卵巢癌是女性常見惡性腫瘤之一。由于卵巢位于盆腔較深部，缺乏早期篩查方法，多數(shù)患者確診時已是晚期，具有病程復(fù)雜，易復(fù)發(fā)，遠期生存率低等特點。因此，卵巢癌成為了女性生殖道腫瘤診治中的“硬骨頭”。

手術(shù)和化療是卵巢癌的常規(guī)治療手段，其中約70%的患者經(jīng)化療后能夠?qū)崿F(xiàn)緩解，但大部分患者仍會對化療藥物耐藥，最終導(dǎo)致卵巢癌治療失敗，但目前尚無較好的方法可以解決耐藥問題。

不過近日，美國匹茲堡大學(xué)Ronald Buckanovich教授團隊發(fā)表于癌癥領(lǐng)域著名期刊Clinical Cancer Research的最新研究[1]，為克服卵巢癌耐藥帶來了希望。該研究發(fā)現(xiàn)，化療可通過激活轉(zhuǎn)錄因子NFATC4，使靜止態(tài)卵巢癌細胞分泌大量卵泡抑制素（follistatin, FST），從而促進周圍腫瘤細胞耐藥；而靶向FST在臨床前研究中逆轉(zhuǎn)了卵巢癌細胞的耐藥，并提高了卵巢癌小鼠模型的存活率和生存期。

文章首頁截圖

在腫瘤中，有部分暫停增殖、處于G0期的細胞，被稱為靜止態(tài)癌細胞。由于化療主要針對快速分裂的細胞，靜止態(tài)癌細胞由于分裂緩慢而對化療藥物耐受，既往研究已經(jīng)證明，靜止態(tài)癌細胞在多種癌癥的耐藥中扮演了重要角色[2]。

靜止態(tài)癌細胞在卵巢癌的化療耐藥中也起到重要作用[3]。Buckanovich教授團隊在此前的工作中發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)錄因子NFATC4在卵巢癌腫瘤干細胞中高表達，化療可激活NFATC4入核促進其發(fā)揮轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用[4]，從而誘導(dǎo)細胞進入靜止狀態(tài)并發(fā)生耐藥。但是，其中的具體機制尚不清楚。

因此，研究團隊這次首先通過體外實驗，鑒定出受NFATC4調(diào)控的141個靶基因，其中RCAN1, CNN1, COL3A1, FST和ANO1的mRNA表達量上調(diào)最為明顯?？紤]到FST在卵巢的發(fā)育和功能中具有重要作用[5]，并且臨床發(fā)現(xiàn)卵巢癌患者血清中的FST也出現(xiàn)升高[6]，研究團隊決定探索NFATC4下游靶點FST的作用。

體外細胞實驗證實，NFATC4確實能調(diào)控FST蛋白表達，且對高級別漿液性卵巢癌（HGSOC）患者腫瘤組織中，不同分裂速度的癌細胞進行比較時，發(fā)現(xiàn)靜止態(tài)癌細胞中FST表達量顯著增高（P<0.01），可達到快速分裂細胞的23倍，由此可見，NFATC4對FST的調(diào)控作用主要發(fā)生于靜止態(tài)腫瘤細胞中。

用化療藥物順鉑或紫杉醇處理不同卵巢癌細胞系，可導(dǎo)致FST的mRNA表達量增加10-72倍，導(dǎo)致FST的蛋白表達量增加4-50倍，且靜止態(tài)癌細胞是FST增加的主要來源，這部分細胞的FST分泌量大約是正常分裂癌細胞的3倍。

不同化療藥物（紫杉醇，Taxol；順鉑，Ciplatin）處理后不同卵巢癌細胞系FST分泌量的變化情況

同時，在卵巢癌腫瘤模型小鼠上也觀察到化療促進FST分泌的現(xiàn)象。那么這些大量分泌的FST，到底有什么用呢？

研究顯示，高濃度FST處理可導(dǎo)致體外培養(yǎng)的卵巢癌細胞數(shù)量明顯減少（P<0.001）；進一步的分析發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)ST對細胞生長的影響是由于抑制增殖，且僅對快速分裂的細胞增殖產(chǎn)生明顯作用，并不影響靜止態(tài)癌細胞。

不同濃度FST對不同卵巢癌細胞生長的影響

前面提到過，許多化療藥物主要針對的是快速分裂的癌細胞，而一旦細胞增殖速度減慢，藥效肯定會大打折扣！

果然，研究團隊發(fā)現(xiàn)FST能促進化療耐藥：與單獨使用紫杉醇相比，聯(lián)合FST處理時腫瘤細胞存活數(shù)量可提高1.5-2.5倍（P<0.05）。使用順鉑進行實驗也得到相似結(jié)果，機制分析則顯示，F(xiàn)ST可通過ATF2信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路促進化療耐藥。

值得一提的是，研究者們還通過細胞共培養(yǎng)實驗證明，靜止態(tài)癌細胞產(chǎn)生的FST可以旁分泌的方式，抑制其鄰近快速分裂癌細胞的增殖。打個比方來說，靜止態(tài)癌細胞就像花的花芯，而相鄰的細胞就像花瓣，當化療藥物來襲時，靜止態(tài)癌細胞就分泌FST來保護整個“花朵”。

在此過程中，更多的腫瘤細胞會進入靜止狀態(tài)，并進一步影響其周圍更多的細胞，越來越多的耐藥細胞也就隨之產(chǎn)生，最終導(dǎo)致癌癥復(fù)發(fā)。

FST可促進化療藥物（紫杉醇，Taxol；順鉑，Cisplatin）發(fā)生耐藥

接下來，研究團隊嘗試將FST作為治療靶點，使用FST中和抗體或CRISPR-Cas9敲除FST，均能顯著增加卵巢癌細胞對化療藥物的敏感性（P<0.01）；而為進一步評估敲除FST在體內(nèi)的作用，研究者建立了卵巢癌移植瘤小鼠模型，并用紫杉醇進行治療，結(jié)果顯示，相比野生型小鼠，注射FST-KO細胞的小鼠存活率顯著提高（P<0.0001），總生存期也明顯延長。

在化療藥物治療同時FST敲除對移植瘤小鼠存活率和生存期的影響

最后，研究團隊還比較了化療前后卵巢癌患者體內(nèi)FST的變化情況：與化療前相比，患者FST水平在化療后24小時后增加了1-3倍；而對數(shù)百名卵巢癌患者的TCGA數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)，高水平FST與較低的生存率相關(guān)，表明FST也有望作為逆轉(zhuǎn)人卵巢癌耐藥的新靶點。

總的來說，這項研究報告了一種新的化療耐藥機制，即化療可促進靜止態(tài)卵巢癌細胞表達大量FST，并以旁分泌的方式影響其鄰近腫瘤細胞的增殖和耐藥。通過敲除FST或使用FST中和抗體可提高腫瘤細胞或小鼠腫瘤模型對化療藥物的敏感性。

FST介導(dǎo)的卵巢癌化療耐藥模式圖

本次研究對卵巢癌的治療具有重要意義，化療目前仍是不可手術(shù)卵巢癌的有效治療手段，減少耐藥和復(fù)發(fā)將大大改善患者預(yù)后，而且FST是一種分泌性蛋白，因此是中和抗體的理想靶點，期待相關(guān)抗體藥物能早日被成功研發(fā)出來。