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      【好文共賞】不同采集方法對(duì)嬰兒糞便腸道菌群鑒定的影響

       微微悅明 2021-12-13

      Title: 《Collection of non-meconium stool on fecal occult blood cards is an effective method for fecal microbiota studies in infants》 Microbiome, 2017

      研究目標(biāo):(1)糞便潛血檢測(cè)卡能否替代常規(guī)采樣方法?

                          (2)不同的采樣裝置、保存溫度和保存時(shí)間對(duì)腸道菌群鑒定的影響

      研究對(duì)象:8名兒童的糞便樣本,采用不同采樣裝置重復(fù)采樣,分別在不同溫度保存不同時(shí)間后提取DNA。

      采樣裝置: 糞便潛血檢測(cè)卡(FOBT) vs Eppendorf管

      保存溫度:常溫 vs 零下80度

      保存時(shí)間:0-2天 vs 3-5天 vs 7天

      核酸提取方法:手工法(Qiagen Qiamp DNA stool mini kit) vs 自動(dòng)法(Qiagen,Valencia,CA)

      取樣情況詳見下表

      結(jié)果一:

      不同的保存方法各指標(biāo)間具有顯著的差異(糞便潛血檢測(cè)卡FOBT vs Eppendorf管

      結(jié)果二: 

      不同保存條件對(duì)腸道菌群的影響主要表現(xiàn)在特定菌屬的豐度變化。

      在嬰兒胎糞和糞便中厚壁菌門(Firmicutes)和變形菌門(Proteobacteria)都占主要部分(86%~99%)。相比于保存于tb管中的樣本,保存在檢測(cè)卡中的糞便樣本中厚壁菌門發(fā)生了顯著的升高,而變形菌門發(fā)生了顯著的降低。此外,在不同的保存容器中,嗜血桿菌屬的豐度也有顯著差別。

      微微碎碎念:有些失望的結(jié)果。作為檢測(cè)卡,F(xiàn)OBT體積小,易保存,取樣量少,實(shí)在是很值得期待的臨床應(yīng)用取樣容器。不過(guò)這結(jié)果說(shuō)真的,也是意料之中了。再次證實(shí)了,保存時(shí)間、保存溫度、保存裝置都對(duì)微生態(tài)菌群結(jié)構(gòu)具有影響! 研究過(guò)程中需小心,小心,再小心!

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