詳解兩款POCT核酸產(chǎn)品：Sense PK 優(yōu)思達

Cheximing 2021-04-24

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Sense Biodetection Limited（Sense），來自英國牛津和劍橋的分子診斷公司。他們的口號是：

2021年4月20日，Sense Biodetection宣布，已籌集了5,000萬美元的B輪融資，以支持其Veros COVID-19快速分子測試的商業(yè)化以及不斷發(fā)展的無儀器測試產(chǎn)品組合。

要素如下：

總部位于英國阿賓登
快速等溫擴增技術Veros平臺，用于POCT檢測各種疾病
Veros測試是一次性的

正在開發(fā)的新冠核酸檢測試劑如下：

Sense的Veros?SARS-CoV-2是一項簡單的一次性測試，使用鼻拭子樣本即可提供超快速的結果，而無需復雜的硬件進行溫度循環(huán)和熒光檢測。作為分子測試，其性能與金標準實驗室測試相當，并且可在10分鐘內(nèi)獲得結果。

看到這里，立馬想到了優(yōu)思達在CACLP上展示的家用POCT核酸試劑。采用交叉引物恒溫擴增CPA技術，裝置自帶電源，同時檢測新冠，甲流，乙流和人源內(nèi)標。

操作過程：

抽提液加入加樣孔
按下啟動鍵
反應30分鐘
打開加樣孔，加入清洗液，靜置5分鐘
讀結果

兩相比較：

最大的差異是：10分鐘 VS 35分鐘

不過sense 還沒上市。

原理圖如下，來自Sense的專利，切口酶恒溫擴增反應技術（NEAR）？？

最后檢測是通過碳顆粒標記的層析試紙。

以下關于NEAR來自知乎

切刻內(nèi)切酶（NEAR）恒溫擴增是目前相關研究最少的一種恒溫核酸擴增技術。它是在2008年由Ionian科技公司的研究人員開發(fā)并申請專利的（Brain等2009）。Ionian是加州的初創(chuàng)公司，成立于2000年，在2010年被Alere收購。而后Alere在2017年被雅培收購，NEAR成為雅培的專利。

NEAR是一種鏈置換放大技術，其原理是在核酸切刻內(nèi)切酶切刻形成的裂口處，通過聚合酶的作用以dNTPs為原料從裂口處的3’端聚合延伸，置換出等位的DNA鏈，由此又形成了新的完整的含有切刻酶識別位點的DNA序列。這條雙鏈再次被核酸切刻內(nèi)切酶識別切割，進而開始“聚合-切刻”的循環(huán)，產(chǎn)生大量被置換下來的DNA單鏈，形成指數(shù)級擴增。

NEAR的優(yōu)點：

①速度快（最快5分鐘可以得到陽性結果）；

②靈敏度高（初始只需要數(shù)百個病毒拷貝）；

③區(qū)別于引物設計較復雜的LAMP技術，NEAR技術反應形式多樣，可滿足不同的擴增需求；

④反應穩(wěn)定性好

NEAR的缺點：

①短序列的設計存在高假陽性的可能；

②儀器的通量很小，一次只能檢測一個樣本；

③反應機制復雜、產(chǎn)物產(chǎn)量易受擴增模板限制，使得后期擴增從指數(shù)增長變?yōu)榫€性增長；

④檢測的重復性略低于qPCR；

⑤NEAR恒溫擴增技術的特異性與靈敏度依賴于分子信標引物和Nicking酶，分子信標引物的設計難度大，Nicking酶與其他恒溫擴增酶一般都普遍比傳統(tǒng)的實時熒光PCR酶要貴，故在檢測成本和應用范圍等方面，NEAR恒溫擴增技術遜于qPCR。

被雅培收購的Alere是唯一一家使用NEAR技術開發(fā)人類疾病診斷試劑盒及儀器的公司。Alere的Influenza A和B的檢測試劑盒最快5min檢出陽性，7min陽性檢出率95%，13min可以確定陰性。另一個關于StrepA的檢測試劑盒最快2min檢出陽性，3min陽性檢出率99%，6min可以確定陰性。這是關于Flu和StrepA最快的分子的檢測試劑盒，但ID NOW儀器的通量很小，一次只能檢測一個樣本。目前的新冠疫情下，實驗室的大量檢測仍然需要依賴傳統(tǒng)高通量qPCR的批量檢測，ID NOW無法對于大量樣本的檢測能力提升帶來較大的幫助。而ID NOW屬于POCT范疇，在醫(yī)生辦公室、緊急護理診所和醫(yī)院急診科等廣泛的醫(yī)療場景中都可以進行檢測，可以起到一定的市場補充作用。

10分鐘內(nèi)完成檢測，擴增的時間，幾乎只要5分鐘左右，性能會怎樣？此處留給大咖來評論，請點擊下面的鏈接留言，謝謝

文章來源于IVD工具人，作者上海灘老紀，文章僅代表作者個人觀點，歡迎留言交流。