近年來(lái)，靶向測(cè)序憑借成本低、數(shù)據(jù)利用率高、組合靈活等優(yōu)勢(shì)，在臨床的疾病輔助診斷、治療以及腫瘤基因檢測(cè)中發(fā)揮出積極的作用。

突變基因測(cè)序

癌癥基因測(cè)序；

遺傳疾病篩查；

免疫療法預(yù)測(cè)等。

病原體/環(huán)境

微生物鑒定

16s擴(kuò)增子測(cè)序；

耐藥性分析；

病毒嵌合人基因組分析等 。

科學(xué)研究

基因功能研究。

從上面的比較可以看出，使用擴(kuò)增子建庫(kù)富集目的DNA的方法在多個(gè)方面顯著優(yōu)于雜交捕獲方式，特別是在起始量低，用時(shí)較短和成本較低方面。

標(biāo)準(zhǔn)擴(kuò)增子建庫(kù)流程為在完整模板的基礎(chǔ)上投入多重?cái)U(kuò)增的Panel進(jìn)行多重?cái)U(kuò)增，隨后將得到的擴(kuò)增子進(jìn)行引物消化，消化掉多余的引物二聚體以及兩端引物本身的部分序列，獲得平末端的結(jié)構(gòu)，與接頭連接后形成完整文庫(kù)。 

圖2. 兩步法擴(kuò)增子建庫(kù)流程。

兩輪擴(kuò)增的方法原理是在基因組基礎(chǔ)上，投入的多重?cái)U(kuò)增的引物帶有一定的修飾，經(jīng)過(guò)第一輪多重?cái)U(kuò)增之后，序列兩端帶有一段接頭序列，第二輪擴(kuò)增將Index添加上去，經(jīng)過(guò)兩輪擴(kuò)增形成完整文庫(kù)。

圖3. 多重PCR產(chǎn)物擴(kuò)增子建庫(kù)流程。

多重PCR產(chǎn)物擴(kuò)增子建庫(kù)原理是在待測(cè)基因組上投入無(wú)修飾的多重?cái)U(kuò)增引物進(jìn)行多重PCR，產(chǎn)物經(jīng)過(guò)純化后，進(jìn)行常規(guī)DNA建庫(kù)。

Vazyme推出多重?cái)U(kuò)增子建庫(kù)試劑盒升級(jí)產(chǎn)品——VAHTS^?AmpSeq Library Prep Kit V3（Vazyme #NA210），產(chǎn)出與均一性雙向起飛！  

圖4. 不同起始投入量和Panel條件下文庫(kù)產(chǎn)出。

在不同起始投入量下（1ng、10ng、100ng），Vazyme #NA210均能高效建庫(kù)，且同類產(chǎn)品相比，文庫(kù)產(chǎn)量更高。

（1）更高的測(cè)序覆蓋度

圖5. 不同起始投入量和Panel條件下文庫(kù)的測(cè)序覆蓋度。

測(cè)序數(shù)據(jù)質(zhì)量方面，Vazyme #NA210在不同起始量和Panel條件下覆蓋度均高于同類產(chǎn)品。

（2）更優(yōu)的測(cè)序均一性