細(xì)細(xì)品讀，文末有彩蛋

Samsung藥業(yè)在藥物開發(fā)過程中，分析了有效期從2015年3月到2019年12月多個(gè)批次的Herceptin原研藥。結(jié)果意外的發(fā)現(xiàn)，從有效期為2018年8月的批次開始，Herceptin的質(zhì)量參數(shù)出現(xiàn)了第一次偏移， Afucose%（無巖藻糖）比例從之初的8%左右降低至4.7%左右，隨之ADCC和FcγRIIIa也均減少了50%左右。隨后，從有效期為2019年6月的批次開始，Herceptin的質(zhì)量參數(shù)出現(xiàn)了第二次偏移，HW%（高甘露糖）比例從2.0%提高到5.0%左右，Afucose%恢復(fù)到6.0%以上（仍與8.0%左右有差距），HW%和Afucose％的總和基本恢復(fù)到原來10%左右水平，這樣ADCC功能小有恢復(fù)，但仍然只是有效期為2018年8月之前的80-90%。此外，值得注意的是在這兩次的偏移中，Galactosylation％均降至20%左右，比2018年8月之前的40%減少了一半左右。

▲  多批次Herceptin質(zhì)量概述

▲ 多批次Herceptin糖基化分布

▲  多批次Herceptin ADCC等生化功能

在兩次有關(guān)糖基化質(zhì)量參數(shù)偏移過程中，電荷異質(zhì)性的變化并不明顯。但值得注意的是，在有效期為2018年8月的批次之前，美國(guó)產(chǎn)的Hcerptin的酸性峰含量要高于歐洲產(chǎn)的。同時(shí)隨著第二次高甘露糖的質(zhì)量偏移，堿性峰的含量也有所增加，與早前筆者報(bào)道的有關(guān)電荷異質(zhì)性的規(guī)律類似（抗體藥物電荷異質(zhì)性研究進(jìn)展：堿性組分中分離出影響Fc功能的非巖藻糖化蛋白），當(dāng)然兩個(gè)維度的質(zhì)量屬性是否具有關(guān)聯(lián)性仍不可知。

▲  多批次Herceptin電荷異質(zhì)性數(shù)據(jù)

在兩次有關(guān)糖基化質(zhì)量參數(shù)偏移過程中，分子量大小的變化也不明顯。兩次糖基化質(zhì)量參數(shù)偏移過程，多聚體的含量似乎依次減少。

▲  多批次Herceptin分子量大小分布

Herceptin的質(zhì)量偏移源頭

Herceptin為什么會(huì)出現(xiàn)質(zhì)量偏移？通常這樣的質(zhì)量參數(shù)偏移可能來自于工藝轉(zhuǎn)移、產(chǎn)能增加和工藝改進(jìn)等引起的工藝變更，筆者進(jìn)一步在EMA官網(wǎng)查閱Herceptin審評(píng)數(shù)據(jù)。結(jié)果顯示，從2014年起，Herceptin共發(fā)生過三次原液生產(chǎn)的工藝變更，2014年9月和2016年2月的兩次可能會(huì)對(duì)產(chǎn)品的質(zhì)量、安全性和有效性產(chǎn)生顯著（Significant）的影響，而2016年9月這次影響很小（minor）。而Herceptin的產(chǎn)品有效期為三年，這兩次的工藝變更時(shí)間跟Samsung藥業(yè)的發(fā)現(xiàn)質(zhì)量偏移時(shí)機(jī)較為相符。

▲   Herceptin自2014年來原液工藝變更歷史

充滿爭(zhēng)議的工藝變更

值得注意的是這并不是第三方公司首次檢測(cè)發(fā)現(xiàn)原研廠家的質(zhì)量參數(shù)發(fā)生偏移，仿制藥巨頭Sandoz 早在2011年就在Nature Biotechnology發(fā)表了對(duì)有效期從2007年到2011年的三個(gè)品種Aranesp , Rituxan和Enbrel 的全面質(zhì)量分析結(jié)果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)三個(gè)品種在此期間都發(fā)生了較大的質(zhì)量參數(shù)偏移。

在藥物的生命周期過程中，基于工藝轉(zhuǎn)移、產(chǎn)能增加和工藝改進(jìn)等引起的工藝變更不可避免，而這些變更也通常會(huì)帶來產(chǎn)品質(zhì)量參數(shù)的變化， 如果能證明這些變更沒有影響到產(chǎn)品的有效性和安全性，監(jiān)管部門通常會(huì)在不改變產(chǎn)品標(biāo)簽（Product label）的情況下批準(zhǔn)這些變更。然而由于缺乏第三方的公開數(shù)據(jù)，致使關(guān)于工藝變更的討論通常停留在理論層面，并且充滿爭(zhēng)議。不知道是否考慮到自身作為類似藥的開發(fā)的敏感性，即使Sandoz 在發(fā)現(xiàn)這些原研產(chǎn)品的變更后，仍然很客氣指出他們的研究結(jié)果，一方面使關(guān)于工藝變更的討論從理論層面上升到特定產(chǎn)品層面（潛臺(tái)詞是監(jiān)管機(jī)構(gòu)都沒說什么，說明人家這樣的工藝變更是合理的，咱們也別操心，下次工藝變更跟著干就是了），另一方面也使公眾了解到了大分子生物藥物質(zhì)量控制的難點(diǎn)（潛臺(tái)詞是大分子藥物搞起來就是很難，這樣質(zhì)量參數(shù)遷移是可接受的 ）。

▲  2011年Sandoz發(fā)現(xiàn)多批次Rituxan質(zhì)量發(fā)生偏移

藥王Humira工藝變更一路暢通

如前文所述，產(chǎn)品質(zhì)量周期中，工藝變更在所難免，似乎越暢銷的藥工藝變更越多，至少銷量都是靠擴(kuò)大產(chǎn)能出來的。Humira 2016年的年銷售額超過160億美元，一方面自2004年來不斷擴(kuò)展適應(yīng)癥以增加標(biāo)簽，另一方面則來自源源不斷的工藝改進(jìn)、產(chǎn)能擴(kuò)充及產(chǎn)品有效期延長(zhǎng)，截止到2013年共進(jìn)行了21項(xiàng)不同程度的生產(chǎn)工藝變更。然而，藥王始終不改本色，保證著極為穩(wěn)定的產(chǎn)品質(zhì)量。

▲  Humira 工藝變更歷史

▲   Humira 工藝變更歷史中質(zhì)量參數(shù)

工藝變更對(duì)生物類似藥開發(fā)的挑戰(zhàn)

應(yīng)對(duì)產(chǎn)業(yè)升級(jí)，以上如Herceptin在工藝變更情況下如此的大質(zhì)量偏移是否可以接受暫且不講，對(duì)于生物藥的研發(fā)也存在諸多疑問。

1、既然原研如此大的質(zhì)量參數(shù)遷移都可以接受，那么Biosimilar step-wise的相似性研究是否等于打臉？

2、沒錯(cuò)，biosimilar的指導(dǎo)條例里為了規(guī)避風(fēng)險(xiǎn)，建議類似藥研究者要橫跨多個(gè)批次多個(gè)地區(qū)的原研藥進(jìn)行研究。多個(gè)批次中的原研藥沒有多大區(qū)別還好說，像Sandoz和Samsung這樣發(fā)現(xiàn)原研藥質(zhì)量發(fā)生遷移，到底該怎樣確定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)？更悲劇一點(diǎn)，如果臨床前或者更早期的時(shí)候跟原研的相似性極好，到關(guān)鍵III期臨床試驗(yàn)如果是因?yàn)樵泄に囎兏鼘?dǎo)致相似性不好又該怎么辦。（通常這種情況類似藥廠家很難找到原因，因?yàn)椴豢赡馨褍蓚€(gè)時(shí)間維度的原研藥進(jìn)行頭對(duì)頭對(duì)比）

3、目前基于這些研究結(jié)果，Sandoz和Samsung的口吻極其謹(jǐn)慎，因?yàn)槿绻缓迷袕S家會(huì)封鎖相關(guān)原研藥的出售，而這將是所有類似藥開發(fā)的噩夢(mèng)。目前幾個(gè)品種基于不同的策略已經(jīng)有不同原研藥管控。Humira的口子最大，你要多少我給你多少，早日助我彪入200億美元大關(guān)。而據(jù)悉Infliximab已經(jīng)封鎖了在華對(duì)于類似藥比對(duì)的銷售。第三方的監(jiān)測(cè)確實(shí)可以增加原研廠家的透明度，但不知道這樣的透明是否會(huì)給原本敏感的原研藥出售雪上加霜？

4、原研的質(zhì)量偏移尚且這么大了，類似藥又如何能實(shí)現(xiàn)Interchangable?

歐美工藝變更的理論條例更為完善

按照可能對(duì)產(chǎn)品安全性、有效性和質(zhì)量可控性產(chǎn)生的影響程度，施行變更分類管理，是國(guó)際通行的辦法，ICH Q5E是所有工藝變更的研究的基礎(chǔ)

• 美國(guó)FDA將變更分為三類：

  ?? 重大變更

  ?? 一般變更

  ?? 微小變更

• 歐盟將變更分為兩類：

  ?? Ⅰ類變更（ⅠA類微小變更、ⅠB類微小變更）

  ?? Ⅱ類重大變更

基于這些變更的研究者將完成特定的研究，F(xiàn)DA理論性較為精要，而EMA的不僅理論性更強(qiáng)，同時(shí)還有很多具體的案例指導(dǎo)。

國(guó)內(nèi)理論和案例的指導(dǎo)均缺乏

自“7.22”以來，國(guó)內(nèi)藥物生產(chǎn)核查監(jiān)管升級(jí)，經(jīng)歷臨床數(shù)據(jù)自查和一致性評(píng)價(jià)之后，監(jiān)管機(jī)構(gòu)開始2016年8月11日，CFDA發(fā)文公開征求《關(guān)于開展藥品生產(chǎn)工藝核對(duì)工作的公告（征求意見稿）》的意見。

同時(shí)指出藥品生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)于2016年12月31日前完成上述自查、研究驗(yàn)證、提交備案或補(bǔ)充申請(qǐng)等相關(guān)工作；藥品生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)于2016年12月31日前完成上述自查、研究驗(yàn)證、提交備案或補(bǔ)充申請(qǐng)等相關(guān)工作；未按時(shí)完成的，應(yīng)暫停生產(chǎn)或進(jìn)口。

2017年3月1日起，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局將組織專家對(duì)藥品生產(chǎn)企業(yè)開展飛行檢查。檢查中發(fā)現(xiàn)實(shí)際生產(chǎn)工藝與食品藥品監(jiān)管部門備案或核準(zhǔn)的生產(chǎn)工藝不一致的，其所生產(chǎn)的藥品按假藥論處,將依據(jù)《中華人民共和國(guó)藥品管理法》第七十三條的有關(guān)規(guī)定進(jìn)行處罰。

而相關(guān)工藝變更評(píng)估的則可依據(jù)《已上市中藥變更研究技術(shù)指導(dǎo)原則（一）》、《已上市化學(xué)藥品變更研究的技術(shù)指導(dǎo)原則（一）》、《生物制品生產(chǎn)工藝過程變更管理技術(shù)指導(dǎo)原則》。

而原文提到的《生物制品生產(chǎn)工藝過程變更管理技術(shù)指導(dǎo)原則》則是在2005年的發(fā)布的一則指導(dǎo)原則，指導(dǎo)原則根據(jù)變更情況，將變更內(nèi)容分類六類，類型分為三種。變更引起產(chǎn)品內(nèi)在質(zhì)量發(fā)生改變的，需要按新藥申報(bào)程序進(jìn)行申報(bào)為I類，請(qǐng)參考《藥品注冊(cè)管理辦法》附件4藥品補(bǔ)充申請(qǐng)注冊(cè)事項(xiàng)及申報(bào)資料要求；變更可能對(duì)產(chǎn)品的安全和有效性有影響的為II類，需報(bào)CFDA審批；一般不影響產(chǎn)品安全性和有效性的為III類，需報(bào)CFDA備案。

▲   生物制品生產(chǎn)工藝過程變更管理技術(shù)指導(dǎo)原則

需要指出的是，該條例無論從時(shí)效性和指導(dǎo)性方面均有一定程度滯后，同時(shí)缺乏更具體的指導(dǎo)案例研究。近10年來，國(guó)內(nèi)生物藥業(yè)增速明顯，產(chǎn)業(yè)升級(jí)加快，目前國(guó)內(nèi)存在多方面的工藝變更需求，可以說工藝變更的理性指導(dǎo)迫在眉睫。

而值得注意的是，2014年8月舉行的CFDA藥品質(zhì)量管理夏季研討會(huì)上，CDE曾明確提出過生物制品CMC變更技術(shù)指導(dǎo)原則實(shí)施計(jì)劃，并且分享過相關(guān)工藝變更的實(shí)施案例。但原定于2014底完成的指導(dǎo)條例至今仍未見面，是否基于其它優(yōu)先級(jí)更高的事務(wù)而受擱置仍不可知。

▲  原生物制品CMC變更技術(shù)指導(dǎo)原則實(shí)施計(jì)劃

基于科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步，生產(chǎn)條件的持續(xù)改變，政策法規(guī)的升級(jí)，臨床和市場(chǎng)需要的滿足，生物制品的變更將貫穿于藥物研發(fā)、生產(chǎn)和流通的整個(gè)產(chǎn)品周期中。質(zhì)量提升無止境，工藝變更永遠(yuǎn)在路上。

參考文獻(xiàn)

• Drifts in ADCC-related quality attributes of Herceptin?: Impact on development of a trastuzumab biosimilar

• Acceptable changes in quality attributes of glycosylated biopharmaceuticals

• Consistency of quality attributes for the glycosylated monoclonal antibody Humira (adalimumab)

• EMA：WC500049820

• CFDA:生物制品生產(chǎn)工藝過程變更管理技術(shù)指導(dǎo)原則