藥用菌講義
發(fā)布時間:2009年3月21日 10時32分
吉林省蛟河市食用菌研究所 趙承忠 ----------------------------------藥用菌總論 藥用菌應(yīng)用在我國有著悠久的歷史,2000多年前我國出版的“神農(nóng)本草經(jīng)”就記載了靈芝、茯苓、豬苓、雷丸等多種藥用菌,如靈芝有赤芝、黑芝、青芝、白芝、黃芝、紫芝六種,紫芝甘、溫、無度,主治耳聾、利關(guān)節(jié)、保神、益精氣、堅(jiān)筋骨,好顏色,久服輕身不老,延年。茯苓滲濕利尿,健脾安神。雷丸殺三蟲,逐毒氣……除小兒百病。南北朝時陶弘景所著“名醫(yī)別錄”除記載靈芝、茯苓、豬苓、雷丸外,又增加了馬勃、蟬花的藥性和功效的內(nèi)容。以后歷代刊印的金匱要略,鬼遺方、醫(yī)宗必讀、湯液本草、本草綱目,本草綱目拾遺,本草叢新、類證本草等各類本草書都有關(guān)于藥用菌性味功效的描述。記載最為詳細(xì),記述藥用菌品種最多,并對后代影響最深的是明朝李時珍所著的本草綱目,該書記載的藥用菌達(dá)30種,詳細(xì)記述了所記各種藥用菌的產(chǎn)地、性、味、功效、服用方法。香蕈(即香菇—編者注)氣味咸平,無毒,主治胸脅逆氣,舌焦口干,利小便,久服安魂養(yǎng)神,不饑延年,止消咳,好睡,大腹淋瀝,隔中痰水,水中淋結(jié),止咳,除濕燥……益胃氣,治腎積。木耳功能療痔,除這些有正式記載的藥用菌外,民間還有許多用藥用菌治病的偏方。山東省皺縣農(nóng)村常用槐黃(Tremetes.sp)治療喉炎。云南維西縣納西族農(nóng)村用珠黃旦(竹紅菌)治療關(guān)節(jié)酸痛。湖南綏縣農(nóng)村用鬼毛針(安絡(luò)小皮傘Marasmius androsaceus)治療跌打損傷。川北和成都地區(qū)用老木菌(樹舌)治療腹水和腫瘤。云南昭通苗族人民用裂褶菌(Schizop hyllum commune)墩蛋治好婦女病。山西五合縣地區(qū)用空柄假牛肝菌、大紅菇、白乳菇、樺褶孔菌等多種藥用菌做成舒筋散,治療關(guān)節(jié)酸痛、風(fēng)濕痛。福建、浙南地區(qū)常用紅菇來調(diào)養(yǎng)產(chǎn)婦,使其多乳。這些藥用菌現(xiàn)都被收在近代出版的藥用真菌書籍中。1974年劉波編著的中國藥用真菌一書收記的藥用菌有78種,1989年中國科學(xué)院應(yīng)建浙編著的中國藥用真菌圖鑒收記的藥用菌有272種,著者統(tǒng)計(jì)我國目前的藥用菌種類有300多種,我國古代醫(yī)書記載的這些藥用菌的性、味、功效大多和現(xiàn)代的藥理、臨床試驗(yàn)結(jié)果相吻合。 我國古代雖有悠久的藥用菌應(yīng)用歷史,但當(dāng)時還不了解這些藥用菌的藥理及療效機(jī)制,全憑經(jīng)驗(yàn)應(yīng)用,所以這些藥用菌的功效沒有能得到充分的發(fā)揮,許多作用機(jī)制還不清楚,真正入藥的藥用菌只有茯苓、豬苓、雷丸、冬蟲夏草、蟬花、馬勃等。靈芝、竹黃、樹舌、裂褶菌、槐莪、樺褶孔、安絡(luò)小皮傘等大多數(shù)藥用菌只在某一地區(qū)作為偏方,草藥應(yīng)用,所以,1970年前我國藥用菌資源基本上是沒有很好開發(fā)利用的。 我國藥用菌的培養(yǎng)、藥理及臨床應(yīng)用研究是60年代開始的。研究的內(nèi)容包括野生藥用菌的馴化培養(yǎng),發(fā)酵工藝,成份分析,藥理及臨床療效觀察,至今已研究了靈芝、薄蓋靈芝、猴頭菇、云芝、密環(huán)菌、假密環(huán)菌、安絡(luò)小皮傘、竹紅菌、竹黃、樹舌、銀耳、香菇、白耙齒菌、層臥孔菌、茯苓、豬苓、冬蟲夏草、裂褶菌等近20種菌。 靈芝研究: 我國第一個用近代藥物研究方法進(jìn)行研究的藥用菌。1960年上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所首先開展了靈芝的馴化培養(yǎng),當(dāng)年獲得成功。1963年又和第二軍醫(yī)大學(xué)合作開展靈芝療效觀察。1964年北京醫(yī)學(xué)院藥理教研室開展系統(tǒng)的靈芝藥理研究。70年代開始中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物所進(jìn)行靈芝藥物化學(xué)及藥理研究。該二個單位至今還在繼續(xù)進(jìn)行靈芝藥理、化學(xué)研究,已獲得了巨大的研究成果。明確靈芝具有:(1)提高紅細(xì)胞2,3—二磷酸的量,能提高血紅蛋白親和氧的能力,提高動靜脈氧差,提高血液供氧能力,特別是對心、腦的氧供應(yīng),從而使機(jī)體具有較強(qiáng)的抗疲勞、抗衰老能力;(2)提高機(jī)體免疫機(jī)能,特別是提高T細(xì)胞的殺傷病原微生物的功能和單核巨噬細(xì)胞吞噬異常細(xì)胞、微粒等能力,包括吞噬病原菌、病毒、腫瘤細(xì)胞、微小顆粒。(3)調(diào)節(jié)體液免疫功能,使機(jī)體的免疫球蛋白偏低者恢復(fù)至正常水平,從而可以治療自身免疫性疾病,包括氣喘、紅斑狼瘡、腎炎等疾?。唬?SPAN lang=EN-US>4)解毒,能解除四氯化碳、硫酸乙酯,其他有毒物質(zhì)對機(jī)體的損害,可是有害化學(xué)物質(zhì)造成的白血球、血小板下降恢復(fù)至較高水平。(5)提高機(jī)體抗放射線的能力。(6)降低血凝。(7)消除體內(nèi)自由基,抑制自由基對正常細(xì)胞的破壞,延長動物壽命。(8)抗炎、抗過敏、抑制急性炎癥和慢性肉芽組織增生。(9)促進(jìn)DNA,RNA合成,延長體外傳代細(xì)胞分裂代數(shù)。(10)鎮(zhèn)靜、陣痛。(11)鎮(zhèn)咳、祛痰、止喘,(12)增強(qiáng)心肌收縮力及治療慢性肌肉萎縮、肌強(qiáng)直。 靈芝的有效成分,主要有:1、靈芝多糖。北京醫(yī)科大學(xué)李云芷,何云慶教授從赤芝中分離到BN3B,BN3C,并進(jìn)一步分離得到較純的多糖,測得了其結(jié)構(gòu),單糖組成和分子量,藥理實(shí)驗(yàn)表現(xiàn),靈芝多糖所表現(xiàn)的活性很可能是有多糖均一體的協(xié)同作用所致。2、腺苷甘露醇。3、甾醇類化合物。4、核苷類化合物。5、多肽氨基酸。6、三萜類化合物。 靈芝療效研究最早開展的是上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所和上海中藥制藥三廠。1971年上述二個單位接受上海市衛(wèi)生局委托開展了正式臨床應(yīng)用試驗(yàn),至1972年共試用數(shù)百例,老年慢性支氣管炎100多例,有效率75%,神經(jīng)衰弱100多例,幾乎全部有效,冠心病80多例,有效56%,此外對再生障礙性貧血病,白血球低下亦有較好的治療效果。在作口服試驗(yàn)同時,還進(jìn)行針劑治療氣喘試驗(yàn),針劑治療氣喘具有見效快,效果顯著的特點(diǎn),尤其是穴位注射,急性發(fā)病時用穴位注射,2~3小時就可以起到緩解效果,但由于當(dāng)時鄉(xiāng)村衛(wèi)生院也參與試驗(yàn),自制針劑豬舍,發(fā)生了醫(yī)療事故,因而也受到了影響,停止了注射治療氣喘病的試驗(yàn),1972年靈芝藥片應(yīng)用正式通過,同年正式臨床應(yīng)用。用靈芝做成的藥品和食品現(xiàn)有珍合靈、靈芪片、靈芝糖漿,增肌注射液等。 猴頭菇研究 1960年上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所首先馴化、培養(yǎng)成功猴頭菇。并在隨后的調(diào)查中,了解到猴頭菇有補(bǔ)胃之傳說。通過探索性試驗(yàn),初步看到猴頭菇對十二指腸潰瘍有效。1975年上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所和上海市中藥制藥三廠,上海醫(yī)藥工業(yè)研究院,上海徐匯區(qū)中心醫(yī)院,上海仁濟(jì)醫(yī)院等協(xié)作,研究藥用猴頭菇菌絲的固體培養(yǎng)方法,制劑工藝,藥理及療效。研究表明,猴頭菇菌絲有提高機(jī)體免疫功能,提高機(jī)體耐缺氧能力,促進(jìn)腸系膜微循環(huán),擴(kuò)大冠動脈流量,升高白血球,抑制腫瘤細(xì)胞生長等藥理作用。臨床上治療胃、十二指腸潰瘍,慢性胃炎和消化道腫瘤有效。并首次提出了用固體培養(yǎng)的菌絲體入藥,固體菌絲體培養(yǎng)成本低,設(shè)備簡單,效果好。1977年完成研究并投產(chǎn)。猴頭菇制成的猴頭菌片,猴頭沖劑等是目前治療消化道疾病的主要藥物。 密環(huán)菌研究 70年代初,中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所開始進(jìn)行密環(huán)菌的發(fā)酵及療效研究。結(jié)果表明密環(huán)菌發(fā)酵物具有鎮(zhèn)靜中樞神經(jīng)系統(tǒng),降低血凝,增加大腦和冠狀動脈血流量,擴(kuò)張內(nèi)耳前庭血管的功效,此外還有降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶的效果。臨床上治療眩暈,肢麻,癲癇,高血壓有良好的效果?,F(xiàn)明確密環(huán)菌能治療心血管疾病的主要有效成分為腺苷。1976年完成研究,同年批準(zhǔn)投產(chǎn)。 云芝研究 六十年代末,東北師大,東北制藥總廠等單位用深層培養(yǎng)方法培養(yǎng)云芝菌絲體,并進(jìn)行藥理試驗(yàn),研究表明,云芝菌絲體提取物對治療白血病有良好的效果。而后東北師大,長春中藥廠等單位研究發(fā)現(xiàn)云芝提取物具有提高機(jī)體免疫功能,升高白血球,減輕四氯化碳等有毒物質(zhì)對肝臟的損傷,降低放射性射線對機(jī)體的損害。臨床上可降低肝炎患者的AS2BG、GPT、TTT的量,對急性肝炎,遷延性肝炎,慢性肝炎有良好的效果。1975年由云芝子實(shí)體制成的云芝肝泰正式投產(chǎn)。以后四川抗菌素研究所從云芝菌絲體中提取云芝多糖,通過藥理及臨床研究發(fā)現(xiàn)該多糖對腫瘤有較強(qiáng)的抑制作用。重慶第五制藥廠利用其成果生產(chǎn)云芝多糖,作為腫瘤治療藥物。以后上海師范大學(xué),南京老山藥廠,上海農(nóng)業(yè)科學(xué)院相繼進(jìn)行云芝多糖的藥效研究和生產(chǎn)。國內(nèi)生產(chǎn)的云芝多糖其藥效和日本的云芝多糖—PSK—基本相同。 這幾年中研究的藥用菌還有香菇多糖、樹舌、竹黃、竹紅菌、銀耳、假密環(huán)菌、白耙齒菌、層臥孔菌、安絡(luò)小皮傘薄蓋靈芝、冬蟲夏草、槐莪。這些菌分別治療肝炎、冠心病、關(guān)節(jié)酸痛、軟化傷疤、氣喘、慢性支氣管炎、膽囊炎、冠心病、腎炎、各種神經(jīng)痛、肌肉萎縮等,提高性功能,提高機(jī)體活力,抗腫瘤等癥。藥用菌現(xiàn)在已成為醫(yī)療上的重要治療藥物。 藥用菌除了作為藥物應(yīng)用之外,現(xiàn)亦被制成多種保健食品,如胃樂舒、猴菇露、太陽神、香菇飲料、銀藻口服液、金菇露、一休菇口服液、老年健康茶、靈芝茶等。此外藥用菌亦被做成多種化妝品,如銀耳珍珠霜、霞飛增白霜、牡丹靈芝膏等。 藥用菌的有效成分: 通過近20年的研究,藥用菌的一部分有效成分已得到明確,現(xiàn)已明確的有效成分有真菌多糖,腺苷,甾體,皂甙,三萜類,氨基酸,靈芝酸,芥墩果酸等,但還有不少成分還有待研究明確。 真菌多糖 真菌多糖是和植物多糖——淀粉十分相似的物質(zhì),其主要區(qū)別是:淀粉是a型結(jié)構(gòu)的多糖,其立體結(jié)構(gòu)為線狀,或?yàn)閹睿痪哂兴幚砘钚?。而真菌多糖是一種B—型結(jié)構(gòu)的多糖,有三股單聯(lián)結(jié)成的螺旋狀結(jié)構(gòu)物。其一級結(jié)構(gòu)造成位B(1—3)(1—4)結(jié)構(gòu),或?yàn)?SPAN lang=EN-US>B—(1—3)(1—6)結(jié)構(gòu)或?yàn)?SPAN lang=EN-US>B—(1—4)(1—6)結(jié)構(gòu),具有B—(1—3)(1—6)連結(jié)方式的多糖都具有藥理活性。其二級構(gòu)造中得分枝鏈對其藥理活性亦有重大的影響,茯苓多糖是一種B—(1—3)直鏈葡萄糖聚糖并連接一些B—(1—6)的側(cè)鏈,這些側(cè)鏈的存在使其抗腫瘤活性大大下降,將這些側(cè)鏈用化學(xué)方法切除或羧甲基化則可使其具有強(qiáng)烈的抗腫瘤活性。螺旋狀的立體構(gòu)型對其活性的大小亦有重大的影響。所以,真菌多糖的藥理活性決定于其1—3級結(jié)構(gòu)的特性,因此,在提取加工時要注意加工工藝,防止其三級結(jié)構(gòu)的破壞,而使其活性下降,甚至失活。 真菌多糖有胞內(nèi)糖,胞外糖二種,這二種多糖其分子結(jié)構(gòu),特性略有差異,如云芝的胞內(nèi)糖大多為:B(1—3)(1—4)為主鏈,以B(1—4)(1—6)為側(cè)鏈,并含有30%左右蛋白質(zhì),而胞外糖為B(1—3)為主鏈,以 B(1—3)(1—6)為側(cè)鏈,不含蛋白質(zhì)的葡聚糖,子實(shí)體中的多糖構(gòu)造則為B(1—3)為主鏈,B(1—6)為側(cè)鏈,這三種多糖都有藥理活性。 一種真菌其所含的多糖是一個很復(fù)雜的體系,其中包含很多種多糖,其分子量可從數(shù)千到百萬以上,結(jié)構(gòu)上可有B(1—4)(1—6),B(1—3)(1—6),有的有分枝,有的則為直鏈狀的區(qū)別,有的能溶于中性水中,有的的易溶于酸性溶液中,有的易溶于堿性溶液中,這些在分子量、結(jié)構(gòu)、溶性特征上不同的多糖將其單體進(jìn)行藥理試驗(yàn)時會表現(xiàn)出一定的藥理活性,但如果將這些多糖配合一起應(yīng)用時往往會使其藥理活性更全面,因此認(rèn)為一個藥用菌的各種多糖相互之間具有協(xié)同作用。藥用菌對提高機(jī)體免疫功能,擴(kuò)張血管,提高血紅蛋白載氧能力,增加機(jī)體氧供應(yīng),減低機(jī)體耗氧水平功能主要是由其所含的多糖所決定的。 腺苷 腺苷是一種分子量較小的有機(jī)物,但活性很強(qiáng),其功能是降低血凝,擴(kuò)張血管,改善機(jī)體血液循環(huán),高血脂病人,血管狹窄常常會使機(jī)體血液循環(huán)受影響,從而出現(xiàn)頭暈、胸悶、記憶力衰退、美尼爾氏癥及其他一些眩暈病者,其病因是內(nèi)耳的前庭血管或別的血管血流受阻,使得平衡器官失靈,造成眩暈,嘔吐等癥,而少量的腺苷,一個成人只要服幾微克就能使前庭血管擴(kuò)張,血流順利通過而使眩暈的癥狀消失,密環(huán)菌治療眩暈癥的主要成分即為腺苷。 其他成分的效果 赤芝孢子內(nèi)酯A具有降膽固醇作用,赤芝孢子酸A具有降轉(zhuǎn)氨酶活性,靈芝堿甲、乙及乙酸化合物有抗炎活性,尿嘧啶及尿嘧啶核苷對肌強(qiáng)直癥小鼠血清醛縮酶有活性,腺嘌呤核苷具有鎮(zhèn)靜,抗缺氧,降血清膽固醇等作用,芥墩果酸具有擴(kuò)張冠狀動脈的功能,竹紅菌素具有活血化淤作用,甘露醇具有潤肺效果,三萜類具有止痛之效,麥角固醇,皂甙等有改善機(jī)體生理功能的效果。 藥用真菌無論其子實(shí)體或菌絲體均有相似的藥效,由于菌絲體生長期短,易于工廠化生產(chǎn),所以藥用菌現(xiàn)大多數(shù)用菌絲體進(jìn)行生產(chǎn)。菌絲體培養(yǎng)亦有固體菌絲體培養(yǎng)和液菌絲體培養(yǎng)二種。 藥用菌應(yīng)用、研究在國際上主要是亞洲地區(qū)。最早發(fā)現(xiàn)真菌多糖有治病之效的是1935年Kero,但當(dāng)時未引起重視,正式進(jìn)行藥用菌研究的是日本。日本進(jìn)行藥用菌研究是從本世紀(jì)六十年代開始的。首先被研究的是香菇,分析了香菇多糖的結(jié)構(gòu)、組成、藥理及臨床效果,明確香菇多糖是一種B—(1—3)—D葡聚糖和B—(1—4)(1—6)葡聚糖的混合物,分子量200萬左右,是一種線性結(jié)構(gòu)物,具有左手、右手二種三股狀螺旋,該多糖對機(jī)體具有顯著提高正常小鼠溶血素形成,保護(hù)肝臟免受化學(xué)藥物損害,對肝炎有良好治療效果,能間接抑制腫瘤細(xì)胞的生長。1985年被日本厚生省批準(zhǔn)投產(chǎn),現(xiàn)年產(chǎn)值達(dá)200億日元。1971年宮琦志雄等報(bào)導(dǎo)了從云芝菌絲熱水提取物中得到一種抗腫瘤活性的多糖,對小白鼠肉瘤有抑制作用,進(jìn)一步研究明確云芝多糖是由葡萄糖、巖藻糖、阿拉伯糖、山梨糖、戊糖組成。該多糖具有提高免疫功能,抑制腫瘤,治療急慢性肝炎的效果。1976年日本厚生省批準(zhǔn)生產(chǎn),產(chǎn)品名稱為PSK。云芝多糖在日本非常暢銷,每克多糖價(jià)格1000日元,年產(chǎn)值達(dá)500億日元,主銷日本、亦銷亞洲其他國家,幾年來,歐洲、美洲國家也開始試用。近年來日本還研究成功裂褶菌多糖,豬苓多糖。這二種多糖亦已在市場上銷售。據(jù)報(bào)道日本現(xiàn)在研究冬蟲夏草、靈芝、茯苓等多種藥用振軍。亞洲除中國、日本外,研究藥用菌的還有南朝鮮,我國的臺灣省等地區(qū)。 除亞洲地區(qū)外,現(xiàn)研究藥用菌的國家還有美國、德國、英國等國家。美國已有10多個單位進(jìn)行香菇多糖的研究,近來報(bào)道美國試用靈芝治療艾滋?。?SPAN lang=EN-US>AIDS)(HIV病毒?。┌l(fā)現(xiàn)有較好的效果。 一、靈芝 靈芝是一種傳統(tǒng)的藥用真菌,我國不少古代藥物書籍記載靈芝有延年益壽之效,可治多種疾病,民間將靈芝稱為仙草。近年來的醫(yī)藥研究表明,靈芝雖非長生不老的仙草,但其藥效確是廣泛,效果顯著,在抗衰老方面更有其特殊的功能,靈芝的培養(yǎng)及應(yīng)用已受到現(xiàn)代醫(yī)藥界的重視。 靈芝是一種高等真菌,屬擔(dān)子菌亞門,層菌綱,非褶菌目,多孔菌科,靈芝亞科。靈芝種類很多,真菌詞典記載靈芝種有104種,趙繼鼎先生編著的“靈芝”一書中記載我國靈芝有72種。不同種的靈芝其形態(tài)特征、功效均有差異。本文主要介紹紅靈芝的形態(tài)特征及培養(yǎng)方法。 二、芝分類 靈芝屬分類是根據(jù)其孢子形態(tài)特征和菌肉構(gòu)造。 a)子瓜子形……………………靈芝組 菌肉由珊瑚狀組織構(gòu)成,菌肉褐色,分層…………靈芝屬 菌肉不由珊瑚狀組織構(gòu)成……………………紫芝屬 b)子圓形或近圓形……………………假芝組 菌肉由珊瑚狀組織構(gòu)成,菌肉褐色,分層……………… 菌肉不由珊瑚狀組織構(gòu)成,菌肉不分層……………… 我國的各種靈芝種名:靈芝,海南靈芝,喜熱靈芝,黑靈芝,咖啡靈芝,弱光澤靈芝,黃靈芝,無柄靈芝,大園靈芝,松杉靈芝,內(nèi)蒙靈芝,紫光靈芝,薄樹芝,密紋薄芝,彎柄靈芝,鹿角芝,粗皮靈芝,紫芝,硬孔靈芝,閩南靈芝,黃邊靈芝,背柄靈芝,拱狀靈芝,熱帶靈芝,黃褐靈芝,傘狀靈芝,小孔栗褐芝,狹長孢靈芝,無柄紫芝,朱漆靈芝,樹舌(又叫平蓋靈芝),黃孔樹舌,南方樹舌,白皮殼樹舌,層迭樹舌,膠紋樹舌,橡膠樹舌,長管樹舌,梗皮樹舌,褐孔樹舌,長柄假芝,福建假芝,黃肉假芝,小孢假芝,黑假芝,黑漆假芝,白肉假芝,假芝,亞假芝,皺蓋假芝,光假芝,光粗柄假芝,粗柄假芝等。 三、=靈芝的形態(tài) 子實(shí)體木栓質(zhì),菌蓋腎形或半圓形,直徑3~20厘米,人工段木培養(yǎng)的可達(dá)30厘米,厚1~3厘米,黃褐色,皮殼有光澤,有環(huán)狀棱紋和輻射狀皺紋,邊緣薄或平截,菌肉褐色,營口初期灰白色,后期轉(zhuǎn)為褐色,每毫米4~5個,菌柄側(cè)生,色與菌蓋同,孢子印褐色,孢子卵形,8.5~11.5×5~6.5微米,孢子壁雙層,二層之間有小刺,孢子中央有一個大油滴。 (一)紅靈芝的生長條件 靈芝孢子的壁由于雙層、壁厚,所以萌發(fā)較困難,尤其是后期產(chǎn)生的孢子。故用孢子分離菌種時,一般都取初始釋放的孢子。在馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂培養(yǎng)基,小米、葡萄糖、瓊脂培養(yǎng)基,麥麩、葡萄糖、瓊脂培養(yǎng)基上孢子都能萌發(fā)。在上述培養(yǎng)基中加入10~20%的靈芝子實(shí)體熱水抽提掖,則孢子萌發(fā)更快。子實(shí)體抽提液的制備是將子實(shí)體剪碎,1斤子實(shí)體加12斤水,煮沸保持20分鐘,然后過濾,取其汁。孢子萌發(fā)溫度24~30℃,菌絲和子實(shí)體適宜生長溫度為25~28℃。斜面試管中菌絲緊伏培養(yǎng)基,初白色,菌絲老化后轉(zhuǎn)淺黃色至黃色,并纖維化。在木屑麥麩培養(yǎng)基上20天左右可形成菌蕾。子實(shí)體適宜生長條件為:溫度26~28℃,較充足的散射光。95%左右的空氣濕度和良好的空氣(二氧化碳含量不超過0.1%)。溫度長期低于20℃,菌蕾表面會變黃,僵化,嚴(yán)重影響生長;濕度過高,子實(shí)體表面積留水份,會產(chǎn)生霉菌??諝夂茫ǘ趸己康停?,子實(shí)體易開片,柄短,蓋厚,園整,空氣差(二氧化碳含量高)會影響菌蓋分化,柄長,呈鹿角狀。 (二)靈芝的培養(yǎng) 1菌種制備 (1)菌種純化: 想獲得理想的產(chǎn)、質(zhì)量,就要有良好的菌種。優(yōu)良菌種的標(biāo)志之一就是沒有雜菌、病毒的浸染,使靈芝菌絲體能夠得以良好的生長。 真菌性感染,其感染的孢子數(shù)量較多時,很易萌發(fā),鑒別。但當(dāng)感染的數(shù)量很少,呈潛伏狀態(tài)時,就不易檢出。細(xì)菌、酵母菌、病毒的感染更不易識別,病毒、細(xì)菌、酵母菌感染造成的減產(chǎn)往往也不易被察覺。 然而生產(chǎn)上細(xì)菌、酵母菌及病毒的感染很為普遍。筆者在檢查幾家出售的金針菇、蘑菇栽培種時,其中一家細(xì)菌性和酵母菌的感染竟是100%,另幾家也有感染。真菌性感染比例也很高。 真菌、細(xì)菌的感染只要取用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基和接種量很小的情況下,較容易檢出,病毒性感染則必須通過特定條件的培養(yǎng)方能檢出。 菌種不純,大多和檢種不嚴(yán)、培養(yǎng)料滅菌不徹底、棉花塞含有雜菌有關(guān)。因此生產(chǎn)上應(yīng)十分注意母種、原種的檢查,原種用的麥麩,米糠等飼料要新鮮,不霉變,培養(yǎng)料原料要松散不結(jié)塊,滅菌徹底,棉花塞干燥無雜菌感染,凡可能有雜菌感染的菌種應(yīng)做純度檢定和純化處理。 細(xì)菌性感染的檢查 培養(yǎng)基: 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基: 葡萄糖2.5克,蛋白胨5克,牛肉浸膏3.0克,瓊脂15克,水1000毫升。 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉湯8.0克,酵母浸膏2.0克,K2HP4 2.0克,KH2PO4 0.5克,瓊脂5克,葡萄糖5克,MgSO4 0.1克,水1000毫升。 檢查方法: 將培養(yǎng)基溶解,倒于培養(yǎng)皿中,做成平板。如果沒有培養(yǎng)皿,也可直接接種于斜面試管中檢測。 挑取待檢原種或栽培種一塊,置于無菌水中,攪碎。制成懸浮液。 用無菌吸管吸取1毫升懸浮液滴于平板上或斜面試管中,輕輕搖動,使之均勻分布于整個平面上。 將上述接種后的平面培養(yǎng)機(jī)置于28℃溫箱中。三天后觀察,若培養(yǎng)基表面有透明狀的,表面光滑的珠狀物即示有細(xì)菌感染的表示。 霉菌感染的檢查 培養(yǎng)基: 葡萄糖20克,馬鈴薯200克,磷酸二氫鉀0.5克,硫酸鎂0.2克,瓊脂20克,水1000毫升。 配制方法見菌種制種部分講義。 檢查方法同細(xì)菌感染的檢查。 酵母菌感染檢查: 培養(yǎng)基: 1蛋白胨0.5克,麥芽糖5克,磷酸二氫鉀0.3克,硫酸鎂0.2克,水1000毫升,PH3.5~4。 2蔗糖60克,氯化銨1.5克,磷酸二氫鉀0.3克,氯化鉀0.1克,硫酸鎂0.2克,蒸餾水1000毫升,PH3.5~4。 檢查方法:將培養(yǎng)基溶解,用檸檬酸(滅過菌)調(diào)節(jié)PH至3.5~4,再倒于培養(yǎng)皿中。挑原種或栽培種一塊,置于無菌水中,攪碎,呈懸浮液,吸懸浮液2~3滴于培養(yǎng)皿中,25~28℃培養(yǎng)三天后觀察,若培養(yǎng)皿中有透明狀,半球形菌落,很可能是酵母菌,置于顯微鏡下觀察,菌體生長呈芽殖狀的即酵母菌。 病毒感染的檢查: 病毒癥狀 靈芝菌絲感染病毒后,其生長的斜面菌絲上或菌種瓶壁上(原種或栽培種),其前端菌絲往往生長顯著不整齊,呈缺刻狀,在菌絲中間部分往往出現(xiàn)空斑狀,空斑內(nèi)菌絲稀、細(xì),空斑邊緣整齊呈規(guī)則狀。如果挑取空斑部分的菌絲繁殖,其繁殖的斜面或菌種瓶內(nèi),其空斑現(xiàn)象和生長前端菌絲缺刻狀現(xiàn)象會更嚴(yán)重。 菌絲感染病毒后,如菌絲幼嫩,生長條件良好,生長旺盛時,癥狀往往不能立即表現(xiàn)出來。在菌絲衰老,生長條件不良,如高溫、培養(yǎng)基含水量過低,營養(yǎng)條件很差的情況下,病毒癥狀才容易表現(xiàn)出來。因此檢查病毒時應(yīng)創(chuàng)造一種較為不良的生長條件。菌種瓶比斜面培養(yǎng)基容易檢出。 檢查方法: 培養(yǎng)基 原種培養(yǎng)基:木屑89%,麩皮10%,石膏粉1%,含水量50%。 斜面培養(yǎng)基:馬鈴薯100克(去皮),葡萄糖10克,瓊脂22克,水1000毫升。 滅菌、接種同常規(guī)。培養(yǎng)溫度先25~28℃,5天后轉(zhuǎn)30~32℃。 (2)菌種純化方法: 菌種純化就是用反復(fù)分離,挑取無雜菌部位的菌絲接種的方法,使菌種逐步純化,最后達(dá)到無雜菌,病毒感染。 培養(yǎng)基: 葡萄糖20克,馬鈴薯200克(去皮),磷酸二氫鉀0.5克,硫酸鎂0.2克,蛋白胨5克,酵母膏2克,瓊脂18克,水1000毫升。常規(guī)配制和滅菌。接種時制成平板。 接種:挑取待純化菌種的前端菌絲,置于平板培養(yǎng)基中間,挑取的菌絲塊要小,以能夠長出菌絲即可,等菌落長至6公分左右時,選菌絲生長正常的前端菌絲,挑于新的平板培養(yǎng)基上,繼續(xù)純化培養(yǎng),在前后二次平板培養(yǎng)基上都不出現(xiàn)有雜菌時,可視為已純化。 (3)雜菌的預(yù)防 純化的菌種制種時還必須注意雜菌感染,否則純化的菌種又會感染雜菌和病毒。 防止雜菌感染:A、原種菌齡要短,菌絲長到瓶底過4~5天就用。B、培養(yǎng)基滅菌要徹底。C、米糠、棉籽殼、麩皮、玉米粉等含蛋白質(zhì)豐富的飼料要新鮮,不可霉變。D、棉花塞不得染有雜菌,放置場所要清潔,干燥,滅菌時防止受潮。 (4)菌種退化 真菌是一種低等生物,細(xì)胞中的細(xì)胞核,各種細(xì)胞器如線粒體,高而基體等,以及其他有活性的內(nèi)含物的含量很容易發(fā)生變化,細(xì)胞大小也有差異。細(xì)胞核、細(xì)胞器內(nèi)含物含量的變化就會造成性狀的差異。因此在同一品種,同一菇床上采的種菇,甚至同一種菇上落下的孢子,在進(jìn)行組織分離或孢子分離獲得菌種時,不同的菌株其產(chǎn)、質(zhì)量性狀往往會有不同,有些可達(dá)極顯著的的程度。如若做定向的系統(tǒng)的選育,在不長的時間中就會產(chǎn)生二個不同的品系。這種菌種性狀變化是不定向的,也可能對人有利,也可能不利。對人不利的變化,如產(chǎn)、質(zhì)量下降,抗病力降低,我們稱之謂退化。菌種性狀退化現(xiàn)象在不良的生長條件、不良的菌種保藏方法或機(jī)械、化學(xué)傷害下最容易發(fā)生,受到損傷的菌絲細(xì)胞在正常生長條件下會自動修復(fù),在修復(fù)過程中往往會丟失某細(xì)胞成分造成退化或變異。長期分離,繁殖培養(yǎng)而又不進(jìn)行菌種選擇時,也會產(chǎn)生退化。 (5)防止菌種退化方法 A、接種時避免機(jī)械傷和燙傷,接種針、鑷子、必須充分冷卻后才可接種。菌種菌齡要短,纖維化程度低,俗稱菌絲要嫩。接種鏟口鋒利,避免接種時反復(fù)拉撕而傷害菌絲。 B、創(chuàng)造良好的生長條件,培養(yǎng)基營養(yǎng)充分,含水量、PH適中,選擇適宜的溫度培養(yǎng)。 C、菌種保藏最好選用木屑、麩皮培養(yǎng)料或糞草培養(yǎng)料的瓶裝菌種保藏,短期保藏時,溫度4℃左右,木屑、麩皮培養(yǎng)料或糞草等培養(yǎng)料是一種遲效性培養(yǎng)料,營養(yǎng)成分不會很快消耗盡,不會造成營養(yǎng)饑餓。 靈芝菌種種性的好壞對子實(shí)體形成遲早,產(chǎn)、質(zhì)量高低有很大的關(guān)系,好的菌種接種半個月就形成子實(shí)體,每瓶(750毫升)中可收15克左右;差的種,要30天左右才能形成子實(shí)體,每只子實(shí)體只重7~8克,因此,生產(chǎn)上必須注意選擇優(yōu)良菌種。 (6)菌種的分離和培養(yǎng) 培養(yǎng)極為PDA培養(yǎng)基。制作方法見制種部分。 組織分離:取菌蕾大,色白,未開片或剛開片的小子實(shí)體,于無菌箱中,用預(yù)先浸于75%乙醇中的藥棉,擠干后擦拭菌蕾表面,進(jìn)行表面消毒,然后用鋒利的解剖刀割取心部組織一塊,大小半厘米左右,置于PDA培養(yǎng)基上,25~28℃培養(yǎng),隨時檢去雜菌。靈芝菌絲幼時白色,長滿斜面,菌絲老化后就夾雜淡黃色,纖維化,菌絲緊貼培養(yǎng)基。菌種分離擴(kuò)大要在菌絲未長滿斜面,菌絲幼嫩時進(jìn)行。 試管菌種、原種的具體制備方法同香菇、木耳。 2、靈芝栽培 靈芝栽培有代料栽培和段木栽培兩種。代料栽培完全在人工條件下進(jìn)行,生長條件適宜、營養(yǎng)豐富,子實(shí)體生長快。段木栽培,菌絲、子實(shí)體生長慢,但所長子實(shí)體堅(jiān)、子實(shí)體大。目前,段木栽培的靈芝子實(shí)體價(jià)格高于代料栽培的子實(shí)體。 1)代料栽培 代料栽培就是用人工配制的培養(yǎng)料栽培靈芝??梢栽耘囔`芝的培養(yǎng)料非常多,凡含有纖維素、木質(zhì)素的木屑、棉籽殼、秸稈類材料,再配以蛋白質(zhì)含量較高的麩皮、米糠、玉米粉等原料都可培養(yǎng)靈芝。常用的代料配方有: A、木屑、麩皮培養(yǎng)料 木屑73%、麩皮25%、蔗糖1%、石膏粉1%,含水量(紅靈芝栽培下同)58%左右。 B、棉籽殼、玉米粉培養(yǎng)料 棉籽殼74%、玉米粉24%、蔗糖1%、石膏粉(或碳酸鈣)1%,含水量60%。 培養(yǎng)基配制好后應(yīng)馬上裝瓶滅菌,尤其是夏天,溫度高,有水分的培養(yǎng)料很容易發(fā)酵、變質(zhì)。 培植培養(yǎng)基用的木屑要沉,最好經(jīng)過半年以上時間的堆積,麩皮、米糠、玉米粉、棉籽殼要新鮮,不能霉變。棉籽殼最好在配料前先暴曬2~3天。 代料栽培有瓶栽和代栽兩種,瓶栽是將代料裝于菌種瓶中,子實(shí)體從瓶口長出。代栽是將料裝于塑料袋中,讓子實(shí)體從袋口或開口處長出。 1)瓶栽: 瓶子規(guī)格:瓶口直徑3.2厘米,容積750毫升的菌種瓶。 瓶口直徑3.8公分,容積850毫升的菌種瓶。 瓶口直徑4.5公分,容積1000毫升的菌種瓶。 瓶口、容積小的瓶子,子實(shí)體也??;瓶口、容積大的瓶子,子實(shí)體也大。但瓶口過大,表面培養(yǎng)料水分容易蒸發(fā),干涸,影響子實(shí)體生長。瓶口大的瓶子,接種后在瓶口上應(yīng)用有孔的塑料薄膜包好,以避免水分的蒸發(fā)。 裝料要求:裝料要注意松緊度,750毫升的瓶子應(yīng)裝干培養(yǎng)料200克左右,裝到瓶肩為止。培養(yǎng)料離瓶口不宜距離太多、太少。距離太多,形成的子實(shí)體菌柄長,商品價(jià)值低;距離太少,培養(yǎng)料水分容易蒸發(fā),菌蕾一形成就接觸棉塞,妨礙其生長。 培養(yǎng)料的滅菌、接種、培養(yǎng)同常規(guī)(參見制種部分) 栽培管理 栽培室要求:有較好光線,瓶子排放后能達(dá)到500勒克斯左右的光強(qiáng),光線均勻,能通風(fēng)換氣,并能保持空氣的濕度,一般栽培室要求深不超過8米,二端有較多的玻璃窗,如果是平房,屋面最好開1~2扇天窗,對著瓶架走道的墻上,上、下方各開1.5平方市尺的窗,地面要鋪水泥。 當(dāng)培養(yǎng)瓶中的菌雷將要接觸棉塞時,拔去棉塞,移入栽培室培養(yǎng)。 培養(yǎng)靈芝瓶子可放在地上或架上,橫臥或直放。橫臥可不用架子,一般可疊12~13層瓶子,采收也方便。室內(nèi)栽培靈芝應(yīng)控制好溫、濕、氣、光四個條件。 溫度:在菌蕾期,溫度要控制在25~28℃范圍內(nèi),不能長期低于20℃或高于32℃,否則,子實(shí)體和菌絲表面會萎黃,子實(shí)體僵化。菌絲和子實(shí)體生長時會放出熱量,使室溫升高,所以當(dāng)氣溫高于28℃時,室內(nèi)栽培瓶的密度不能過大,橫放的栽培瓶、每隔3~4層應(yīng)放空瓶一層,以利散熱。氣溫低于20℃時,栽培瓶的密度應(yīng)增加,以使室溫提高,溫度過低時,可在瓶上蓋塑料薄膜,以提高小氣候溫度或者加溫。 濕度:子實(shí)體生長所需要的水分主要來自培養(yǎng)料,當(dāng)空氣濕度達(dá)到足夠濕度時,可以不必在子實(shí)體上噴水,空氣相對濕度要到到90~95。空氣濕度低,幼嫩的子實(shí)體會失水,使子實(shí)體生長遲緩或僵化。因此,整個栽培時間栽培室地面要始終保持濕潤,空中每天噴霧2~3次。 空氣:靈芝子實(shí)體對空氣中二氧化碳非常敏感,空氣不良,子實(shí)體不易開片,成長的 子實(shí)體片小,這樣的子實(shí)體商品質(zhì)量低,但產(chǎn)量較高,內(nèi)在多糖含量比開片好的子實(shí)體高,以提取多糖為目的時,宜在稍高二氧化碳含量條件下培養(yǎng)。但以商品子實(shí)體為目的來培養(yǎng)時,宜在二氧化碳較低的條件下進(jìn)行。一般培養(yǎng)室每天應(yīng)通風(fēng)2~3小時,若開片遲緩,說明通風(fēng)不良,應(yīng)加大通風(fēng)量。 光線:室內(nèi)光線保持在100~500勒克斯之間,并要求四面光線均勻,否則子實(shí)體會向光源的方向生長而造成畸形。 2)袋栽: 塑料袋規(guī)格:17×33公分或15×55公分二種。 制袋方法: 17×33公分塑料袋制種,用手工方法或裝袋機(jī)將培養(yǎng)料裝入袋中,然后用3.2公分直徑的頸套套于袋口外,將突出頸套的塑料袋口倒翻,用線或橡皮筋扎住袋口,塞好棉塞,滅菌。 15×55公分大袋制袋,用裝袋機(jī)或手工裝料,裝好后將袋口扎緊,在袋上用錐形鐵棒戳一個2公分直徑的洞,貼上醫(yī)用橡皮膠,然后滅菌。 塑料袋培養(yǎng)料滅菌 塑料袋培養(yǎng)料可以用高壓滅菌鍋滅菌,也可用常壓土鍋滅菌,土鍋滅菌塑料老化程度低,袋子不會損壞,因袋破而引起感染的機(jī)會少。 塑料袋培養(yǎng)料的高壓滅菌: 塑料袋裝鍋時,袋與袋之間應(yīng)留有空隙,以利熱空氣進(jìn)入。滅菌時,起溫降溫要求緩慢,開始加溫時放氣閥門要打開,等溫度達(dá)到105℃侯(壓力0.5公斤/平方厘米),再關(guān)閉閥門。再緩慢起溫,二小時后,達(dá)到1.5公斤/平方厘米,維持二小時,再讓其自然降溫,待壓力降至零點(diǎn)后,打開鍋門,將塑料袋拉進(jìn)接種室。 常壓土鍋滅菌:滅菌鍋內(nèi)應(yīng)有多層的塑料袋架,層距可平放二個塑料袋,塑料袋之間應(yīng)留有空隙,以利熱氣進(jìn)入,滅菌要求100℃、10小時,滅菌結(jié)束后打開鍋門,等溫度降至50~60℃時,將塑料袋運(yùn)到冷卻室冷卻,再接種。 塑 料袋的搬運(yùn):應(yīng)捧住袋身搬運(yùn),動作要輕,不可放在有刺、棱角的盛器內(nèi)以免塑料袋破裂,刺破。有條件的單位,可以特制專用的周轉(zhuǎn)箱,培養(yǎng)料裝好后就直接裝于周轉(zhuǎn)箱中。放于周轉(zhuǎn)箱中,滅菌、接種、直接放上培養(yǎng)架時才將裝料塑料袋取出周轉(zhuǎn)箱。 接種:培養(yǎng)料滅菌冷卻后應(yīng)馬上接種,氣溫較低時,應(yīng)在培養(yǎng)料尚有余溫時(35℃左右)接種,氣溫較高時,在袋溫降至室溫后馬上接種,推遲接種會增加雜菌感染機(jī)會。17×37公分塑料袋接種,菌種從頸套口放入。15×50公分塑料袋,邊在袋身上打孔,即用1.2公分直徑的錐形鐵棒在袋身上戳一個空,每袋戳4~5個孔,然后將菌種從孔中接入,再在孔上貼3公分左右見方的橡皮膠,封住袋口不使雜菌侵入,接種后放入培養(yǎng)室培養(yǎng)。培養(yǎng)條件和瓶裝菌種相同。 栽培:17×37公分塑料袋的栽培方法和瓶裝菌種相同。15×50公分塑料袋的栽培是在菌絲長好后,將貼在接種孔上的橡皮膠拉起,并移入栽培室。栽培室要求與瓶栽相同。移入栽培室后,保持95%左右的空氣濕度,少通風(fēng),保持穩(wěn)定的條件,促使長出菌蕾。菌蕾長出后的栽培方法同瓶栽。 2段木栽培 段木栽培靈芝有普通段木栽培和熟料段木栽培兩種。 A、普通段木栽培用1米左右長的段木,鉆穴,接上菌種,以及發(fā)菌管理,使段木上長出靈芝。栽培過程分制種、段木準(zhǔn)備、接種發(fā)菌、埋菌棒和管理等幾個過程。 制種:段木接種用的菌種可以用普通木屑、麩皮菌種(制種方法同原種),最好用木塊菌種,在水份、濕度、溫度變化較大的情況下,木塊菌種能比木屑菌種表現(xiàn)出更大的抗逆性,菌種不易衰老、死亡。制菌種用的木塊,要求質(zhì)地堅(jiān)硬,樹皮較薄,常用的有桑、槐、懸鈴木等。用其枝條剪成長1.5厘米,直徑1.2厘米的小圓木塊,平時曬干貯藏,制種時將其放入營養(yǎng)液中(100毫升水中加蔗糖2克,麩皮或米糠5克)煮沸,到木塊心部有水痕時撈起,按4:1的比例將木塊與常規(guī)制種用的木屑、麩皮培養(yǎng)料混合。裝入瓶中,并用常規(guī)料覆蓋于培養(yǎng)料的表面,壓平,滅菌,接種。培養(yǎng)同常規(guī)制種。菌絲長到瓶底后再過10天左右菌絲可長入到木塊心部,就可用于接種。 段木準(zhǔn)備:一般闊葉樹段木均能栽培靈芝,但以木質(zhì)較堅(jiān)硬的樺樹、櫟樹、野櫻桃,懸鈴木、楓香等樹種比較理想。段木直徑要求8~15厘米,長一米左右,一般在2~3月份伐樹,然后截去樹枝,放于陰涼處,使水份慢慢蒸發(fā),接種時,段木含水量以37%~40%為宜,斷面處應(yīng)有細(xì)的裂紋。如樹皮顏色較淺,含水量過低,接種前應(yīng)將段木放于水中浸1~2天,含水量高,手拿覺得較重,可將段木放在太陽下曬1~2天。接種時的段木要求完全枯死,段木若在發(fā)菌期或埋土后返青發(fā)芽,已生長的菌絲會死亡。 接種:南方地區(qū)以4月上、中旬為宜,東北地區(qū)則以2月下旬—3月上旬之間接種為宜。接種過早,氣溫低,菌絲長不好并會僵化;接種過遲,首批長的靈芝會遇到盛夏高溫,子實(shí)體長不好,甚至死亡。接種時,工具、盛器要用高錳酸鉀溶液消毒,環(huán)境清潔,菌種瓶口用酒精擦過。挖出來的菌種要及時接種掉,不可讓其干萎影響其生活力,鉆好接種穴的段木也要及時接好種,上堆,用塑料薄膜蓋好,不可讓種穴干燥,影響菌絲定植,挖出來的菌種和打好接種穴的段木未能及時接種掉就應(yīng)用塑料薄膜把其罩住,防止水份散失。接種穴用電鉆或皮帶沖鉆穴,穴略小于菌塊,使接種塊能塞緊接種穴。穴距8~10厘米,行距6~8厘米。接種方法是:從瓶中挖出菌種,剝?nèi)ケ砻婢?,先用少量的木屑填入穴?nèi),然后再塞上菌種塊,用榔頭敲緊,,邊鉆穴,邊接種,接種后立即堆制,用塑料薄膜蓋好。 堆制發(fā)菌,段木接種之后隨即堆制,堆法是:一層段木橫放,一層直放,堆高為3~4市尺,寬度為一根段木的長度,堆長不限,堆周圍用塑料薄膜覆蓋,底部用磚木壓緊,密封,陽光強(qiáng)烈是塑料薄膜外覆蓋草簾,減少陽光,堆溫保持25~28℃,晚上蓋好草簾保溫。7天后翻堆,將上下、里外的段木相互調(diào)換位置,使得每根菌棒接受到相同條件,發(fā)菌均勻。第一次翻堆后低部塑料薄膜仍密封,7天后再如上法翻堆,但底部塑料薄膜不必著地,稍留空隙,增加空氣進(jìn)入,以后的翻堆每隔3~4天翻一次,見段木樹皮成淺白色,變干,翻堆時要適當(dāng)噴水,待樹皮上無水跡時再覆蓋薄膜。如見有雜菌,可將薄膜揭起,吹風(fēng)降濕度,,一次揭起1~2小時,抑制雜菌生長。如有個別段木雜菌嚴(yán)重,可將其撿出另外放置。一個月后,菌絲已深入木質(zhì)部,即可埋菌棒。 埋菌棒:埋菌棒就是將菌絲已經(jīng)定植的段木埋入畦土之中,開好排水溝,上面搭好遮雨、遮陽光的蔭棚,保持土壤濕潤,使子實(shí)體從土中長出。具體要求是:畦寬1.5米左右,挖去畦表土3寸左右,底土上灑殺蟲劑六六六粉或濃氨水,或其他農(nóng)藥,撒上一薄層土將農(nóng)藥蓋沒,然后排放一層菌棒,菌棒間隔1指寬,中間用細(xì)土填實(shí),不留空隙,否則菌棒易上雜菌,然后表面再蓋3~4公分后的細(xì)土,二畦之間要開好排水溝,溝底要低于菌棒底部。 埋菌棒的季節(jié)要在氣溫達(dá)25℃左右時才可,南方地區(qū)要求4月底至5月初。東北地區(qū)要在5月中下旬為宜。 搭蔭棚,蔭棚可高,可低,只要能防雨,遮陽即可。這里講的是一種低蔭棚,成本低,方法是在畦四角豎1尺左右長的竹竿,相互之間用橫竹竿連結(jié),然后頂上鋪一層塑料薄膜,再蓋草簾即可。 水份管理:表層土壤濕度要求保持在18~20%的含水量,即用手捏得扁,不粘手,一般晴天一天盆1~2次水,噴霧要細(xì),不可撥澆,防止水流到下面菌棒上,菌棒太濕,菌絲容易衰老死亡,段木變黑。畦面有雜草應(yīng)隨時拔去。冬天,土壤保持濕潤,不發(fā)白即可(含水量14%左右),為防止水分過干,可在畦上蓋一層稻草。第二年氣溫20℃以上,子實(shí)體可生長時,去掉覆蓋稻草,土壤噴水,保持子實(shí)體要求的水份,讓子實(shí)體生長。段木栽培靈芝南方可連長2~3年。東北則是只長當(dāng)年。 B、短段木熟料栽培: 段木種類同普通段木栽培,粗細(xì)10~15公分,長15公分左右,含水量37~40%。 裝箱滅菌:用木條釘制成長60公分、寬40公分、高15公分的木箱,或用耐高溫的塑料制成相同于木條箱大小的塑料周轉(zhuǎn)箱,于箱中先放一只和箱大小相同的塑料袋,將短段木立放于箱中,段木之間用85%木屑,15%麥麩,含水量50%的培養(yǎng)料充實(shí),袋口褶蓋于段木表面,置滅菌鍋中,先60℃2小時,再100℃12小時,然后取出滅菌鍋,冷卻。于接種室中揭開塑料袋口,將木屑、麩皮培養(yǎng)料菌種撒放段木表面,再將袋口依舊褶蓋好段木,25~28℃培養(yǎng)。菌絲長好后立埋于土中栽培,復(fù)土厚度,土壤含水量及管理與普通段木栽培相同。 (2)靈芝的采收、烘干 菌蓋邊緣淺黃色帶即將消失時可采收。過早采收子實(shí)體重量輕,子實(shí)體過熟,多糖含量低,質(zhì)量下降,但目前商品收購上多不用多糖含量多少來衡量而是以子實(shí)體的厚度、大小來分級。老熟的子實(shí)體因木栓化程度高,烘干后收縮量小,結(jié)果老熟后采收的子實(shí)體比近成熟時采收的子實(shí)體外觀質(zhì)量為優(yōu)。 子實(shí)體采收后可放在陽光下曬干,也可用烘箱烘干,烘溫要求40℃2小時,再52℃2小時,在62℃烘干。 烘干后的子實(shí)體用塑料袋包裝,防止受潮。靈芝子實(shí)體很容易長各種蛀蟲,可把靈芝蛀空,長期保存靈芝可用糧食熏蒸用的磷化鋁藥劑熏蒸,熏蒸方法是:每立方米用量3~6克,溫度20℃以上需密閉3~4天,16~20℃需4~5天,低于16℃需7天,熏蒸完畢通風(fēng)5~7天,因是劇毒劑,所以熏蒸必須完全密封,人畜隔離,然后再密閉保存,一年后仍沒有處理,則應(yīng)繼續(xù)用磷化鋁熏蒸殺蟲一次。 三、猴頭菇 猴頭菇(Hericium erinacius (Bull) Pers·),屬多孔菌目,齒菌科,猴頭屬,猴頭菇是一種著名的食用菌,又是療效價(jià)值極高的藥用菌,具有提高機(jī)體免疫功能,提高小鼠耐缺氧能力,加速腸系膜微循環(huán),抑制腫瘤細(xì)胞生長,擴(kuò)大冠狀動脈流量等多種藥理活性,臨床上治療消化道潰瘍、胃竇炎、慢性胃炎、胃悶脹、胃痛等病,有效率達(dá)85.2%,治療消化道腫瘤有效率69.3%。猴頭菇的產(chǎn)品有干猴頭菇、猴頭罐頭、猴頭菇藥品(猴菇菌片等),猴頭菇保健食品(胃樂舒、太陽神、猴頭露等)。全國大多數(shù)省均產(chǎn)猴頭菇,著名的有常山縣微生物廠、山西寺頭菌種廠等,全國年產(chǎn)猴頭數(shù)千噸。 (一)生物學(xué)特性 1、形態(tài)特征: 子實(shí)體塊狀,直徑5~10厘米,不分枝,肉質(zhì)軟和,鮮時白色,干燥時變黃色至褐色,菌刺覆蓋整個子實(shí)體表面。刺的長短與生長有關(guān),一般長1—5厘米,呈圓柱形,尖端尖銳或略帶彎曲,刺粗1—2毫米,子實(shí)層生于刺的表面,孢子白色,球形至近球形,直徑5—6微米,表面平滑,內(nèi)含一個油滴。 猴頭菇屬常見種有猴頭菇、假猴頭菇、珊瑚狀猴頭菇三個種。它們的主要區(qū)別是:猴頭菇子實(shí)體塊狀、不分枝。假猴頭菇子實(shí)體分枝,均勻懸于小樹枝等下側(cè),珊瑚狀猴頭菇子實(shí)體分枝,成叢生狀。 猴頭菇菌絲在馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂培養(yǎng)基上,菌絲匍匐,線粒狀,白色,基內(nèi)菌絲發(fā)達(dá)。猴頭菇菌絲壁薄,嫩、有橫隔,有鎖狀聯(lián)合。但猴頭菇菌絲在不同培養(yǎng)基培養(yǎng)時,常表現(xiàn)出多態(tài)性,例如在通風(fēng)良好,含氮量較高的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時菌絲就表現(xiàn)為細(xì)、密、稍有氣生菌絲。 培養(yǎng)菌絲在干燥、高溫等不良條件或菌齡長時,細(xì)胞中的養(yǎng)份會集中轉(zhuǎn)移到一個細(xì)胞中,結(jié)果這個細(xì)胞就特別巨大,貯藏的養(yǎng)份特別多,壁厚,呈休眠狀,所以能抵抗高溫,干燥的不良條件,此種細(xì)胞名叫厚垣孢子。厚垣孢子的二端營養(yǎng)細(xì)胞全部收縮,死亡。在適宜的條件下,厚垣孢子又會萌發(fā)出菌絲,繼續(xù)進(jìn)行其生長繁殖。 在自然界中,猴頭菇大多長在柞樹、櫟樹、胡桃等樹的枯死處。一般都長在樹干的中上部,有時亦長在倒木上。猴頭菇多長于森林不太稠密,空氣較為流通,濕度較高的環(huán)境中,一般都在8~9月份,氣溫16~18℃時生長。 2、 菇生長條件: 營養(yǎng)條件:猴頭菇是一種木材腐生菌,可以生長在含有蛋白質(zhì)的木質(zhì)素、纖維素、半纖維素的植物殘?bào)w上,如段木、倒木上,或生長在含有一定數(shù)量的麩皮(或米糠、玉米粉)的作物秸稈、甘蔗渣、酒糟、中藥渣、玉米芯的培養(yǎng)料上。對尿素硫酸銨利用能力較差,不能利用硝態(tài)氮。在有機(jī)氮含量豐富的培養(yǎng)基上,菌絲密、線。 溫度:猴頭菇是中溫性真菌。菌絲生長溫度6~30℃,25℃左右菌絲生長最為適宜,子實(shí)體生長溫度為18℃左右,20℃以上子實(shí)體形成受明顯影響。25℃以上子實(shí)體基本不能形成,低于6℃時子實(shí)體停止生長。溫度高,球塊小,松;溫度低,刺短,球塊件事,低于12℃時,子實(shí)體往往呈橘紅色。 水份:水份是一切生物賴以生存的必要條件之一,猴頭菇分泌的胞外酶的活動,營養(yǎng)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸,一切生命活動都必須在含一定比例的水份條件下進(jìn)行。但水分含量不能過多,過多的水份會影響營養(yǎng)基的通氣,影響菌絲呼吸,水份過多,菌絲的抗逆能力下降,也容易自溶。 猴頭菇的適宜含水量和培養(yǎng)基的松緊度有密切的關(guān)系,培養(yǎng)基堅(jiān)實(shí)的含水量應(yīng)低,培養(yǎng)基疏松的,含水量應(yīng)高。木屑、米糠培養(yǎng)基含水量要求58%左右,甘蔗渣、麩皮培養(yǎng)基含水量要求72%,含水量低,菌絲細(xì),生長緩慢,但菌絲不易衰老。含水量高,菌絲容易衰老,生命力差。用葡萄糖等分子量低,水溶性物質(zhì)作培養(yǎng)基時,其濃度不可過高,濃度太高,會使?jié)B透壓上升,造成細(xì)胞脫水而死亡或不能生長。PDA培養(yǎng)基葡萄糖含量不要超過6%。木質(zhì)素、半纖維素、纖維素等非水溶性的高分子物質(zhì),因?yàn)椴蝗苡谒?,所以不會提高滲透壓。培養(yǎng)基中纖維素等含量較多時,也不會影響菌絲的生長。 猴頭菇子實(shí)體很鮮嫩,表面沒有角質(zhì)、革質(zhì)或臘質(zhì)的保護(hù)組織,為裸露狀,本身含水量又高,所以很容易蒸發(fā)水份,因此,對空氣濕度很敏感。當(dāng)空氣濕度低于70%時,自是體表面很易失水,表面干萎,刺生長也受抑制,產(chǎn)量低,空氣濕度高于95%時,子實(shí)體易畸形,刺粗,球塊狀,嚴(yán)重時產(chǎn)生分枝,最適宜的空氣濕度是90%~95%。 空氣,猴頭菇子實(shí)體生長對空氣中二氧化碳很敏感,二氧化碳含量低,在0.03~0.1%之間,子實(shí)體堅(jiān)、白、球大;空氣二氧化碳含量超過0.1%,子實(shí)體松,單個重量明顯輕。采收后,再生能力也差。高二氧化碳對猴頭菇子實(shí)體的影響往往不易被察覺,但如果二種二氧化碳含量對比試驗(yàn)時,就很容易發(fā)現(xiàn)產(chǎn)量的高低。 光線:猴頭菇菌絲在黑暗和有光的條件下均能生長,在黑暗條件下生長更快,子實(shí)體生長要求有一定的散光,50~200勒克斯為好,光線過強(qiáng),生長反為不良。 酸堿度:猴頭菇菌絲再PH5.5左右,生長最好,PH7以上,PH4以下生長不良,PH2以下,PH9以上時,菌絲完全不能生長。 猴頭菇菌絲在生長過程中會分泌有機(jī)酸。所以在生長過程中隨著時間的延長,培養(yǎng)基會逐漸酸化,所以培養(yǎng)基中要求添加CaCo5,以緩沖酸度的下降。 1、 猴頭菇的培養(yǎng): 培養(yǎng)基:木屑、棉籽殼、甘蔗渣、山上長的野草、作物秸稈、中藥渣、酒糟均可作為木材代用品栽培猴頭菇,各地菇農(nóng)可根據(jù)當(dāng)?shù)貤l件因地制宜采用。 下面幾種配方是目前生產(chǎn)上使用較多的培養(yǎng)基: 棉籽殼40%,木屑35%,麩皮13%,米糠10%,碳酸鈣1%,蔗糖1%,含水量60%。 甘蔗渣78%,麩皮20%,蔗糖1%,石膏粉1%,含水量60%/。 鋸木屑78%,麩皮20%,蔗糖1%,石膏粉1%,含水量60%。 鋸木屑70%,米糠28%,蔗糖1%,石膏粉1%,含水量60%。 豆桿粉78%,麩皮20%,蔗糖1%,石膏粉1%,含水量60%。 裝瓶(袋)滅菌:培養(yǎng)基配制后當(dāng)天裝瓶(袋),當(dāng)天滅菌。750毫升的瓶子應(yīng)裝400~420克鮮料,17×37公分的袋應(yīng)裝鮮料2斤,裝到瓶肩為止,裝好后表面壓平,再用1.2公分直徑的錐形棒戳一個洞,瓶口用4層報(bào)紙或一層牛皮紙加二層報(bào)紙封扎,塑料袋用頸套,塞棉塞,1.5公斤/平方厘米蒸汽壓×2小時滅菌。滅菌后的冷卻,接種,培養(yǎng)方法同靈芝。培養(yǎng)溫度25℃左右。菌絲長到大半瓶,表面開始形成子實(shí)體后,可將形成菌蕾的瓶子移到栽培室培養(yǎng)。 栽培室:栽培室大小、窗戶的設(shè)置要求同靈芝栽培,和靈芝栽培室不同的方面:光線科較暗,能看得清物即可。保濕條件比靈芝要好,要能經(jīng)常保持90~95%的濕度,空氣要求新鮮,通風(fēng)要求,不宜直接吹風(fēng),所以窗宜多一些。 管理:形成菌蕾的瓶子或塑料袋移入栽培室后應(yīng)隨即去掉包扎的封口紙或棉塞,不是封口紙或棉塞接觸菌蕾。 瓶子或塑料袋移入栽培室時應(yīng)以一定的規(guī)則排放,使生長的子實(shí)體能獲得良好的空氣和散光。 排放要求:每行寬為二瓶(二袋),底和底相靠,口向外,長不限,高為12~13瓶獲9~10袋,每二行留一條走道,走道寬70公分,走道應(yīng)與窗口對準(zhǔn)以利通風(fēng)。 空氣濕度:栽培種剛脫去封口紙時菌蕾還幼嫩,不耐干燥,故要求空氣濕度達(dá)95%左右,當(dāng)子實(shí)體長出刺后,空氣濕度應(yīng)保持在85~90%??諝鉂穸壬缘?,可是菌刺生長受抑制,能提高猴頭菇質(zhì)量。保持濕度的方法是人工噴霧活用定時器控制的空壓機(jī)噴霧,1天噴3~4次。霧要向空中噴,不宜直噴于子實(shí)體上。 溫度:要求保持在16~18℃,不宜超過22℃,當(dāng)氣溫較高時,白天應(yīng)關(guān)門,噴霧,晚上開足門窗。控制溫度的主要措施是安排好栽培季節(jié)。上海地區(qū)適宜的制種季節(jié)為10月上旬,出子實(shí)體的季節(jié)為11月上旬至次年的3月。 通氣:空氣二氧化碳含量對子實(shí)體的生長有決定性的影響??諝饬己?,球白、堅(jiān)、產(chǎn)量高,空氣不良,球色暗,松、產(chǎn)量低,每天應(yīng)開窗2~3次,每次2~3小時。 4、采收:子實(shí)體球塊已基本長大,菌刺長約1公分時及時用鉤刀從袋口或瓶口中鉤出,隨即清除培養(yǎng)基表面殘老菌絲,以防生霉,生蟲,栽培種仍放于原處培養(yǎng)再次生長子實(shí)體,每瓶(袋)可收4~5次。
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