母體染色體嵌合是導(dǎo)致NIPT性染色體非整倍體檢測誤診的重要原因
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母體染色體嵌合是導(dǎo)致NIPT性染色體非整倍體檢測誤診的重要原因 目前NIPT對性染色體非整倍體（SCAs）的檢測靈敏度和特異性顯著低于常染色體非整倍體的檢測。為探討母體染色體嵌合對NIPT性染色體非整倍體（SCAs）檢測不符的影響因素，該研究對187例NIPT SCAs檢測結(jié)果陽性的案例進(jìn)行了分析。結(jié)果顯示，其中16例（8.56%）是由母體染色體異?；蚯逗蠈?dǎo)致，這種異常會改變母血漿中X染色體的含量，進(jìn)而會影響母血漿中真實(shí)胎兒X染色體DNA片段的計算，最終引起假陽性，是導(dǎo)致NIPT SCAs 檢測靈敏度和特異性較低的一項(xiàng)重要原因。 表1：187例NIPT SCAs不符的前瞻性研究中母體X染色體的核型組成 （點(diǎn)擊圖片放大查看） 參考文獻(xiàn)：Wang Y, Chen Y, Tian F, et al. Maternal mosaicism is a significant contributor to discordant sex chromosomal aneuploidies associated with noninvasive prenatal testing. Clin Chem. 2014 Jan;60(1):251-9. 胎盤不同區(qū)域嵌合的不一致性是導(dǎo)致NIPT檢測誤診的一個主要的生物學(xué)風(fēng)險因素 由于NIPT所檢測的胎兒游離DNA來源于胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞，而非胎兒，正是由于這種胎盤和胎兒的差異導(dǎo)致了誤診的發(fā)生。而且迄今為止，所有的胎盤嵌合的研究中，胎盤組織不同區(qū)域嵌合的不一致性是導(dǎo)致NIPT檢測誤診的一個主要的生物學(xué)風(fēng)險因素。 研究1：胎盤為T21、T18和正常細(xì)胞的嵌合體，NIPT檢測為T21，核型分析確診為T18 孕婦22歲，孕16周進(jìn)行血清學(xué)篩查結(jié)果為T18高風(fēng)險（風(fēng)險值1/333）。孕17周采集母體外周血進(jìn)行NIPT檢測，檢測結(jié)果為T21陽性。后續(xù)的產(chǎn)前超聲顯示胎兒右心室雙出口、心室中隔缺損和肺動脈瓣狹窄。孕19周行羊水穿刺，胎兒核型顯示為T18陽性。夫婦雙方染色體核型正常。該孕婦于孕22周選擇引產(chǎn)。 對流產(chǎn)后的胎盤組織采集靠近胎兒面和靠近母親面的不同樣本，運(yùn)用測序方法對胎盤的這些部位進(jìn)行染色體拷貝數(shù)變異檢測，結(jié)果顯示，胎盤組織中T21、T18和正常細(xì)胞的平均比例分別為49.8%、34.8%和15.4%（見圖1）。 （點(diǎn)擊圖片放大查看） 圖1. 胎盤不同位置T21、T18嵌合比例檢測結(jié)果圖。提取T21 DNA樣本作為陽性對照。A圖顯示胎盤不同位置的T21嵌合比例；B圖顯示胎盤不同位置的T18嵌合比例。檢測樣本分別來源于臍帶中部（MUC）、胎兒面中心（CFS）、胎兒面中間（MFS）、胎兒面邊緣（EFS）、母面中心（CMS）、母面中間（MMS）和母面邊緣（EMS）及胎盤血管（BVP）。 參考文獻(xiàn)：Mao J, Wang T, Wang BJ, et al. Confined placental origin of the circulating cell free fetal DNA revealed by a discordant non-invasive prenatal test result in a trisomy 18 pregnancy. Clin Chim Acta. 2014 Jun 10;433:190-3. 研究2：胎盤母面T21極低比例嵌合，NIPT不能檢出 一位35歲的孕婦，生育一子后經(jīng)歷兩次自然流產(chǎn)，孕18周妊娠時選擇NIPT檢測，結(jié)果正常。孕24周超聲檢查顯示羊水增多，心臟回波灶在左心室。孕25周通過羊膜穿刺術(shù)進(jìn)行胎兒核型分析，結(jié)果顯示胎兒染色體核型為47,XY,+21。孕29周終止妊娠，獲得胎盤組織進(jìn)行檢測并證實(shí)胎盤嵌合。在胎兒的肝臟、心臟及臍帶中部及臍帶根部取樣，T21嵌合高于92%。相反，胎盤中心、胎盤母面中心和胎盤母面邊緣，T21嵌合分別為76%、51%和2.3%（見圖2）。 （點(diǎn)擊圖片放大查看） 圖2：胎兒及胎盤組織T21嵌合比例檢測結(jié)果圖。提取自11個白細(xì)胞樣本的基因組DNA作為正常對照（6個顯示為正常對照），T21 DNA樣本作為陽性對照。胎兒DNA來自胎兒心臟組織（HT）和肝臟組織（LT），胎盤DNA來源于胎盤臍帶根部（RUC）、臍帶中部（MUC）、胎盤中部（CP）、胎盤母面中心（CMS）、胎盤母面邊緣（EMS）。 參考文獻(xiàn)：Wang Y, Zhu J, Chen Y, et al. Two cases of placental T21 mosaicism: challenging the detection limits of non-invasive prenatal testing. Prenat Diagn. 2013 Dec;33(12):1207-10. 母體X染色體拷貝數(shù)變異（CNVs）也被認(rèn)為是導(dǎo)致NIPT性染色體非整倍體檢測誤診的重要因素 本研究對兩例NIPT性染色體非整倍體（SCAs）假陽性(胎兒核型分析結(jié)果正常）的孕婦，對母親白細(xì)胞進(jìn)行CNV-Seq檢測，結(jié)果顯示，案例SCA001的母親X染色體Xp22.31區(qū)段存在1.69Mb的微重復(fù)；案例SCA002的母親X染色體Xp22.31區(qū)段存在1.69Mb的微缺失（見圖3）。 （點(diǎn)擊圖片放大查看） 圖3：母親白細(xì)胞及母血漿X染色體CNV-Seq 檢測結(jié)果圖。上虛線表示100%X染色體增加，下虛線表示100%X染色體減少。紅色方框表示序列重復(fù)區(qū)域，黑色方框表示著絲粒。
參考文獻(xiàn)：Shaowei Wang,et al., Maternal X chromosome copy number variations are associated with discordant fetal sex chromosome aneuploidies detected by noninvasive prenatal testing.Clin Chim Acta. 2015 Apr 15;444:113-6. |
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