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      CpG ODN選擇,點(diǎn)這里不迷路

       長(zhǎng)江鳥(niǎo)人 2022-06-17 發(fā)布于江蘇

        Toll 樣受體 9 (TLR9) 可識(shí)別微生物而非脊椎動(dòng)物基因組 DNA 中普遍存在的特定未甲基化 CpG 基序,從而引起先天性和獲得性免疫反應(yīng)。CpG ODN 是含非甲基化CpG基序的寡聚脫氧核苷酸( Oligodeoxynucleotides containing CpG motifs) ,合成的CpG ODN具有和細(xì)菌DNA類(lèi)似的免疫刺激作用。CpG ODN廣泛應(yīng)用于細(xì)胞的刺激和活化、動(dòng)物體內(nèi)注射、佐劑等方面,但是你真的了解CpG ODN嗎?不同的種類(lèi)的CpG ODN的免疫刺激性不同,你使用的CpG ODN選對(duì)了嗎?


      CpG ODN的區(qū)分

      與基因組細(xì)菌DNA中發(fā)現(xiàn)的天然磷酸二酯(PO)骨架相反,CpG ODN具有部分或完全硫代磷酸化(PS)骨架?;谄浣Y(jié)構(gòu)特征和對(duì)人外周血單核細(xì)胞( PBMC ) ,特別是B細(xì)胞和pDC細(xì)胞的刺激活性,將其分為A、B、C三類(lèi)。

      A類(lèi)ODN 的特點(diǎn)是含有PO中心CpG 的回文基序和 PS 修飾的 3’端poly-G。能夠誘導(dǎo)pDC細(xì)胞產(chǎn)生大量IFN-α,但它們是TLR9 依賴性NF-κB信號(hào)傳導(dǎo)和促炎細(xì)胞因子產(chǎn)生的弱刺激劑。

      B類(lèi)ODN 包含帶有一個(gè)或多個(gè)CpG二核苷酸的完整PS主鏈能夠,強(qiáng)烈激活 B 細(xì)胞和TLR9 依賴性NF-κB信號(hào)傳導(dǎo),刺激IFN-α分泌的效果微弱。

      C類(lèi)ODN 結(jié)合了A類(lèi)和B類(lèi)的結(jié)構(gòu)特征,包含一個(gè)完整的PS主干和一個(gè)包含 CpG的回文基序。在功能上,具有誘導(dǎo)pDC產(chǎn)生IFN-α以及B細(xì)胞刺激的活性,但是其效果分別弱于單獨(dú)使用A類(lèi)或B類(lèi)ODN 。


       · 圖1 ·   CpG ODN結(jié)構(gòu)圖解


       · 圖2 ·   CpG ODN功能圖解

      ODN不僅有刺激活性上的區(qū)分,還有種屬之分,你敢信嗎?工欲善其事,必先利其器。選對(duì)了ODN,做實(shí)驗(yàn)也能“事半功倍”。

      A類(lèi)ODN

      名稱(chēng)

      種屬特異性

      描述

      ODN 1585

      小鼠

      文獻(xiàn)引用最多小鼠A類(lèi)ODN

      ODN 2216

      文獻(xiàn)引用最多人A類(lèi)ODN

      ODN 2336

      應(yīng)用:

      1. 抑制HUVEC細(xì)胞IL-8分泌,ODN 2336

      2. 誘導(dǎo)pDC細(xì)胞產(chǎn)生IFN-α、TNF-α,ODN 2216

      3. 誘導(dǎo)PBMC細(xì)胞產(chǎn)生IFN-α、IFN-γ,ODN 2216

      4. 誘導(dǎo)Mincle介導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞活化,ODN 1585

      5. RAW 264.7細(xì)胞NLRP3激活Priming,ODN 1585

      B類(lèi)ODN

      名稱(chēng)

      種屬特異性

      描述

      ODN 1668

      小鼠

      ODN 1826

      小鼠

      文獻(xiàn)引用最多小鼠B類(lèi)ODN

      ODN 2006

      文獻(xiàn)引用最多人B類(lèi)ODN

      ODN 2007

      牛/豬

      ODN BW006

      人/鼠

      ODND-SL01

      人/大鼠/小鼠/兔/豬/狗

      應(yīng)用:

      1. 注射小鼠體內(nèi)可以激活kupffer細(xì)胞,ODN 1668

      2. 誘導(dǎo)小鼠骨髓來(lái)源的巨噬細(xì)胞 , ODN 1826

      3. 瘤內(nèi)注射上調(diào)腫瘤內(nèi)T細(xì)胞OX40表達(dá), ODN 1826

      4. 誘導(dǎo)小鼠DC細(xì)胞成熟, ODN 1826

      5. 增強(qiáng)腫瘤內(nèi)T細(xì)胞浸潤(rùn)(提高T細(xì)胞數(shù)量、增強(qiáng)T細(xì)胞活化), ODN 1826

      6. 誘導(dǎo)BMDM細(xì)胞分泌TNF-α, ODN 1826

      7. 誘導(dǎo)人CLL細(xì)胞分泌IL-10,ODN 2006

      8. 刺激PBMC細(xì)胞表達(dá)CD19、pSTAT3,ODN 2006

      9. 誘導(dǎo)PBMC細(xì)胞產(chǎn)生IL-10,ODN 2006

      10. 刺激兔B細(xì)胞分泌免疫球蛋白,ODN D-SL01

      C類(lèi)ODN

      名稱(chēng)

      種屬特異性

      描述

      ODN 2395

      人/小鼠

      文獻(xiàn)引用最多C類(lèi)ODN

      ODN M362

      人/小鼠

      ODN D-SL03

      人/大鼠/小鼠/兔/豬/狗

      應(yīng)用:

      1. 作為納米佐劑注射C57BL6小鼠,ODN 2395

      2. 誘導(dǎo)原代人CLL細(xì)胞極化和遷移,ODN 2395/ODN 2006

      ODN 2088 —TLR 9拮抗劑

      通過(guò)破壞CpGODNs與TLR9在內(nèi)涵體囊泡中的共區(qū)域化而發(fā)揮作用,而不影響細(xì)胞結(jié)合和攝取。

      應(yīng)用:

      1. TLR9抑制劑治療大鼠疾病模型,ODN 2088

      CpG ODN的選擇你明白了嗎?


      InvivoGen 1977年成立于法國(guó),是法國(guó)第一家生物科技公司。公司成立的初期階段主要提供細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑,如抗支原體、細(xì)菌、真菌污染的抗生素以及基因篩選抗生素(Blasticidin, Puromycin, HygromycinB,G418, Zeocin)。隨著天然免疫研究熱點(diǎn)的興起,InvivoGen于2000年開(kāi)始致力于天然免疫相關(guān)產(chǎn)品的研發(fā)和生產(chǎn),并成為全世界最優(yōu)質(zhì)、最專(zhuān)業(yè)的天然免疫相關(guān)產(chǎn)品生產(chǎn)商。InvivoGen為天然免疫研究提供一整套研究方案,包括不斷更新的模式識(shí)別受體(PRRs)激動(dòng)劑和拮抗劑,PRRs報(bào)告基因細(xì)胞以及天然免疫信號(hào)通路的誘導(dǎo)劑和抑制劑等。 

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