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      eDNA專題|今年超火的eDNA技術(shù)是什么

       凌恩生物 2022-06-15 發(fā)布于陜西

      你知道嗎?無需長期監(jiān)測,只需從海中舀一杯水,從土壤中挖一抔土,從沉積物中分離一管淤泥等等,就能知道有哪些物種曾在附近出沒。這到底是如何實現(xiàn)的呢?

      eDNA技術(shù)的起源與發(fā)展

      環(huán)境DNA(eDNA)是生物與環(huán)境互作遺留的DNA,可能來源有生物脫落的組織、分泌物、排泄物、血液和尸體等,分布在土壤、沉積物和自然水體等環(huán)境中,是生物完整和片段化DNA的混合物。環(huán)境樣品中通常含有動植物脫落的細胞或者是游離的DNA,生物排泄過程中脫落的皮膚,尿液和糞便等也可以是“環(huán)境DNA”的來源,并能提供一個環(huán)境系統(tǒng)中物種的存在記錄。

      環(huán)境DNA技術(shù):環(huán)境DNA的高通量生物監(jiān)測技術(shù)通過從環(huán)境介質(zhì)(水、土壤、沉積物等)中提取DNA,對基因組的特定DNA片段進行PCR擴增和高通量測序,從而實現(xiàn)對生物群落的定性、定量分析。

      eDNA技術(shù)的研究特點圖片

      eDNA技術(shù)的研究特點

      1、eDNA可作為時間生態(tài)數(shù)據(jù)的來源

      生態(tài)群落在時間和空間上發(fā)生變化,在百年到千年規(guī)模的長期動態(tài)記錄很少。時間數(shù)據(jù)是單向的(環(huán)境變化必須在其影響可見之前發(fā)生),它們提供了一些識別與環(huán)境變化和生態(tài)動態(tài)相關(guān)的因果關(guān)系的最佳方法。越來越多的研究認為eDNA可能是一個主要的,但迄今未充分利用的時空生物多樣性數(shù)據(jù)的來源(下圖)。
      通過提供關(guān)于當前(圖上)和過去(圖下)幾個世紀甚至幾千年之間生物多樣性模式的連續(xù)數(shù)據(jù),eDNA可以告知關(guān)于(i)單一物種動態(tài)的假設(shè)檢驗,例如殖民化或滅絕;(ii)群落動態(tài),例如群落構(gòu)成和豐度變化;(iii)人類對生態(tài)系統(tǒng)的壓力,例如工業(yè)或農(nóng)業(yè)的影響。
      圖片
      圖1 eDNA應(yīng)用范圍

      2、時間生物多樣性數(shù)據(jù)的來源比較

      目前生態(tài)學(xué)家多使用以下時間生物多樣性數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)來源,都存在一定的局限性。
      (1)長期監(jiān)測
      長期計劃的例子包括北大西洋(自1931年以來)的連續(xù)浮游生物記錄器調(diào)查和美國的圣誕鳥計數(shù)(自1900年以來)。這些數(shù)據(jù)是異質(zhì)的,在分類學(xué)上有很強的偏見。由于生物多樣性的許多候選驅(qū)動因素(如污染和棲息地變化)在十年時間尺度上是共線的,限制了我們識別生態(tài)變化原因的能力。
      (2)歷史文件和”遺產(chǎn)“數(shù)據(jù)
      收集幾個世紀以來的各種定量生物多樣性數(shù)據(jù),提供了歷史生態(tài)群落的快照,可用于評估過去和現(xiàn)在之間的變化。但是,這些數(shù)據(jù)僅適用于有限數(shù)量的地點和時間,其價值受到歷史和當代數(shù)據(jù)可比性的不確定性的影響。
      (3)古生態(tài)學(xué)
      當代生態(tài)學(xué)和古生態(tài)學(xué)數(shù)據(jù)結(jié)合起來,極大擴展了時間生態(tài)學(xué)的時間跨度。然而,古生態(tài)數(shù)據(jù)受到保存完好和可識別的有機遺骸(如花粉、骨骼和貝殼)的可用性的嚴重限制。
      (4)環(huán)境DNA
      eDNA可以為更廣泛的物種和更廣泛的地理環(huán)境提供長期生物多樣性的連續(xù)時間數(shù)據(jù)。eDNA數(shù)據(jù)填補了古生態(tài)學(xué)和古生物學(xué)、現(xiàn)代研究的薈萃分析和長期實驗之間的空白。它可用于測試需要長時間尺度和廣泛分類范圍的生態(tài)理論、假設(shè)和模型。這有助于更深入地了解作為關(guān)鍵生態(tài)系統(tǒng)過程和服務(wù)基礎(chǔ)的生物多樣性動態(tài)。

      圖片

      圖2 eDNA應(yīng)用到大范圍尺度

      eDNA應(yīng)用和前景

      (1)單個物種動力學(xué)

      eDNA可以提供關(guān)于物種出現(xiàn)的空間模式變化的新數(shù)據(jù)來源,甚至可能顯示隨時間變化的相對豐度,但研究過程中仍然存在很多挑戰(zhàn)。 

      類型

      挑戰(zhàn)

      埋藏學(xué)

      eDNA觀察依賴于保留底物。結(jié)合DNA的顆??梢酝ㄟ^侵蝕進行運輸和再加工。 DNA的垂直運動可能會混淆eDNA數(shù)據(jù)的解釋。

      eDNA的不完美采樣

      物種可能存在于某個地點,但未被檢測到或者由于污染(假陽性)可能錯誤地記錄物種。不完善的eDNA采樣,特別是假陽性問題,具有挑戰(zhàn)性,但它越來越多地通過物種占用模型來解決。

      有機豐度/

      生物量

      eDNA檢測物種豐度尚處于起步階段,但它具有巨大的潛力。最嚴重的問題:

      1.物種內(nèi)和物種內(nèi)標記基因拷貝數(shù)的變化

      2.DNA沉積和保存的時間變化

      3.在PCR期間引物偏倚引起的OTU的差異檢測概率

      細胞死或生

      DNA從最近死亡的細胞中不斷釋放,并有助于eDNA。有三種新興解決方案:

      a.DNA可以從細胞外和細胞內(nèi)部分中提取

      b.DNA隨著年齡的增長而降低

      c.研究可能集中在需要氧氣或光的微生物上

      (2)群落動態(tài)

       eDNA采樣通常提供有關(guān)多個分類群的同步信息,因此對于群落動態(tài)問題特別有價值。eDNA研究為歷史環(huán)境變化提供了證據(jù),推動了群落構(gòu)成的變化。研究捕食者-獵物、共生關(guān)系以及對其他生物相互作用等,例如eDNA有望通過時間表征食物網(wǎng)結(jié)構(gòu)的變化。

      (3)人類對生態(tài)系統(tǒng)的壓力

      研究已經(jīng)證明了DNA長期存在的潛力,以研究人類群落環(huán)境、農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)等等。例如來自加拿大湖泊的時間序列沉積物eDNA被用來檢驗關(guān)于藻類繁殖頻率增加的原因。

      (4)生態(tài)學(xué)中的進化動力學(xué)

      生態(tài)時間尺度可能會發(fā)生演化,導(dǎo)致選擇力、進化響應(yīng)和生態(tài)動力學(xué)之間的反饋循環(huán)。eDNA可以同時提供生態(tài)(發(fā)生、豐度、群落組成)和進化(遺傳)信息。

      (5)生態(tài)學(xué)中的進化動力學(xué)

      人類活動對地球影響的研究越來越多地強調(diào)生態(tài)系統(tǒng)反饋。來自湖泊沉積物中eDNA的功能基因也被用于推斷生態(tài)系統(tǒng)功能的動態(tài),例如參與氮和磷攝取系統(tǒng)的基因,抗生素和抗污染。

      總結(jié):eDNA作為空間和時間生物多樣性數(shù)據(jù)的來源越來越受到關(guān)注,可獲取環(huán)境樣本中DNA所屬物種的分類學(xué)信息和基因功能信息,進而研究不同生態(tài)環(huán)境中物種的多樣性,追溯物種來源、發(fā)展以及變化。環(huán)境DNA檢測在環(huán)境生物多樣性調(diào)查和特定生物調(diào)查方面將發(fā)揮越來越大的作用。




      參考文獻

      Environmental DNA Time Series in Ecology. Trends in Ecology & Evolution, 2019.

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