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點(diǎn)擊上方藍(lán)色小字↑↑↑----“干細(xì)胞者說”，加星標(biāo)，長期關(guān)注本科普號。 人生小哲理干細(xì)胞者說 不貶不褒 如實(shí)陳述 方為科普之道 正文
來源：賽默飛 什么是干細(xì)胞？ 入門者可以自學(xué)下圖 進(jìn)階版可學(xué)習(xí)下圖 圖1.誘導(dǎo)多潛能干細(xì)胞 (iPSC) 和胚胎干細(xì)胞 (ESC)的自我更新和分化形成的新細(xì)胞類型 目前鑒定干細(xì)胞的主要方法有哪些呢？ 一般有三種：傳統(tǒng)AP 染色鑒定形態(tài)、核酸方法鑒定（qPCR 檢測基因表達(dá)、染色體核型分析、轉(zhuǎn)座因子分析、DNA 甲基化分析），還有基于抗體的蛋白鑒定方法（如免疫熒光、免疫印跡、流式細(xì)胞術(shù)等應(yīng)用）。 每種干細(xì)胞的經(jīng)典標(biāo)志物有哪些？ 鑒定每種類型的干細(xì)胞，首先要知道對應(yīng)的標(biāo)志物有哪些。以下整理出每種類型細(xì)胞對應(yīng)的經(jīng)典marker和部分抗體。 為了維持未分化的干細(xì)胞狀態(tài)，iPSC和ESC均需要關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)，如Nanog和OCT4，它們會調(diào)節(jié)對細(xì)胞分裂、分化和發(fā)育至關(guān)重要的基因。除了這些轉(zhuǎn)錄因子之外，通常PSC還會表達(dá)一組特定的細(xì)胞表面蛋白（如TRA-1-60、TRA-1-81、SSEA3和SSEA4）。對這些標(biāo)志物的檢測是鑒定iPSC和ESC的第一步。一般使用抗體對這些多能性marker進(jìn)行免疫熒光染色。左：DyLight 488標(biāo)記的抗SSEA5（貨號MA1-144-D488，綠色）和DyLight 650標(biāo)記的抗SSEA4（貨號MA1-021-D650，紅色）。中：DyLight 488標(biāo)記的抗Lin28（MA1-016-D488）。右：DyLight 650標(biāo)記的抗Sox20 （MA1-014-D650）。細(xì)胞核DNA使用Invitrogen DAPI（貨號D1306）。表1: 常用多能干細(xì)胞標(biāo)志物的抗體PSC有可能分化成以下三個(gè)胚胎胚層的細(xì)胞：外胚層、中胚層和內(nèi)胚層，這些胚層可以進(jìn)一步發(fā)育成各種分化的細(xì)胞類型。表2：代表性內(nèi)胚層、中胚層、外胚層標(biāo)志物 多能干細(xì)胞會分化成神經(jīng)譜系細(xì)胞，包括神經(jīng)干細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞、少突細(xì)胞和神經(jīng)元。 圖3. PSC分化為神經(jīng)譜系的路徑
表3.神經(jīng)干細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元標(biāo)志物
造血干細(xì)胞（HSC）是多能細(xì)胞，可以生成血液中的所有細(xì)胞類型，包括B和T淋巴細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、樹突細(xì)胞、單核細(xì)胞、血小板和紅細(xì)胞。HSC非常小并且是非貼壁細(xì)胞，這使得它們很難純化或通過顯微鏡觀察。靜止?fàn)顟B(tài)時(shí)，HSC可見于紅骨髓。通常用流式細(xì)胞術(shù)鑒定HSC表面抗原，一般要用10至14個(gè)抗體配色組合。重編程技術(shù)和人PSC的造血分化的最新進(jìn)展為研究造血發(fā)育和模擬血液疾病創(chuàng)造了全新的機(jī)會。
圖4. 造血干細(xì)胞分化示意圖
表4.代表性造血干細(xì)胞標(biāo)志物
間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）是多能細(xì)胞，可以分化成許多細(xì)胞類型，包括骨骼、脂肪、軟骨、肌肉和皮膚。MSC最初是從骨髓樣本中分離出來的，但最近它們已經(jīng)在許多其他類型的組織中被發(fā)現(xiàn)，生成一個(gè)具有高分化可能性的異質(zhì)且豐富的細(xì)胞群。MSC在治療各種疾病（比如心血管疾病和克羅恩?。┲械目赡苄允悄壳案杉?xì)胞研究的一個(gè)熱門課題。
圖5.間充質(zhì)干細(xì)胞的分化可能性 根據(jù)國際細(xì)胞治療協(xié)會（ISCT）提出的基于體外培養(yǎng)細(xì)胞特征的標(biāo)準(zhǔn)，MSC不表達(dá)CD34、CD45、CD14、HLA-DR、CD11b和CD79a，表達(dá)表面標(biāo)記物CD73、CD90和CD105。 體內(nèi)研究表明，MSC的陽性指標(biāo)是CD146、Stro-1、CD90、CD105、CD44和CD73，陰性指標(biāo)是CD45、CD11b和CD14。
表5.間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)志物
圖6. 體外PSC分化以產(chǎn)生β細(xì)胞和肝細(xì)胞樣細(xì)胞的示意圖
表6. 胰腺和肝臟細(xì)胞系標(biāo)志物 查看完整干細(xì)胞標(biāo)志物，輸入網(wǎng)址：www.thermofisher.com /stemcellabs，即可瀏覽，或免費(fèi)下載干細(xì)胞研究抗體海報(bào)。
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