杜氏肌營(yíng)養(yǎng)不良癥(DMD)是一種嚴(yán)重的進(jìn)行性肌肉萎縮疾病，由于X染色體DMD基因突變導(dǎo)致dystrophin表達(dá)喪失，全球約1：5,000活男嬰受到影響。在健康的骨骼肌和心肌中，肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白在收縮和松弛過(guò)程中對(duì)肌膜的穩(wěn)定性起著關(guān)鍵作用。

在DMD中，肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白的缺乏會(huì)導(dǎo)致肌肉退化和炎癥，進(jìn)而導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)功能喪失，最終導(dǎo)致心肺功能下降。

圖片來(lái)源：https:///10.1016/j.omtn.2022.10.025.

近日，來(lái)自美國(guó)全國(guó)兒童醫(yī)院的研究者們?cè)贛olecular Therapy: Nucleic Acids雜志上發(fā)表了題為“Systemic PPMO-mediated dystrophin expression in the Dup2 mouse model of Duchenne muscular dystrophy”的文章，該研究發(fā)現(xiàn)表明，PPMO介導(dǎo)的外顯子跳躍是一種在外顯子2重復(fù)的情況下恢復(fù)肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白的有前景的治療策略。

Duchenne肌營(yíng)養(yǎng)不良癥(DMD)是一種破壞性的肌肉萎縮疾病，由于dystrophin表達(dá)的喪失而引起，導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)和心肺功能的進(jìn)行性喪失。FDA已經(jīng)批準(zhǔn)了四種使用反義磷二酰嗎啉低聚物(PMOS)的外顯子跳過(guò)方法來(lái)恢復(fù)DMD開(kāi)放閱讀框架，導(dǎo)致功能上但內(nèi)部缺失的肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白的表達(dá)，但在單外顯子重復(fù)的患者中，外顯子跳過(guò)有可能恢復(fù)全長(zhǎng)肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白的表達(dá)。

細(xì)胞穿透性多肽結(jié)合的PMOS(PPMOs)比未結(jié)合的PMOS具有更強(qiáng)的細(xì)胞攝取能力和更有效的抗肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白修復(fù)能力。在目前的研究中，研究者證明了在Dup2小鼠模型中廣泛存在的PPMO介導(dǎo)的Dstrophin修復(fù)外顯子2復(fù)制，代表了DMD患者中最常見(jiàn)的單外顯子復(fù)制。

在這項(xiàng)概念驗(yàn)證研究中，一次靜脈注射針對(duì)外顯子2剪接受體位置的PPMO在注射后15天誘導(dǎo)Dup2骨骼肌中45%至68%的外顯子2跳過(guò)DMD轉(zhuǎn)錄本。免疫熒光法顯示肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白在治療后15~30天的平均陽(yáng)性纖維數(shù)為77%~87%，平均信號(hào)強(qiáng)度為正常的41%~51%，免疫印跡法為15.7%~56.8%。

PPMO-A治療后肌肉中肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白的免疫熒光強(qiáng)度

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綜上所述，本研究結(jié)果表明，在第二外顯子重復(fù)的情況下，PPMO-A的全身給藥顯示出作為治療劑的顯著前景，從而顯著挽救了骨骼肌中的肌營(yíng)養(yǎng)不良蛋白。動(dòng)物健康監(jiān)測(cè)沒(méi)有顯示PPMO治療后的任何臨床毒性跡象，除了由于自發(fā)的第二次DMD突變而被排除外，沒(méi)有小鼠在研究過(guò)程中丟失。

盡管這項(xiàng)研究不是為了評(píng)估安全性而設(shè)計(jì)的，但沒(méi)有任何毒性跡象表明，與先前發(fā)表的跳過(guò)外顯子23的MDX小鼠研究中使用的早期PPMO相比，所描述的PPMO-A可能具有更好的安全性。

最近的工作也證明了PPMO在MDX小鼠中的耐受性良好，高達(dá)80 mg/kg，證實(shí)了類似PPMO的相對(duì)安全性。對(duì)于外顯子2跳過(guò)，進(jìn)一步確認(rèn)安全性，確定改善肌肉功能和心臟療效的最佳劑量和給藥方法，將為未來(lái)的臨床開(kāi)發(fā)提供重要的基礎(chǔ)。（生物谷 Bioon.com）

參考文獻(xiàn)

Liubov V. Gushchina et al. Systemic PPMO-mediated dystrophin expression in the Dup2 mouse model of Duchenne muscular dystrophy. Mol Ther Nucleic Acids. 2022 Nov 9;30:479-492. doi: 10.1016/j.omtn.2022.10.025