CAR-T細(xì)胞療法在治療實體瘤方面有多重阻礙，如細(xì)胞體內(nèi)擴(kuò)增及持久性不足、浸潤到腫瘤中的細(xì)胞不足、抑制性腫瘤微環(huán)境（TME）導(dǎo)致CAR-T細(xì)胞功能喪失等。來自全球的多個科學(xué)家團(tuán)隊正在想辦法克服這些挑戰(zhàn)。

溶瘤病毒(OV)作用機(jī)制 | a.直接溶瘤：病毒顆粒從被OV裂解的腫瘤細(xì)胞中釋放出來，感染其他腫瘤細(xì)胞；此外，來自O(shè)V感染腫瘤的外泌體含有OV，且表現(xiàn)出高度的腫瘤趨向性。b. 釋放抗腫瘤免疫力：OV暴露誘導(dǎo)的免疫原性細(xì)胞死亡(ICD)會導(dǎo)致多種分子釋放，包括病原體相關(guān)分子模式分子(PAMPs)、損傷相關(guān)分子模式分子(DAMPs)、腫瘤相關(guān)抗原(TAAs)和腫瘤相關(guān)新抗原(TANs)。通過模式識別受體(PRRs)在癌癥或免疫細(xì)胞中識別PAMPs/DAMPs，會觸發(fā)I型干擾素(IFNs)、白介素(IL)-1β、IL-6、IL-12、TNF-α、粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)等促炎細(xì)胞因子的表達(dá)，以及CCL2、CCL3、CCL5和CXCL10等趨化因子的表達(dá)。趨化因子可招募中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞到感染部位；相關(guān)細(xì)胞因子則可刺激先天免疫細(xì)胞（如NK細(xì)胞和DCs），進(jìn)一步刺激IFNs、TNF-α、IL-12、IL-6和趨化因子的產(chǎn)生，導(dǎo)致最初的先天反應(yīng)放大，將免疫學(xué)上的“冷”腫瘤轉(zhuǎn)變?yōu)椤盁帷蹦[瘤。I型干擾素(IFNs)會增加DCs表面MHC I類、II類分子和CD40、CD80、CD86等共刺激分子的水平。而釋放的TAAs和TANs經(jīng)過處理，最終會呈遞在抗原呈遞細(xì)胞（APC）的表面。此外，多種細(xì)胞因子和趨化因子有助于招募和激活抗腫瘤CD8+T細(xì)胞和B細(xì)胞。（來源：Signal Transduction and Targeted Therapy）

溶瘤病毒（Oncolytic viruses, OVs）是一類天然存在或基因工程改造后可特異性感染和裂解癌細(xì)胞（不傷害正常細(xì)胞）的病毒。由于先前已有大量研究揭示，溶瘤病毒能夠選擇性地在腫瘤細(xì)胞中復(fù)制，以誘導(dǎo)高度炎癥性TME和先天及適應(yīng)性抗腫瘤免疫反應(yīng)，因此，科學(xué)家們設(shè)想，溶瘤病毒與CAR-T聯(lián)合可能能夠逆轉(zhuǎn)實體瘤對CAR-T細(xì)胞療法的耐藥性。

來源：Science Translational Medicine

4月13日，最新發(fā)表在Science Translational Medicine雜志上的一項研究中，來自Mayo Clinic的科學(xué)家們發(fā)表了溶瘤病毒聯(lián)合CAR-T療法治療實體瘤的一項突破成果。與先前的聯(lián)合治療策略不同的是，這一次，科學(xué)家們將溶瘤病毒藏在了CAR-T細(xì)胞中。

具體來說，LAURA EVGIN等研究者讓CAR-T細(xì)胞裝載了水泡性口炎病毒或呼腸孤病毒，然后用以治療實體瘤小鼠模型。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，通過系統(tǒng)性遞送，溶瘤病毒大大增強(qiáng)了CAR-T細(xì)胞治療黑色素瘤和膠質(zhì)瘤腫瘤模型的療效，改善了小鼠的生存。

機(jī)制研究顯示，CAR-T將溶瘤病毒遞送到腫瘤中后，病毒就能夠滲透到腫瘤細(xì)胞中，進(jìn)行復(fù)制，使腫瘤細(xì)胞破裂，并激發(fā)有效的免疫反應(yīng)。

體外裝載溶瘤病毒促進(jìn)了雙特異性（DS）CAR-T細(xì)胞的生成，提高了治療效果（來源：Science Translational Medicine）

研究人員稱，用CAR-T遞送溶瘤病毒這種治療策略解決CAR-T單藥治療實體瘤面臨的兩個主要挑戰(zhàn)，一方面，溶瘤病毒可以破壞一些實體腫瘤用來躲避免疫系統(tǒng)攻擊的分子屏障；另一方面，溶瘤病毒可以侵入腫瘤的核心，這對于免疫細(xì)胞來說幾乎是不可能完成的任務(wù)，因為免疫細(xì)胞往往會在入侵的過程中失去能力。

利用神經(jīng)膠質(zhì)瘤和黑色素瘤小鼠模型，研究者們證實，靜脈注射裝載溶瘤病毒的CAR-T細(xì)胞帶來了很高的治愈率，且沒有造成明顯的毒性。

裝載呼腸孤病毒的CAR-T細(xì)胞在多種腫瘤模型中具有治療作用（來源：Science Translational Medicine）

具體來說，在B16EGFRvII小鼠黑色素瘤腫瘤模型中，與未裝載病毒的CAR-T細(xì)胞相比，預(yù)先裝載了溶瘤呼腸孤病毒的CAR-T細(xì)胞改善了生存，使用裝載水泡性口炎病毒（VSV）的CAR-T細(xì)胞產(chǎn)生了相似的結(jié)果。此外，呼腸孤病毒的全身刺激重新激活了該病毒特異性CAR-T細(xì)胞，導(dǎo)致7只小鼠有6只被長期治愈（>60天）。研究還顯示，體外裝載了呼腸孤病毒的CAR-T細(xì)胞也增加了細(xì)胞的體內(nèi)持久性和擴(kuò)增。

類似的，利用預(yù)先裝載了呼腸孤病毒的CAR-T細(xì)胞進(jìn)行治療，并在隨后用呼腸孤病毒進(jìn)行刺激，也治愈了>80%攜帶侵襲性CT2A EGFRvIII腦瘤的小鼠，表明這種治療策略不依賴于腫瘤的治療位置。

裝載溶瘤病毒的CAR-T細(xì)胞療法也能夠?qū)θ笔AR靶向TAA（TAACAR-loss）的腫瘤有效（來源：Science Translational Medicine）

此外，研究還發(fā)現(xiàn)，體外裝載溶瘤病毒的CAR-T細(xì)胞在缺乏CAR靶點表達(dá)的情況下也有治療效果。在荷混合腫瘤（10% CT2AEGFRvIII +90% CT2A，即10%的腫瘤細(xì)胞表達(dá)EGFRvIII）的小鼠中，利用預(yù)先裝載了呼腸孤病毒的CAR-T細(xì)胞進(jìn)行治療，并結(jié)合進(jìn)一步的呼腸孤病毒系統(tǒng)刺激，改善了治療，導(dǎo)致7只小鼠中的2只被治愈。

總結(jié)來說，這項研究提供了一種有希望的治療實體瘤的創(chuàng)新CAR-T細(xì)胞療法。領(lǐng)導(dǎo)該研究的Richard Vile博士表示，盡管動物模型研究往臨床研究轉(zhuǎn)化需要保持謹(jǐn)慎，但他們希望，能夠在未來1-2年內(nèi)將這種策略應(yīng)用到臨床試驗中。通過做這樣的試驗，科學(xué)家們將有可能看到是否可以進(jìn)一步提高CAR-T細(xì)胞治療不同類型實體瘤的療效。