì)胞并成功表達(dá)

3. 如圖表示培育轉(zhuǎn)基因抗植物病毒番茄的過(guò)程示意圖。下列敘述正確的是（　 ）

A. 過(guò)程A需要限制酶和DNA聚合酶的參與

B. 過(guò)程B通常需要用CaCl₂處理，以提高番茄細(xì)胞壁的通透性

C. 抗植物病毒基因一旦整合到番茄細(xì)胞的染色體上，就能正常表達(dá)

D. 轉(zhuǎn)基因抗植物病毒番茄是否培育成功可通過(guò)抗病毒接種實(shí)驗(yàn)進(jìn)行鑒定

4. 水母發(fā)光蛋白由236個(gè)氨基酸構(gòu)成，其中由三種氨基酸構(gòu)成發(fā)光環(huán)，現(xiàn)已將這種蛋白質(zhì)的基因作為生物轉(zhuǎn)基因的標(biāo)記。在轉(zhuǎn)基因技術(shù)中，這種蛋白質(zhì)的作用是（　）

A. 促使目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞中    

B. 促使目的基因在受體細(xì)胞中復(fù)制

C. 促使目的基因容易被檢測(cè)出來(lái)    

D. 檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)

5. 圖甲、乙中的箭頭表示三種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)，amp^r表示氨芐青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性基因。下列敘述正確的是（　 ）

A. 圖甲中的質(zhì)粒用BamHⅠ切割后，含有4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)

B. 在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，可用PstⅠ和BamHⅠ切割質(zhì)粒和外源DNA

C. 用PstⅠ和HindⅢ切割，可以保證重組DNA序列的唯一性

D. 導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌可在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)

6. PCR技術(shù)又稱聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，現(xiàn)在已成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的一種常規(guī)手段，它可以在體外很短的時(shí)間內(nèi)將DNA大量擴(kuò)增。你認(rèn)為下列符合在體外進(jìn)行PCR反應(yīng)條件的一組是（　 ）

①穩(wěn)定的緩沖液環(huán)境；②DNA模板；③合成引物；④四種脫氧核苷酸；⑤DNA聚合酶；⑥D(zhuǎn)NA解旋酶；⑦限制性核酸內(nèi)切酶；⑧溫控設(shè)備

A. ①②③④⑤⑥　 

B. ①②③④⑤⑥⑦⑧   

C. ③④⑤⑥⑧　 

D. ①②③④⑤⑧

二、非選擇題

7.真核生物基因中通常有內(nèi)含子，而原核生物基因中沒(méi)有，原核生物沒(méi)有真核生物所具有的切除內(nèi)含子對(duì)應(yīng)的RNA序列的機(jī)制。已知在人體中基因A（有內(nèi)含子）可以表達(dá)出某種特定蛋白（簡(jiǎn)稱蛋白A）?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）某同學(xué)從人的基因組文庫(kù)中獲得了基因A，以大腸桿菌作為受體細(xì)胞卻未得到蛋白A，其原因是___________________________________。

（2）若用家蠶作為表達(dá)基因A的受體，在噬菌體和昆蟲病毒兩種載體中，不選用_________作為載體，其原因是__________________________。

（3）若要高效地獲得蛋白A，可選用大腸桿菌作為受體。因?yàn)榕c家蠶相比，大腸桿菌具有________________（答出兩點(diǎn)即可）等優(yōu)點(diǎn)。

（4）若要檢測(cè)基因A是否翻譯出蛋白A，可用的檢測(cè)物質(zhì)是________________（填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗體”）。

（5）艾弗里等人的肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)為證明DNA是遺傳物質(zhì)做出了重要貢獻(xiàn)，也可以說(shuō)是基因工程的先導(dǎo)。如果說(shuō)他們的工作為基因工程理論的建立提供了啟示，那么，這一啟示是________________________________。

8.科學(xué)家通過(guò)基因工程，成功培育出能抗棉鈴蟲的棉花植株——抗蟲棉，其過(guò)程大致如圖。

（1）基因工程的核心是__________________。

（2）上述過(guò)程中，將目的基因?qū)朊藁?xì)胞內(nèi)使用了____________法，先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的__________中，然后用該農(nóng)桿菌感染植株細(xì)胞，通過(guò)DNA重組將目的基因插入植株細(xì)胞的__________上。

（3）目的基因在棉株體內(nèi)能否成功轉(zhuǎn)錄，分子水平上可采用________方法檢測(cè)。

（4）如果把該基因?qū)肴~綠體DNA中，將來(lái)產(chǎn)生的卵細(xì)胞中________（填“一定”或“不一定”）含有抗蟲基因。

9．人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫(yī)用價(jià)值，只能從人血漿中制備。圖一是以基因工程技術(shù)獲取重組HSA的兩條途徑，其中報(bào)告基因表達(dá)的產(chǎn)物能催化無(wú)色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。圖二為相關(guān)限制酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)，以及HAS基因兩側(cè)的核苷酸序列。據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）依據(jù)圖一和圖二分析，在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)下列敘述錯(cuò)誤的是（_____）

A．應(yīng)該使用酶B和酶C獲取HSA基因

B．應(yīng)該使用酶A和酶B切割Ti質(zhì)粒

C．成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒含1個(gè)酶A的識(shí)別位點(diǎn)

D．成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒用酶C處理將得到2個(gè)DNA片段

（2）PCR技術(shù)應(yīng)用的原理是____________，在利用該技術(shù)獲取目的基因的過(guò)程中，以從生物材料中提取的DNA作為模板，利用____________尋找HSA基因的位置并進(jìn)行擴(kuò)增。

（3）圖一過(guò)程①中需將植物細(xì)胞與___________混合后共同培養(yǎng)，旨在讓___________整合到植物細(xì)胞染色體DNA上；除盡農(nóng)桿菌后，還須轉(zhuǎn)接到含____________的培養(yǎng)基上篩選出轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞。

（4）圖一③過(guò)程中將目的基因?qū)刖d羊受體細(xì)胞，采用最多，也是最為有效的方法是______________。

（5）為檢測(cè)HSA基因的表達(dá)情況，可提取受體細(xì)胞的 __________________，用抗血清白蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。