1.超級(jí)核酸酶使用方法

1.1大腸桿菌或者其他細(xì)菌樣本處理

細(xì)菌離心收集后，用10倍體積的TBS緩沖液重懸，菌體破碎后，每毫升菌體裂解液加入1-2微升超級(jí)核酸酶(若添加終濃度為5-10mM的Mg2+，則效果更佳)，室溫孵育30分鐘，收集裂解液，離心取上清即可進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)。

1.2細(xì)胞樣本處理

1)貼壁細(xì)胞去除培養(yǎng)基，用PBS洗后，100微升RIPA裂解液(或其他哺乳動(dòng)物細(xì)胞裂解液)加1-5微升超級(jí)核酸酶，室溫孵育30分鐘，收集裂解液，離心取上清即可進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)。

2)懸浮細(xì)胞離心收集后，在離心管中加100微升RIPA裂解液(或其他哺乳動(dòng)物細(xì)胞裂解液)加1-5微升超級(jí)核酸酶，室溫孵育30分鐘，收集裂解液，離心取上清即可進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)。

1.3組織樣本處理

將30-100毫克動(dòng)物或者植物組織研磨充分后，加入100-200微升裂解液，同時(shí)加入加1-5微升超級(jí)核酸酶，室溫孵育30分鐘，收集裂解液，離心取上清即可進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)。

2.超級(jí)核酸酶使用注意事項(xiàng)

1)避免使用磷酸鹽緩沖液。

2)含大量蛋白、細(xì)胞壁、其它鹽分的粗制品，對(duì)該酶活性有部分抑制作用，使用時(shí)需要增加酶的用量。

3)超級(jí)核酸酶有超強(qiáng)的試劑兼容性如:6M urea，0.1 M Guanidine HCl，0.4%Triton X-100，0.1%SDS，1 mM EDTA，1 mM PMSF，100mM DTT，當(dāng)超過(guò)該濃度時(shí)核酸酶活性會(huì)降低，可通過(guò)增加核酸酶量使活性得到補(bǔ)償。