十年前，一位叫Emily的女孩成為世界上第一個(gè)接受CAR-T細(xì)胞治療的患者，并成功治愈了罹患的癌癥。

2010年5月，年僅5歲的Emily Whitehead被診斷出患有急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)。用盡了一切治療手段后，Emily的家人決定嘗試CAR-T療法——收集Emily血液中的T細(xì)胞并對(duì)它們進(jìn)行基因改造以識(shí)別和攻擊癌細(xì)胞，并將經(jīng)過修飾的細(xì)胞回輸至Emily的血液中。而在此之前，CAR-T療法并未應(yīng)用于人體臨床試驗(yàn)中。這是一個(gè)大膽的嘗試，也是Emily最后的希望：奇跡發(fā)生了，ALL被成功治愈，并且Emily已經(jīng)健康生活了10年。

CAR-T療法已經(jīng)有多款藥物先后上市，不管是在療效還是商業(yè)化上，都取得了巨大的成功。但是，使用基因工程構(gòu)造CAR細(xì)胞的成本高昂，國(guó)外CAR-T產(chǎn)品的售價(jià)高達(dá)37.3-47.5萬美元，而國(guó)內(nèi)上市的兩款藥物售價(jià)也達(dá)120-129萬人民幣。如此昂貴的售價(jià)顯然會(huì)為很多患者家庭帶來沉重的負(fù)擔(dān)。此外，目前自體CAR-T細(xì)胞療法為定制化生產(chǎn)（以患者自體血液中T細(xì)胞為材料），從收集患者T細(xì)胞到CAR-T細(xì)胞到成功制備大概要經(jīng)歷2-3周，對(duì)于一些患者來說，這個(gè)時(shí)間可能會(huì)超過他們的最佳治療時(shí)期。因此，研究者開始考慮同種異體CAR-T細(xì)胞，即通用型CAR-T（UCAR-T）。UCAR-T最大的優(yōu)勢(shì)就是可以提前制備，當(dāng)患者有需要時(shí)可以及時(shí)使用，極大地降低了金錢成本和時(shí)間成本。

Table 1 已經(jīng)上市的CAR-T產(chǎn)品。來源：各公司官網(wǎng)、產(chǎn)品說明書

移植物抗宿主?。℅vHD）是同種異體CAR-T細(xì)胞治療中需要克服的主要障礙[1]，尤其是當(dāng)患者的CAR-T細(xì)胞是由人類白細(xì)胞抗原（HLA）不匹配的健康供體產(chǎn)生時(shí)，UCAR-T的移植會(huì)引起嚴(yán)重的血液學(xué)毒性[2]。因此生成UCAR-T細(xì)胞的主要設(shè)計(jì)原則是從同種異體健康供體中生成腫瘤抗原特異性T細(xì)胞，然后通過基因編輯的方法破壞同種異體T細(xì)胞的TCR基因和/或HLA I類基因來有效消除移植物抗宿主病。通過靶向TCR內(nèi)源性α或β亞基恒定區(qū)的基因組序列或破壞MHC基因復(fù)合物的HLA-A基因座，使得TCR或HLA I類抗原的表達(dá)被消除，由此產(chǎn)生的T細(xì)胞不能識(shí)別同種異體抗原，從而消除GvHD[3]。構(gòu)建TCR缺陷型和HLA I類缺陷型最常用的基因編輯方法有鋅指核酸酶（ZFN）、轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應(yīng)核酸酶（TALEN）和CRISPR/Cas9等。

Figure 2 使用ZEN酶構(gòu)建通用TCR-/HLA-T細(xì)胞[3]

為了提高CAR的靈活性和可控性，研究者們發(fā)明了一種分體式通用可編程 （SUPRA）CAR系統(tǒng)[4]。SUPRA CAR是一種雙組分受體系統(tǒng)，由T細(xì)胞上帶有亮氨酸拉鏈接頭(zipCAR)的通用受體和帶有靶向特定抗原的亮氨酸拉鏈接頭(zipFv)分子的單獨(dú)scFv組成。這種帶有亮氨酸“拉鏈適配器”的SUPRA CAR結(jié)構(gòu)具有幾個(gè)優(yōu)勢(shì)[4]：

1. SUPRA CARs的活性可以通過多種機(jī)制進(jìn)行精細(xì)調(diào)節(jié)，以限制過度激活；

2. SUPRA CARs可以對(duì)多種腫瘤抗原產(chǎn)生反應(yīng)，提高腫瘤特異性；

3. SUPRA成分可以人源化以降低潛在的免疫原性；

4. SUPRA CAR可以調(diào)節(jié)多個(gè)信號(hào)通路或不同的人類T細(xì)胞亞型，以增加免疫反應(yīng)的范圍。

Figure 3 SUPRA CAR圖示[4]。

四.UCAR-T研發(fā)標(biāo)桿：CELLECTIS

法國(guó)企業(yè)Cellectis是研發(fā)通用型CAR-T細(xì)胞療法的標(biāo)桿。Cellectis公司已擁有多條UCAR-T研究管線。例如UCART123是一種基因編輯的T細(xì)胞研究藥物，靶向CD123——一種在急性髓性白血病(AML)的白血病細(xì)胞表面表達(dá)的抗原。該管線正處于臨床I期階段，預(yù)計(jì)今年10月完成，旨在確定藥物的最大耐受量和最佳劑量。

Figure 4 UCART123圖示。來源：Cellectis官網(wǎng)

UCART19則是Cellectis授權(quán)給Servier，目前由Servier和Allogene聯(lián)合開發(fā)的項(xiàng)目。該項(xiàng)目使用TALEN技術(shù)改造T細(xì)胞，其研究成果發(fā)表在Science Translational Medicine上[5]，UCAR-T19被用于治療兩名患有復(fù)發(fā)性難治性急性淋巴細(xì)胞白血病的嬰兒，并展示了這種使用基因編輯技術(shù)進(jìn)行工程化改造細(xì)胞的治療潛力。

五.結(jié)語

UCAR-T因其可以提前制備，并用于同種異體患者中，對(duì)比現(xiàn)有的自體CAR-T成產(chǎn)、運(yùn)輸、存儲(chǔ)的消耗，可以將成本降低90%，具于廣闊的前景和意義。