蛋白質翻譯后修飾對蛋白質的功能有著重要作用。丙二酰修飾是最近新發(fā)現(xiàn)的、進化保守的一種修飾。該修飾以丙二酰-CoA為底物，發(fā)生在賴氨酸殘基上，通過破壞靜電相互作用（由+1變?yōu)?1）而調節(jié)蛋白結構與功能，但對于該修飾在生理功能上的研究依舊較少。研究發(fā)現(xiàn)，免疫細胞在執(zhí)行其功能時，代謝過程會發(fā)生改變，巨噬細胞就是其中的一種。

作者選擇骨髓來源巨噬細胞（SMDMs）進行研究。研究發(fā)現(xiàn)，在脂多糖（LPS）誘導24h后，丙二酰-CoA的含量顯著上升。通過使用抗賴氨酸丙二酰修飾抗體（anti-mal-K），作者發(fā)現(xiàn)在全蛋白質水平上，賴氨酸丙二酰修飾明顯上升。

作者通過使用抗體富集、HPLC-MS/MS方法，對LPS處理前后賴氨酸丙二?；揎椀鞍走M行質譜定性鑒定和定量分析。其中GAPDH引起了作者的注意。作者發(fā)現(xiàn)，在LPS處理過程中，GAPDH的含量沒有發(fā)生顯著變化，但是其中的賴氨酸丙二?；揎椝缴仙?，并且通過質譜實驗，發(fā)現(xiàn)K213在LPS誘導下，由原本的乙?；揎椬?yōu)楸；揎?，并且該位點與GAPDH的活性中心和RNA結合區(qū)域較近。

作者發(fā)現(xiàn)，LPS誘導后，GAPDH的催化活性顯著上升，從而糖酵解過程得以增強，IL-1β含量提高。若將K213為突變?yōu)橐阴；揎椖M的谷氨酰胺殘基Q（K213Q），GAPDH活性沒有明顯變化，若將其突變?yōu)楸；揎椖M的谷氨酸殘基E（K213E），則催化活性顯著升高。

除了催化活性外，作者該檢測GAPDH中RNA結合能力的改變。TNFα是GAPDH的結合RNA。作者通過使用抗體富集GAPDH，并使用qRT-PCR檢測其結合的TNFα RNA含量的變化。作者發(fā)現(xiàn)，在LPS誘導后，GAPDH結合的TNFα含量顯著降低，并且同時細胞中TNFα表達量增強。若使用HEK293T細胞，使用K213Q和K213E突變體檢測GAPDH對TNFα結合能力的變化，作者發(fā)現(xiàn)，K213E結合能力顯著較低。

因此作者結合上述結果和文獻報告，提出了一種新的GAPDH丙二?；揎椊閷У木奘杉毎庖哒{節(jié)機理：在LPS誘導下，巨噬細胞中，GAPDH K213位被丙二酰化修飾，催化活性提高，從而增強了糖酵解過程，增加IL-1β含量，同時，與TNFα mRNA結合能力減弱，TNFα表達量得以提高，從而兩個過程共同促進了炎癥的發(fā)生。