來源 TMR Publishing Group

作者 Traditional Medicine Research 編輯部

熊果酸是一種天然的五環(huán)三萜類化合物，具有抗炎、保肝、抗腫瘤、降血糖等多種藥理活性，該天然產(chǎn)物廣泛存在于白花蛇舌草、女貞子、烏梅、夏枯草等常見中草藥中，本文就熊果酸治療肝病的作用機制作一綜述，以期為熊果酸的保肝作用的進一步基礎和臨床研究提供參考。

據(jù)估計，我國約有4億人患有各種肝病，占總人口的1/5。其中，非酒精性脂肪肝的患病率約為6%-27%。隨著酗酒者數(shù)量的增加，部分地區(qū)酒精性肝病患病率已達8.7%，由酒精引起的肝功能衰竭比例由2003年的0.3%上升至2012年的10.1%。肝病已成為我國嚴重的公共衛(wèi)生問題。

逆轉藥物性肝損傷

藥物性肝損傷是指化學藥物、生物制劑、中藥、天然藥物、保健品、膳食補充劑及其代謝物甚至輔料引起的肝損傷，嚴重影響患者的治療、預后和生活質(zhì)量。

作為中草藥提取物中的天然產(chǎn)物，熊果酸能靶向肝細胞，影響蛋白酶的表達水平，平衡機體的氧化和抗氧化，減輕藥物性肝損傷的程度。Zhang等人將藥物性肝損傷患者隨機分組。治療組在常規(guī)治療的基礎上給予熊果酸緩釋片，對照組給予雙環(huán)醇片。28天后進行療效評價，研究發(fā)現(xiàn)治療組丙氨酸轉氨酶、堿性磷酸酶、天冬氨酸轉氨酶等肝功能指標明顯改善，血清丙二醛含量下降。同一組肝小葉中心區(qū)超氧化物歧化酶含量增加，壞死肝細胞恢復。這些結果表明，熊果酸以肝臟為靶點，通過逆轉超氧化物歧化酶等酶的活性，保護肝細胞膜和細胞器的生物膜系統(tǒng)，降低脂質(zhì)過氧化程度，修復受損細胞等。

改善非酒精性脂肪肝

肝臟是人體重要的代謝器官，主要代謝體內(nèi)脂質(zhì)。肝臟脂肪主要由外界食物、遺傳和代謝因素觸發(fā)，從而解除肝臟脂質(zhì)代謝功能的調(diào)節(jié)，導致肝細胞脂質(zhì)沉積過多，進一步加重肝功能損害。非酒精性脂肪肝是一種以肝細胞脂質(zhì)積聚為主要病理特征的代謝性肝病，與胰島素抵抗及其遺傳易感性密切相關。它不僅可導致肝纖維化和肝損傷，而且與代謝綜合征、2型糖尿病、動脈硬化性心血管疾病、結直腸腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關。

丁等建立了油酸治療前不同劑量熊果酸預處理人肝癌細胞HepG2的脂質(zhì)沉積模型。結果表明，熊果酸能顯著降低油酸誘導的脂質(zhì)沉積程度，且呈劑量依賴性。進一步的實驗發(fā)現(xiàn)，應用自噬抑制劑后，熊果酸改善肝細胞脂質(zhì)沉積的作用受到抑制。自噬通過分解受損和過剩的細胞蛋白質(zhì)、細胞器和其他細胞質(zhì)成分，并循環(huán)利用細胞內(nèi)成分，影響重要的細胞過程，如炎癥、免疫反應、脂質(zhì)代謝和儲存。自噬在維持肝臟脂質(zhì)代謝穩(wěn)態(tài)中起著重要作用。增強自噬可增加肝臟脂肪消耗，減少肝臟脂質(zhì)堆積。Western-blot分析證實熊果酸可能通過調(diào)節(jié)AMPK的磷酸化來激活自噬，消除過多的線粒體損傷，調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝，抑制肝細胞脂質(zhì)沉積等。

阻斷肝纖維化進展

肝纖維化是許多慢性肝病的常見病理過程，如病毒性肝炎、非酒精性脂肪肝和酒精性肝病。損傷肝細胞分泌的多種細胞因子可刺激肝星狀細胞轉化為肌成纖維細胞，誘導纖維化細胞的活化和細胞外基質(zhì)的沉積，完成損傷肝細胞的修復。然而，當機體無法平衡細胞外基質(zhì)的合成和降解時，這種基質(zhì)的沉積會導致肝纖維化。如果沒有及時有效的干預，肝纖維化可能演變?yōu)楦斡不?、肝癌等肝病的終末期。腸道菌群與肝纖維化過程密切相關。腸道和肝臟微生物通過多種途徑相互作用，如內(nèi)分泌和細胞信號途徑，促進肝纖維化的發(fā)展。

研究發(fā)現(xiàn)，熊果酸通過抑制Ras同源基因家族成員A通路成分的表達，阻止細菌進入靜脈，降低腸道免疫應答和炎癥因子的釋放，從而改善腸道損傷和細菌失衡，避免通過腸肝軸加速肝纖維化的進展。此外，熊果酸能夠通過抑制腸NOX介導的氧化應激來調(diào)節(jié)回腸緊密連接蛋白claudin1和claudin1的表達，并降低血清脂多糖和降鈣素原的含量。進一步的實驗證實，肝纖維化小鼠經(jīng)熊果酸治療后，NOX 4和Ras同源基因家族成員A/Rho相關卷曲線圈形成蛋白激酶1的表達降低，微生物區(qū)系失衡、多樣性、豐富度得到改善，潛在有益細菌數(shù)量增加。提示熊果酸通過抑制NOX4/ROS和RhoA/ROCK1信號通路，逆轉肝纖維化，減少肝細胞壞死。

抑制肝癌的生長和轉移

肝癌是我國常見的惡性腫瘤之一，嚴重影響人們的生命健康。每年有超過30萬人死于肝癌?，F(xiàn)有的肝癌手術和化療治療效果有限，易產(chǎn)生耐藥性。治療過程中的消化道反應、肝損傷、骨髓抑制等副作用也影響患者化療的整體成功率。研究發(fā)現(xiàn)，熊果酸具有多途徑、多靶點的抗癌作用：抑制細胞增殖、誘導細胞凋亡、抗新生血管、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)、抑制腫瘤轉移（圖1）。

圖1 熊果酸阻斷細胞周期的機制

抑制腫瘤細胞增殖

PTEN蛋白磷酸張力同源缺失基因是一種具有脂磷酸酶和蛋白磷酸酶雙重活性的抑癌蛋白。PTEN基因表達降低可激活PI3K/Akt信號通路，促進多種促血管生成因子的產(chǎn)生，包括血管內(nèi)皮生長因子，導致細胞凋亡減弱。其他研究表明，PI3K/Akt信號通路通過激活核因子κB和多藥耐藥基因-1的表達抑制p53基因，參與腫瘤對順鉑、阿霉素、紫杉醇等化療藥物的耐藥。熊果酸能上調(diào)PTEN的表達，抑制PI3K/Akt信號轉導通路，從而抑制人肝癌細胞HepG2的增殖和分化，降低耐藥性。

誘導腫瘤細胞凋亡

腫瘤細胞中脂肪酸合成酶的含量高于正常細胞，能促進脂肪酸合成，滿足腫瘤細胞分裂增殖的需要。Fan等發(fā)現(xiàn)熊果酸能抑制脂肪酸合成酶的活性，影響脂肪酸的產(chǎn)生，促進腫瘤細胞凋亡。

Fan等發(fā)現(xiàn)熊果酸能抑制脂肪酸合成酶的活性，影響脂肪酸的產(chǎn)生，促進腫瘤細胞凋亡。Zong等報道，熊果酸能夠下調(diào)p-PI3K和p-Akt的表達，上調(diào)切割的caspase-3、Bax、磷酸化N末端激酶和C/EBP同源蛋白的表達，提高Bax/Bcl-2比值，顯著提高人肝癌細胞HepG2的抑制率和凋亡率。熊果酸的調(diào)節(jié)作用優(yōu)于PI3K特異性抑制劑。說明熊果酸通過抑制PI3K/Akt信號通路，影響下游蛋白的表達，誘導人肝癌細胞HepG2凋亡。Yu等對人肝癌細胞SMMC-7721的實驗也證實，熊果酸以劑量依賴的方式下調(diào)抗凋亡基因Bcl-2的表達，上調(diào)促凋亡基因Bax的表達，增加肝癌細胞中C/EBP同源蛋白的表達。

減少腫瘤血管生成

Kiran等人認為，熊果酸可下調(diào)E-選擇素、血小板內(nèi)皮細胞粘附分子-1、細胞間粘附分子、血管內(nèi)皮生長因子、成纖維細胞生長因子-2及其受體的表達，導致PGE2/PGD2增加，抑制新生血管形成。熊果酸通過降低血清一氧化氮和炎性細胞因子，增加組織金屬蛋白酶-1和IL-2的含量，抑制腫瘤血管生成，抑制血管內(nèi)皮細胞的遷移和侵襲。

調(diào)節(jié)身體的免疫功能

Li等發(fā)現(xiàn)人肝癌細胞系H22荷瘤小鼠連續(xù)15天腹腔注射高劑量（40mg/kg）熊果酸后，脾臟指數(shù)異常升高，而CD4+/CD8+比值、IL-2和腫瘤壞死因子-α表達升高。此外，IL-4被抑制，積累Th1細胞因子，糾正Th1/Th2亞群細胞因子失衡。提示熊果酸能減輕人肝癌細胞系H22荷瘤小鼠的免疫抑制，提高小鼠的免疫功能，保護小鼠的免疫器官。Li等分析了皮下移植人肝癌細胞系H22小鼠的腸道細菌，發(fā)現(xiàn)熊果酸在門水平上調(diào)節(jié)了移植瘤小鼠腸道菌群的比例和分布，減少了鼠桿菌科的豐度，提高羊草科、羊茅科等有益細菌的豐度，積極調(diào)節(jié)腸道菌群結構，恢復腸道菌群紊亂。

阻斷腫瘤侵襲轉移

Li等人設計了50μmol/L 熊果酸處理人肝癌細胞系Bel-7404的對照實驗，并得出結論，這種天然產(chǎn)物能夠通過下調(diào)MMP-2的表達和上調(diào)TIMP-2的表達來抑制肝癌細胞的遷移和侵襲。其療效與10mg/L順鉑相當。人肝癌細胞系H22移植瘤小鼠連續(xù)給予300mg/（kg·d）熊果酸2周后，抑瘤率達55.22%。熊果酸呈劑量依賴性降低MMP-2、血管內(nèi)皮生長因子和Ras基因的表達，抑制細胞外基質(zhì)降解和新生血管形成，從而抑制肝癌的增殖、侵襲和轉移。

總結與展望

肝臟是人體最大的實體器官，在物質(zhì)代謝過程中占有極其重要的地位。環(huán)境、飲食、藥物攝入等多種因素均可導致肝病的發(fā)生和發(fā)展。近年來，隨著分子檢測技術的發(fā)展，大量研究表明，多種基因、蛋白質(zhì)和信號轉導途徑與肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關。作為一種天然的肝臟保護劑，研究人員在揭示熊果酸治療肝臟疾病的機制的同時取得了進展。熊果酸能夠通過多靶點、多途徑、多環(huán)節(jié)保護肝臟，從而修復肝損傷，改善肝功能，抑制腫瘤生長和遷移等。盡管如此，為了確定這種天然產(chǎn)物的生物學重要性，還需要使用熊果酸進行更詳細的臨床試驗。

熊果酸的疏水性和低分子量限制了其臨床應用。因此，科學家們制備了熊果酸納米制劑，可以顯著提高其溶解度和生物利用度，增強其生物活性。例如，熊果酸的固體分散體是由熊果酸與PVP-VA64、Soluplus等輔料通過熱熔擠出技術混合而成，可提高其體外溶出度；納米乳液在模擬胃液中的溶解度平衡，與表面活性劑、水、油均勻混合，使熊果酸的溶解度增加12.48倍，促進熊果酸進入小腸上皮細胞；熊果酸自微乳凍干制劑具有緩釋作用，可用于靜脈注射；溶劑輔助研磨法制備的熊果酸磷脂復合物的水溶性增加了熊果酸的溶解度超過276倍，增強其抗肝癌的活性。然而，其研究大多停留在實驗室階段，尚需進一步優(yōu)化和完善。

引用格式

Liang Y, Niu QQ, Zhao YH. Pharmacological research progress of ursolic acid for the treatment of liver diseases. Tradit Med Res. 2021;6(4):38. doi:10.12032/TMR20210331227