作者：廣東省藥學(xué)會 廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 梁思焜

CD47是一種廣泛表達的跨膜糖蛋白，也稱為整聯(lián)蛋白相關(guān)蛋白（IAP），分子量52 kDa。該蛋白具有免疫球蛋白可變的N端結(jié)構(gòu)域、5個跨膜結(jié)構(gòu)域和一個短的C端胞內(nèi)尾，胞內(nèi)尾部有四種可變不同剪接異構(gòu)體，從而形成4個亞型。CD47亞型2主要在造血細胞、血管內(nèi)皮細胞和上皮細胞中表達，1亞型在角質(zhì)形成細胞中表達，3和4亞型在神經(jīng)元細胞、腸粘膜細胞和睪丸細胞中均有表達。

CD47通過與免疫細胞上信號調(diào)節(jié)蛋白α（SIRPα）的N末端結(jié)合，發(fā)出“別吃我”的信號，抑制巨噬細胞的吞噬作用，從而保護健康細胞不被免疫系統(tǒng)破壞。

從結(jié)構(gòu)上講，SIRPα包含三個細胞外的免疫球蛋白超家族結(jié)構(gòu)域，包括一個N末端的和CD47結(jié)合的可變區(qū)和兩個C1型的免疫球蛋白超家族結(jié)構(gòu)域，然后再通過一個跨膜的螺旋結(jié)構(gòu)域和胞內(nèi)的抑制性信號結(jié)構(gòu)域連接。

CD47蛋白信號通路及作用

CD47是個多功能分子：

與CD47配體信號調(diào)節(jié)蛋白(signal-regulatoryprotein,SIRP)-α、SIRP-y結(jié)合并與整合蛋白相互作用，調(diào)節(jié)細胞間通訊。CD47與巨噬細胞表面的SIRP-α結(jié)合，激活酪氨酸磷酸化酶抑制肌球蛋白在巨噬細胞突觸膜下裝配位點的聚集，作為“別吃我“信號。CD47缺失會導(dǎo)致老齡或受損細胞被吞噬。但其也存在于癌細胞表面并且表達更為廣泛，癌細胞利用了CD47與巨噬細胞的作用機制，逃脫巨噬細胞吞噬，讓機體在抵御癌細胞的第一道防線中就失去了陣地。

與凝血酶反應(yīng)蛋白-1結(jié)合，參與細胞與胞外基質(zhì)的相互作用。

與凋亡、增殖、黏附、遷移等細胞學(xué)過程密切相關(guān)，在免疫及心血管反應(yīng)中扮演關(guān)鍵角色，是心血管疾病治療的新靶標。

與腫瘤免疫逃逸相關(guān)，對腫瘤細胞的微環(huán)境有重要影響。

巨噬細胞的免疫檢查點：CD47-SIRPα

CD47-SIRPα（signal-regulatory protein α）信號通路又被稱為“別吃我”信號，最早于1990年發(fā)現(xiàn)。SIRPα是第一個被發(fā)現(xiàn)的SIRP家族的蛋白成員，表現(xiàn)在髓性細胞，包含所有形態(tài)的巨噬細胞。一直到1999年利用單克隆抗體（CC2C6）及利用COS7細胞表現(xiàn)鼠腦cDNA庫，SIRPα與CD47之間的交互作用才被證實。

巨噬細胞是先天性免疫的重要組成部分，是一種“專業(yè)”的吞噬細胞，在人體內(nèi)可以通過吞噬衰老和死亡細胞起到人體清道夫的作用。在腫瘤組織中巨噬細胞可以通過吞噬作用清除腫瘤細胞，但是吞噬作用被CD47-SIRPα免疫檢查點通路抑制；當CD47和SIRPα結(jié)合后可以引起ITIM酪氨酸的磷酸化。磷酸化的ITIM隨后募集并激活酪氨酸磷酸酯酶SHP-1/2蛋白，活化后的酪氨酸磷酸脂酶進一步將細胞內(nèi)的一系列蛋白去磷酸化，失去相關(guān)的生物學(xué)功能最終起到抑制巨噬細胞吞噬功能的效果。這種功能在正常的人體環(huán)境里可以用于標記“自我”和“非我”，避免引起“誤傷”。最初，研究者將CD47缺陷的小鼠的紅細胞過繼到正常小鼠體內(nèi)，這種紅細胞很快被野生型受體小鼠的脾臟巨細胞清除，由此CD47的“Don’t eat me”功能被逐漸的揭示。

當被吞噬的腫瘤細胞被體內(nèi)的IgG通過調(diào)理作用結(jié)合后，IgG的Fc結(jié)構(gòu)域和巨噬細胞表面FcR結(jié)合，激活巨噬細胞。FcR信號通路的激活會在腫瘤細胞和吞噬細胞之間形成一個“吞噬突觸”，在吞噬突觸內(nèi)依次會發(fā)生三件事情：腫瘤細胞和吞噬細胞的接觸、巨噬細胞的偽足包圍腫瘤細胞，最終完成對腫瘤細胞的吞噬作用；目前的研究結(jié)果表明，CD47-SIRPα主要通過阻斷巨噬細胞偽足的形成來實現(xiàn)其免疫檢查點功能。

靶向CD47-SIRPα的腫瘤治療

由于上述的CD47-SIRPα在巨噬細胞中的免疫檢測點作用，在理論上該靶點可以作為腫瘤治療的通路。

首先，阻斷該通路后，可以打破巨噬細胞的免疫抑制，誘導(dǎo)巨噬細胞對腫瘤細胞的吞噬作用。

第二，除巨噬細胞外CD47-SIRPα也會抑制DC細胞的功能，阻斷該通路后可以促進DC細胞對腫瘤細胞的攝取，有利于腫瘤抗原的遞呈。

第三，抗CD47的抗體的Fc部分可以觸發(fā)體內(nèi)的NK細胞通過ADCC和CDC作用對腫瘤細胞進行殺傷。

第四，抗CD47的抗體可以誘導(dǎo)腫瘤細胞的Caspase非依賴性細胞凋亡。

CD47抗體針對多種適應(yīng)癥包括非霍奇金淋巴瘤(NHL)和急性髓性白血病(AML)等血液系統(tǒng)惡性腫瘤，以及結(jié)腸直腸癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌和頭頸癌等實體瘤。

CD47的激活似乎可以普遍地促進細胞遷移。現(xiàn)已在多種腫瘤模型中證明，阻斷CD47的功能可以抑制腫瘤轉(zhuǎn)移?？贵w對CD47的阻斷可以減少黑色素瘤、前列腺癌和卵巢癌衍生細胞的遷移和對膠原蛋白Ⅳ的趨化性。

隨著對CD47分子的研究越來越多，人們對其功能的認識也越來越深入。隨著研究的不斷深入，越來越多的靶向免疫檢查點CD47-SIRPα的單一療法和聯(lián)合療法進入臨床試驗階段。CD47在腫瘤免疫中的研究其有廣泛的前景，它作為“別吃我“信號促使腫瘤細胞逃逸巨噬細胞的吞噬作用，這成為腫瘤發(fā)生發(fā)展的新機制，也為腫瘤免疫治療探索了一條新的有效途徑。這反映了目前臨床上對新型、安全、有效的腫瘤免疫治療藥物和技術(shù)的強烈需求。

一審專家：廣東省藥學(xué)會 廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 魏理

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