蜂王漿別名蜂乳、蜂皇漿。近些年有大量的研究報告表明,蜂王漿具有多種生物活性,如抗腫瘤、抗氧化、增強記憶力、調(diào)節(jié)免疫力、抗菌、修復組織損傷等。目前大部分學者主要研究蜂王漿的整體功效,而對于某些成分的具體功效報道較少。蛋白質(zhì)是生物生長發(fā)育所需的必需營養(yǎng)素,蜂王漿蛋白是蜂王漿的主要成分,而蜂王漿的重要醫(yī)療保健作用和生物學功能,如抗腫瘤、抗氧化、抗菌等,與其中的蜂王漿蛋白密切相關。 胃癌是臨床上威脅國人健康最常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一,發(fā)病率位于所有腫瘤的第六位,病死率處于第四位,嚴重威脅著人類健康。在食品領域,已有采用黑加侖、綠豆、獼猴桃、細香蔥提取物等多種天然產(chǎn)物來探究其對胃癌細胞的影響,經(jīng)過對比,發(fā)現(xiàn)蜂王漿蛋白體外消化產(chǎn)物對胃癌細胞SGC-7901的抑制作用要高于黑加侖提取物以及獼猴桃根黃酮提取物,但抑制能力低于霍山石斛蛋白。 以蜂王漿蛋白為原料,采用體外消化模擬實驗,制備蜂王漿蛋白體外消化物。通過細胞學形態(tài)觀察和集落形成實驗,發(fā)現(xiàn)蜂王漿蛋白體外消化產(chǎn)物對腎上皮細胞293T的形態(tài)沒有造成影響,而對胃癌細胞SGC-7901的形態(tài)和集落形成能力具有明顯抑制效果。通過MTT實驗發(fā)現(xiàn),蜂王漿蛋白體外消化物對SGC-7901的生長增殖確實具有明顯的抑制作用,且具有時間、劑量依賴性,與王勇姿通過實驗得出對肝癌細胞增殖影響一致。 采用流式細胞術檢測細胞周期及凋亡過程中,發(fā)現(xiàn)經(jīng)蜂王漿蛋白體外消化產(chǎn)物誘導后,胃癌細胞SGC-7901中G1期比例升高,S期比例降低,DNA合成期受阻,引發(fā)細胞凋亡增多,與陳立軍通過實驗得出蜂王漿在體內(nèi)抑制腫瘤的機制與其促進腫瘤組織壞死和細胞凋亡有關的結論一致。p53蛋白也被稱作基因組的守護者,當DNA發(fā)生損傷時,p53蛋白具有修復損傷DNA的重要作用,是一種抑制腫瘤的基因。PARP是聚腺苷二磷酸核糖聚合酶家族中的一員,其催化活性約占家族酶活性的90%以上,在多種癌細胞和組織中呈現(xiàn)出高表達。 實驗中,蜂王漿蛋白體外消化產(chǎn)物顯著上調(diào)了SGC-7901細胞中p53的蛋白表達,同時下調(diào)了PARP-1蛋白的表達,且蛋白表達水平與蜂王漿濃度相關。將蜂王漿蛋白進行體外消化模擬實驗,測定其最終水解度為28.8±1.42%,消化率為71.32±3.3%;對酶解后的消化產(chǎn)物進行SDS-PAGE電泳分析,發(fā)現(xiàn)其蛋白均由之前的大分子蛋白,水解成了蛋白分子量為10-15kDa甚至更小的小分子蛋白。 集落形成實驗以及MTT實驗發(fā)現(xiàn),與空白對照組相比,蜂王漿蛋白體外消化產(chǎn)物對胃癌細胞具有抑制作用(P<0.05),并呈現(xiàn)時間-劑量效應。并在0.2mg/mL濃度干預48h后,其抑制率最高達到62.84±2.54%;并且經(jīng)過蜂王漿蛋白體外消化產(chǎn)物干預后的胃癌細胞,呈現(xiàn)密度減少、形態(tài)皺縮的現(xiàn)象;流式細胞術檢測其經(jīng)蜂王漿蛋白體外消化產(chǎn)物誘導后,胃癌細胞SGC-7901中G1期比例升高,S期比例降低,DNA合成期受阻,引發(fā)細胞凋亡增多;WesternBlot法發(fā)現(xiàn)蜂王漿蛋白體外消化產(chǎn)物顯著上調(diào)了SGC-7901細胞中p53的蛋白表達,同時下調(diào)了PARP-1蛋白的表達(P<0.05),且蛋白表達水平與蜂王漿濃度相關。 (來源:王天石 - 《錦州醫(yī)科大學》 - 2019) |
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