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      重組SUMO酶

       friendbio 2021-02-25

      產(chǎn)品貨號(hào): :FrdE0007

      儲(chǔ)存溫度: -20

      來(lái)源 : E.coli。

      1. 產(chǎn)品簡(jiǎn)介

      SUMO蛋白酶識(shí)別完整的含有100個(gè)氨基酸的SUMO(Small Ubiquitin-like Modifier)標(biāo)簽蛋白,并能高效地把SUMO從融合蛋白上切割下來(lái)。與EK和TEV等蛋白酶的識(shí)別位點(diǎn)相比,由于其識(shí)別序列長(zhǎng),所以SUMO蛋白酶酶切反應(yīng)有很高的特異性,且在較寬范圍的反應(yīng)環(huán)境體系中保持較高的活力,例如溫度(4-30℃)、pH(5.5-9.5)等。SUMO蛋白酶還具有多聚His標(biāo)簽,便于使用親和層析的方法,去除SUMO蛋白酶,純化目的蛋白。

      2. 產(chǎn)品特性

      中文別名(Chinese synonym)

      SUMO蛋白酶

      英文別名(English synonym)

      SUMO Protease

      來(lái)源(Source)

      大腸桿菌表達(dá)

      標(biāo)簽(label)

      多聚His標(biāo)簽

      純度(Purity)

      經(jīng)SDS-PAGE及HPLC分析,純度>   90%

      分子量(Molecular weight)

      26.55 kDa

      緩沖液組分(Buffer)

      500 mM Tris-HCl, pH 8.0、2% Igepal (NP-40)、1.5 M NaCl、10 mM DTT

      活力單位:30℃,SUMO Protease 1小時(shí)酶切2ug含有酶切位點(diǎn)的融合蛋白,酶切效率達(dá)85%以上所需的酶量定義為1個(gè)酶活力單位,即1U。

      3. 使用方法

      3.1. 在EP管中配制如下反應(yīng)體系(建議)

      組分

      體積

      融合蛋白 

      20 μg

      10X SUMO Protease Buffer 

      20 μL

      ddH2O 

      to 190 μL

      SUMO Protease

      10 μL

      Total volume

      200 μL

      3.2. 30℃孵育,在0.5、1、2、3小時(shí)分別吸出30 μL上述反應(yīng)液,置于單獨(dú)的EP管中。

      3.3. 向上述EP管中加入30 μL 2×SDS Loading Buffer,置于-20℃。

      3.4. 樣品全部反應(yīng)完畢后,樣品煮沸5 min,取40 μL進(jìn)行SDS-PAGE分析。確定最佳反應(yīng)時(shí)間。

      【注】如融合蛋白要求低溫處理,可將反應(yīng)液置于4℃,延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間,并增加SUMO酶用量,以保證酶切效果。

      表1. 不同溫度下SUMO蛋白酶切活性

      反應(yīng)時(shí)間(h)

      不同溫度下剪切活性(%)

      4

      16

      25

      30

      0.5

      48

      73

      83

      88

      1

      60

      87

      90

      93

      2

      71

      94

      94

      95

      3

      74

      95

      95

      95

      4. 儲(chǔ)存條件

      長(zhǎng)期儲(chǔ)存于-80℃,或解凍后保存于-20℃。

      5. 產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

      無(wú)動(dòng)物源性:重組生產(chǎn),無(wú)外源性的病毒污染,生產(chǎn)過(guò)程不使用任何動(dòng)物源原料。

      質(zhì)量穩(wěn)定:批量生產(chǎn),可保證穩(wěn)定連續(xù)的批次生產(chǎn);產(chǎn)品批次間無(wú)差異,質(zhì)量穩(wěn)定。

      純度高:比活高;宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求。

      *本試劑僅供實(shí)驗(yàn)室研究使用

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