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      魯米諾化學發(fā)光體系的應用

       湖北新德晟 2020-05-25

      魯米諾(5-氨基-2,3-二氫-1,4-二雜氮萘二酮,也稱3-氨基鄰苯二甲酰肼)俗名發(fā)光氨luminol,因其結構簡單、易合成、水溶性好,以及發(fā)光量子效率高等特點,常溫下是一種黃色晶體或者米黃色粉末,是一種比較穩(wěn)定的化學試劑,化學式C8H7N3O2 。魯米諾是最常用的液相化學發(fā)光試劑之一。自從1928年albrecht首次報道了魯米諾與氧化劑在堿性溶液中的化學發(fā)光反應以來,人們對該化學發(fā)光體系的研究就一直十分活躍,使得該化學發(fā)光體系被應用于許多領域之中。通常用于酶促化學發(fā)光實驗以及刑偵上的微量血跡檢測。由于其結構簡單、易合成、發(fā)光量子效率高的特點,現(xiàn)也被用于蛋白質(zhì)印跡試驗western blot中。

      魯米諾化學發(fā)光體系的分析應用主要基于以下幾個方面。

      一、魯米諾-過氧化氫化學發(fā)光體系應用最為廣泛。許多過渡金屬離子對魯米諾-過氧化氫化學發(fā)光反應具有很好的催化作用。李正平等發(fā)現(xiàn)鐵蛋白催化,產(chǎn)生很強的化學發(fā)光信號,建立簡便靈敏的檢測鐵蛋白的化學發(fā)光方法。方法的線性范圍為0.5~10μg/l,檢出限為0.36μg/l,為鐵蛋白作為納米粒子標記物及直接檢測提供一種新的途徑。戴路等報道了一種新的測定雌性激素的流動注射化學發(fā)光方法。在堿性條件下,金銀復合納米粒子能顯著地增強魯米諾-過氧化氫化學發(fā)光,而雌性激素能明顯地抑制該體系的化學發(fā)光強度,建立了測定天然雌激素(雌酮、雌二醇和雌三醇)的化學發(fā)光方法。該方法已用于孕婦尿樣中雌激素總量的測定。劉振波等基于人的血清白蛋白對魯米諾-過氧化氫-葉綠素銅鈉化學發(fā)光體系的抑制作用,采用流動注射技術建立了一種簡單、快速、可連續(xù)測定人的血清白蛋白的新方法。

      二、魯米諾-高碘酸鉀化學發(fā)光體系。王瑞琪等發(fā)現(xiàn)在堿性介質(zhì)中,鑭(iii)對魯米諾-高碘酸鉀體系的化學發(fā)光反應有顯著的增敏作用。據(jù)此,建立了測定鑭(iii)的反相流動注射化學發(fā)光新方法,并將此法用于合成樣品的測定。屈穎娟等基于蒽醌類藥物在堿性條件下對高碘酸鉀-魯米諾體系的化學發(fā)光信號有強烈的抑制作用這一現(xiàn)象,結合流動注射技術建立了一種直接測定蒽醌類藥物的流動注射化學發(fā)光分析新方法。馬明陽發(fā)現(xiàn),當向已充分反應的高碘酸鉀與魯米諾混合溶液中注入異煙肼時,又可以產(chǎn)生一個新的化學發(fā)光反應并檢測到較強的化學發(fā)光信號,建立測定異煙肼的流動注射后化學發(fā)光分析法。

      三、魯米諾-高錳酸鉀化學發(fā)光體系。高錳酸鉀是化學發(fā)光反應中常用的強氧化劑。fernando等基于在堿性介質(zhì)中,n-甲基氨基甲酸酯類農(nóng)藥,西維因、克百威和滅蟲威對luminol-kmno化學發(fā)光體系有增強作用,結合反相高效液相色譜法分離并同時測定了三種農(nóng)藥在水樣和蔬菜中的殘留量。沈祥根據(jù)次黃嘌呤對高錳酸鉀-魯米諾-so體系化學發(fā)光具有增敏作用,建立了so的化學發(fā)光方法。余宇燕等發(fā)現(xiàn)在堿性條件下茶多酚對魯米諾-kmno化學發(fā)光體系具有較強的抑制作用,據(jù)此建立了茶多酚的流動注射化學發(fā)光測定法。easwaramoorthy等利用在ph=12.0磷酸介質(zhì)中,kmno可以氧化魯米諾產(chǎn)生穩(wěn)定的發(fā)光,撲熱息痛的加入會抑制發(fā)光,建立了撲熱息痛的流動注射化學發(fā)光法,并用于片劑中撲熱息痛的測定。呂九如等人發(fā)現(xiàn),當把堿土金屬離子注入已充分反應的魯米諾和高錳酸鉀混合溶液中時,又發(fā)生了新的化學發(fā)光反應。牛衛(wèi)芬等利用高錳酸鉀-魯米諾后化學發(fā)光體系,建立了測定奮乃靜的高選擇性分子印跡-后化學發(fā)光分析方法,所建方法的線性范圍為,檢出限為3×10g/l,已用于人尿液中奮乃靜含量的測定。

      四、魯米諾-鐵氰化鉀化學發(fā)光體系。陳效蘭等發(fā)現(xiàn)在堿性介質(zhì)中,鐵氰化鉀氧化魯米諾產(chǎn)生化學發(fā)光,頭孢拉定對該體系有顯著的增強作用?;诖瞬⒔Y合流動注射技術建立了測定頭孢拉定含量的化學發(fā)光新方法。該方法的線性范圍為0.16~160mg/l,檢出限為0.028mg/l。本法已用于膠囊中頭孢拉定的測定。鄧娜妮研究了鹽酸阿比朵爾在魯米諾化學發(fā)光反應體系中的后化學發(fā)光反應。據(jù)此建立了測定鹽酸阿比朵爾的流動注射后化學發(fā)光分析法。在對這一后化學發(fā)光反應的動力學性質(zhì)、化學發(fā)光光譜、紫外可見吸收光譜,以及一些相關問題研究的基礎上,提出了可能的反應機理。申婧等基于阿魏酸對魯米諾-鐵氰化鉀化學發(fā)光體系的抑制作用,建立了阿魏酸的流動注射抑制化學發(fā)光分析法,阿魏酸濃度在之間時與化學發(fā)光強度減小值呈現(xiàn)良好線性關系,檢出限為,將其應用于復方當歸注射液中阿魏酸含量的測定,結果令人滿意。

      五、魯米諾-溶解氧化學發(fā)光體系。李菁菁等人采用溶膠—凝膠法制得平均粒徑約10nmsno粒子,將該納米粒子加入到堿性魯米諾-溶解氧化學發(fā)光體系中,體系的化學發(fā)光強度明顯增強,這種增敏作用與納米sno的加入量以及體系中溶解氧的濃度有關,可用于溶解氧的測定。

      六、魯米諾的其他化學發(fā)光體系。宋正華等人發(fā)現(xiàn)肌紅蛋白能夠與魯米諾在堿性條件下反應產(chǎn)生化學發(fā)光,建立了克林霉素的化學發(fā)光法。魯米諾-nbs/ncs化學發(fā)光體系[152-158]已成功應用于藥物、食品、及環(huán)境分析中。石文兵利用魯米諾-aucl化學發(fā)光體系建立了測定氨芐西林、阿莫西林鈉、鹽酸雷尼替丁、美諾西林鈉、雙嘧達莫和鹽酸奮乃靜的流動注射化學發(fā)光新方法。瞿鵬等建立了流動注射抑制化學發(fā)光法測定頭孢曲松鈉的化學發(fā)光法。

       目前魯米諾化學發(fā)光分析法已經(jīng)在各個領域都得到了廣泛應用。由于魯米諾自身與這些氧化劑反應產(chǎn)生了較強的發(fā)光信號,方法的背景信號較高,這在一定程度上限制了方法靈敏度的進一步提高。高效液相色譜和毛細管電泳等其他分離方法的聯(lián)用必將擴大化學發(fā)光分析法的應用范圍,將會更好地促進現(xiàn)代分析化學的發(fā)展。

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