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      凝血試驗的影響因素

       angelzhang69 2015-09-26



      凝血試驗的影響因素


      前言
      首先,我們必須認識到,血栓與止血試驗結(jié)果錯誤的發(fā)生大多來自分析前,因此保證止凝血試驗標本的質(zhì)量對實驗結(jié)果準確性的是非常重要的。
      凝血檢測項目的標本準備
      一、病人自身的準備及影響因素
      二、標本采集
      三、標本運輸及儲存
      四、標本的處理


      病人自身的準備及影響因素


      1、年齡:以年齡不同所確定的參考范圍解釋新生兒和嬰兒的止凝血試驗結(jié)果非常重要,有很多學(xué)者報道了年齡與性別對血小板功能和凝血活性的影響。

      2、身體狀態(tài),疾病、月經(jīng)期、妊娠期、貧血和紅細胞增多癥等。

      3、藥物:國外學(xué)者曾研究了門診病人服用藥物對臨床檢驗項目的影響。用一種藥時,受藥物干擾的實驗占有的百分比為7 %;服用兩種藥時,百分比為16.17 %;服用三種或四種藥時,百分比為66.17 %;當(dāng)病人服用5 種藥時,受干擾的實驗所占的百分比為100 %。

      當(dāng)檢驗結(jié)果與臨床狀態(tài)不符且患者無其它并發(fā)癥,實驗室質(zhì)控合格時, 可考慮一下藥物的影響
      各檢驗結(jié)果間的相關(guān)性上鑒別,如FIB與PT、APTT和TT之間,F(xiàn)DP與D-二聚體之間存在有一定的相關(guān)性,當(dāng)這種相關(guān)性出現(xiàn)異常時,可考 慮一下藥物干擾。


      4、生活習(xí)慣:吸煙可使血漿纖維蛋白原、vWF和其他凝血因子水平增加,并可使凝血酶生成及血小板激活增加; 要戒煙呀!

      5、季節(jié)變化:清晨血小板最易激活,心肌梗死的發(fā)病率最高;寒冷季節(jié),血凝活性增加,使心肌梗死和猝死的發(fā)病率增加。

      6、ABO血型:O型血患者較其他血型患者血漿vWF和因子Ⅷ活性低。


      標本的采集


      1、患者在采血前應(yīng)處于靜息狀態(tài)或抽血前有15-30分鐘的休息。 劇烈活動可激活血小板和凝血系統(tǒng)。

      2、采血技術(shù)或采血過程的影響。采血應(yīng)做到一針見血。當(dāng)壓脈帶時間超過一分鐘,一方面引起血細胞和血凝蛋白濃度增高;另一方面可引起血凝系統(tǒng)因子Ⅷ和組織纖溶酶源激活劑(t-PA)釋放和活化。采集完畢后立即與抗凝劑混勻,同時要避免用力振搖。

      3、采血的部位:標本采集嚴禁在輸液管中采血,特別是輸入肝素時或附近進行。

      4、血凝管影響 血凝管的使用要標準化即使用硅化玻璃管,可避免內(nèi)源性接觸途徑的激活。普通玻璃管影響最大的是Ⅷ因子的活性,可使其明顯降低。 醫(yī)院一定要選用質(zhì)量合格的血凝管產(chǎn)品。

      5、抗凝劑濃度的影響。美國國家臨床實驗室標準化委員會(NCCLS)的血凝實驗指南H21-A3推薦血凝試驗的抗凝劑為枸櫞酸鈉,配制濃度為3.13%(0.105mol/L)或3.2%(0.109mol/L),它能有效地阻止因子Ⅴ和Ⅷ的活化。
      血:抗凝劑(9:1)。
      如果患者的Hct大于55%或低于20%應(yīng)使用下述公式校正枸櫞酸鈉的用量:抗凝劑量(ml)=0.00185×血量(ml) ×(100-患者紅細胞比容)。

      6、標本顏色的影響:

      實驗表明:肝素、膽紅素、甘油三酯對試驗均有干擾,當(dāng)血紅蛋白> 150mg/ L ,肝素> 1 mg/ L ,總膽紅素> 19.6mg/ dL ,甘油三酯> 1022mg/ dL時尤為顯著.



      標本的運輸和儲存


      1)、標本需要在室溫下運送,因低溫會損傷血小板,活化因子Ⅶ和因子Ⅺ,使PT,APTT結(jié)果縮短

      2)、新采集的標本,最好在2h內(nèi)將血漿分離出來。


      3)、當(dāng)前不能做的標本,冷凍在-20℃的冰箱內(nèi)。


      4)、需要存放較長時間的標本冰凍存于-80℃的冰箱內(nèi)。

      5)、冰凍的血漿融化時不能靜置于室溫中逐漸融化,這樣會有纖維蛋白遇冷沉淀蛋白析出,應(yīng)放在37℃水浴中輕輕搖動,使其迅速溶化。


      溫度與時間的影響:

      凝血因子中,以因子Ⅴ和Ⅷ在離體后會隨時間的延長而變性失活,這種失活可隨溫度的升高而加速。從而導(dǎo)致標本因從采集到分析時間延長而使PT和APTT時間延長。

      標本存放的溫度和時間的不同,可影響凝血因子活性。有文獻記載,32℃保存血漿6h、12h、24h,Ⅷ因子活性可分別消失50%、60%、95%。即使保存在4℃也分別消失5%、55%、70%。APTT在存放后檢測結(jié)果與即時測定結(jié)果相比均有延長趨勢。

      有文獻報道Ⅴ因子活性在32℃,在6h、12h、24h分別消失25%、40%、80%,而在4℃則僅損失0%、5%、10%。

      血液離體即開始變化,隨存放方式和時間不同,凝血因子逐漸消耗或激活,特別是V、Ⅷ、Ⅸ因子消耗Ⅶ 因子的激活較為明顯.


      標本常見錯誤對凝血結(jié)果的影響


      1、引起凝固時間縮短的錯誤:
      (1)穿刺不熟練,多次穿刺造成組織因子釋放,觸發(fā)外源凝血途徑活化;
      (2)不適當(dāng)?shù)睦鋬龊腿诮庋獫{,造成因子Ⅶ的冷激活;
      (3)試管中的氣泡造成的溶血;
      (4)抗凝劑的量不準確。

      2、引起凝固時間延長的錯誤:
      (1)標本凝固造成凝血因子消耗;
      (2)不適當(dāng)?shù)睦鋬龊腿诮庋獫{造成凝血因子的降解;
      (3)抗凝劑的量不準確。

      3、引起APTT時間延長的錯誤:
      (1)標本中含有肝素;
      (2)標本管未蓋塞子而導(dǎo)致CO2丟失,因而血漿pH發(fā)生改變,pH 的變化引起因子Ⅴ的變化。

      4、引起APTT時間縮短的錯誤:
      (1)用玻璃管儲存血漿引起因子Ⅻ的激活;
      (2)標本針和試劑針位置偏移,位置偏移造成的樣本與試劑的量不準確。



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