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      吸光光度法(微量組分)——知識小結(jié)篇(手寫掃描版)

       taotao_2016 2025-06-08 發(fā)布于遼寧
      光的選擇性吸收——物質(zhì)分子選擇性地吸收一定的波長的紫外或可見光時,分子中價電子會從低能級躍遷到高能級(物質(zhì)對光吸收的本質(zhì)而產(chǎn)生的分子吸收光譜(相應(yīng)于原子吸收光譜)。
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      定性/定量/結(jié)構(gòu)分析——利用物質(zhì)的紫外可見光譜及吸收程度可以對物質(zhì)的組成(定性分析,特征吸收曲線,特征最大吸收波長,特征最大吸收波長處的摩爾吸光系數(shù))、含量(定量分析、L-B定律)和結(jié)構(gòu)(有機波譜分析中常用來推斷 雙鍵等不飽和鍵是否共軛,是否有芳香環(huán))進行分析、測定、推斷。
      光吸收定律(定量分析)——溶液對光的吸收符合朗伯-比爾定律(A=-lgT=εbc),即:在一定的波長、溶劑、光強度和溫度下溶液的吸光度與溶液的濃度及液層的厚度成正比,其適用條件是平行單色光、均勻、非散射的?。ㄒ话阈∮?.01 mol/L)溶液(氣體和均勻固體也可以)。
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      穿過狹縫的透射光到達反射光柵發(fā)生衍射產(chǎn)生單色光
      可見吸光光度法可見光的波長范圍為400~750 nm,在可見吸光光度法中,待測物質(zhì)往往需要有顏色,若待測物質(zhì)本身無色或顏色很淺,則必須對它進行化學(xué)處理(如顯色反應(yīng)),使其呈現(xiàn)某種顏色(如果不用可見吸光光度法,也可以考慮使用其他非可見光波長,如紫外光),從而進行測定,提高測定的靈敏度和選擇性。

      定量分析方法—物質(zhì)含量的方法包括目視比色法和分光光度法;分光光度法需要在最大吸收波長處(靈敏度最高,非單色性影響小)和一定濃度范圍內(nèi)進行,分為標準曲線法標準品對照法(也稱為比較法,待測物質(zhì)濃度與標準品濃度接近)。

      標準(工作)曲線—如果標準系列溶液的濃度適當,測定條件合適,理想的標準曲線應(yīng)該是一條通過坐標原點的直線。在實際工作中,很多物理或化學(xué)因素可能導(dǎo)致偏離光的吸收定律,常出現(xiàn)標準曲線在高濃度端發(fā)生彎曲現(xiàn)象,給測定結(jié)果帶來誤差,如單色光不純、溶液濃度過高(可采用稀釋解決)或吸光物質(zhì)性質(zhì)不穩(wěn)定等。

      吸光度具有加和性(多組分分析)——如果溶液中同時存在兩種或兩種以上的吸光性物質(zhì),則測得該溶液的吸光度等于溶液中各吸光性物質(zhì)吸光度的總和。根據(jù)吸光度的加和性,可以在同一試樣中不經(jīng)分離同時測定兩個以上的組分。這個性質(zhì)在實際操作中有著極其重要的意義(這是目視比色法做不到的)。

      測量條件的選擇——無干擾時,“最大吸收“原則;有干擾時,“吸收最大,干擾最小”原則;當T=36.8%,或A=0.434時,濃度相對誤差Er最小,吸光度的讀數(shù)一般控制在A=0.2~0.8內(nèi),此時測量誤差較小。

      參比(空白)溶液的選擇——參比溶液用來調(diào)節(jié)儀器零點,消除由于吸收池壁及溶劑對入射光的反射和吸收帶來的誤差,并扣除干擾的影響。

      參比溶液可根據(jù)下列情況進行選擇

      ①當試液及顯色劑均無色時,可用蒸餾水作參比溶液——溶劑空白。

      ②顯色劑無色,而被測試液中存在其他有色離子,可用不加顯色劑的被測試液作參比溶液——樣品空白。

      ③顯色劑有顏色,可選擇不加試樣溶液的試劑空白作參比溶液——試劑空白。

      ④顯色劑和試液均有顏色,可將一份試液加入適當掩蔽劑,將被測組分掩蔽起來,使之不再與顯色劑作用,而顯色劑及其他試劑均按試液測定方法加入,由此作為參比溶液,這樣就可以消除顯色劑和一些共存組分的干擾——顯色空白


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