基因敲入可以在目的基因位置引入特定的突變或外源基因。比如在目的基因上引入點突變(模擬人類遺傳疾病模型) ;或將報告基因(如EGFP,mRFP,mCherry,mYFP,或LacZ等)通過同源重組的方式引入目的基因的特定位點,從而可以通過報告基因來跟 蹤目標基因的表達。也可以用報告基因取代小鼠本身的基因,使KO/KI同時發(fā)生。
應用 1、用于藥物篩選相關研究; 2、用于信號通路的研究; 3、用于示蹤的相關研究。
建系原則與流程 1、去除抗性基因 Neo:選擇陽性TurboKnockout KI小鼠與野生型小鼠雜交,獲得去除打靶載體中的Neo 基因的雜合子F1 代小鼠; 2、再挑選一對雜合子F1 代小鼠進行自交,通過 PCR 鑒定篩選得到去除Neo的F2代純合子KI小鼠。
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