一、細(xì)胞化學(xué)染色的定義

以細(xì)胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，結(jié)合運(yùn)用化學(xué)反應(yīng)的原理對(duì)血細(xì)胞內(nèi)的各種化學(xué)成分(如酶類、酯類、鐵、蛋白質(zhì)、核酸等)作定性、定位、半定量分析的方法。 

二、常用細(xì)胞化學(xué)染色的種類及意義

重點(diǎn)：（下述內(nèi)容并未涵蓋細(xì)胞化學(xué)染色的全部應(yīng)用范圍，但卻是筆者認(rèn)為最有用的內(nèi)容，工作中若有進(jìn)一步的染色需求，可參考完整教材內(nèi)容）

1. 過氧化物酶染色（POX）：是急性白血病形態(tài)學(xué)分型中最重要、首選的常規(guī)細(xì)胞化學(xué)染色。白血病時(shí)粒為陽、單核為弱陽，淋巴為陰；嗜酸性粒細(xì)胞陽性反應(yīng)最強(qiáng)，嗜堿性粒細(xì)胞為陰性。

2. 酯酶染色：分為特異性酯酶和非特異性酯酶。特異性酯酶就是粒細(xì)胞特異性酯酶，只有粒系為陽性；非特異性酯酶就是單核細(xì)胞酶，特點(diǎn)是單核細(xì)胞為陽性且陽性會(huì)被氟化鈉（NaF）抑制，別的細(xì)胞要么是陰性要么陽性不被抑制。非特異性酯酶又根據(jù)反應(yīng)的pH環(huán)境分為了中酸堿三種類型，常用中性的α-NAE和堿性的α-NBE。

3. 糖原染色（PAS）：又稱過碘酸-雪夫反應(yīng)。常用于淋巴系白血病的鑒別，以及巨幼貧和紅系白血病的鑒別。淋巴系白血病時(shí)的淋巴細(xì)胞為陽性，巨幼貧里的紅系為陰性，紅系白血病里的紅系為陽性。

4. 中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色（NAP）：是這里面唯一一個(gè)染外周血的（其他的都染骨髓），既要報(bào)陽性率，也要報(bào)積分值。最常用于慢粒和類白的鑒別，慢粒積分下降常為0，而類白的積分增高。

5. 酸性磷酸酶染色（ACP）：用于多毛細(xì)胞白血病的鑒別診斷，多毛細(xì)胞強(qiáng)陽性，且陽性不會(huì)被L-酒石酸抑制（這一點(diǎn)可以和非特異酯酶一起記憶，一個(gè)單核細(xì)胞陽性會(huì)被氟化鈉抑制，一個(gè)多毛細(xì)胞陽性不被酒石酸抑制）。注意多毛細(xì)胞實(shí)質(zhì)是表面有絨毛狀突起的淋巴細(xì)胞。

6. 鐵染色：用于缺鐵性貧血、鐵粒幼細(xì)胞貧血、MDS的鑒別診斷。分為細(xì)胞內(nèi)鐵和細(xì)胞外鐵，缺鐵貧時(shí)內(nèi)外鐵均減少，鐵粒幼貧時(shí)內(nèi)外鐵均增多（因?yàn)樵摬∈氰F利用障礙，所以骨髓里的貯存內(nèi)外鐵反而會(huì)增多），MDS中伴環(huán)形鐵粒幼紅細(xì)胞增多的難治性貧血，其環(huán)形鐵粒幼紅細(xì)胞大于15％。

7. 蘇丹黑染色（SB）：同POX，可用于陳舊片的染色。但特異性不如POX，所以臨床多用POX。

三、一些問題

1. 為什么要做細(xì)胞化學(xué)染色？

因?yàn)樵谌鹗先旧墓撬柰科?，有些?xì)胞形態(tài)非常接近，例如原粒和原淋、中幼紅和核不偏位的漿細(xì)胞等，對(duì)于正常骨髓象來說，幾個(gè)細(xì)胞分錯(cuò)了類別也許無傷大雅，但在疾病的診斷中，就是關(guān)鍵性的問題，因此采用適宜的細(xì)胞化學(xué)染色輔助鑒別細(xì)胞類型，是臨床上必需的基本技能之一。

2. 什么是酯酶雙染？

是指在同一張涂片進(jìn)行兩種酯酶染色。一般用特異性酯酶+非特異性酯酶染色，常用組合為α-NBE+NAS-DCE，或α-NAE+NAS-DCE。我們回想一下，NAS-DCE作為特異性酯酶是針對(duì)粒系的，而α-NAE作為非特異性酯酶是針對(duì)單核系的，那么兩個(gè)一起用，就是同時(shí)針對(duì)粒、單兩系的，所以就是用于急性粒單核細(xì)胞白血病也就是M4的亞型的鑒別診斷。

3. NAP的積分是怎么計(jì)算的？

在油鏡下，連續(xù)觀察100個(gè)成熟中性粒細(xì)胞，記錄陽性反應(yīng)細(xì)胞所占百分率即為陽性率；并對(duì)所有陽性反應(yīng)細(xì)胞逐個(gè)按其反應(yīng)強(qiáng)度作出（+）～（++++）的分級(jí)，將各級(jí)所占的百分率乘以級(jí)數(shù)，然后相加，即為積分值。

假設(shè)我們現(xiàn)在對(duì)100個(gè)中性粒細(xì)胞進(jìn)行判斷。如下表所示：

100個(gè)細(xì)胞中有20個(gè)為陽性，因此報(bào)告陽性率20%，而根據(jù)計(jì)算公式報(bào)告積分值為50分。根據(jù)這種方法，以下圖為例，請(qǐng)計(jì)算該圖的積分值是多少呢？

大家可以把計(jì)算結(jié)果寫在評(píng)論區(qū)里。

本文主要梳理知識(shí)體系，后續(xù)我將專門對(duì)各種細(xì)胞化學(xué)染色的結(jié)果進(jìn)行配圖講解。

不足之處，歡迎批評(píng)指正！