與其他病毒載體相比而言,慢病毒載體攜帶的DNA能整合到宿主細胞基因組中,因此其介導的基因表達或RNAi干擾作用持續(xù)且穩(wěn)定,隨細胞基因組的分裂而分裂,并可感染非分裂的細胞。 慢病毒系統(tǒng)主要應用于以下研究: 1.對于較難轉染的細胞如原代細胞、干細胞、不分化的細胞等,能大大提高目的基因轉染效率,增加目的基因/RNAi基因的效率。 2. 將目的基因/RNAi基因轉入細胞/動物組織,以期獲得長期表達。 3. 構建穩(wěn)定表達目的基因/蛋白/RNAi的細胞系,再用ex vivo的方法導入動物體內。 4. 慢病毒介導的基因治療 5. 慢病毒介導的轉基因動物 6. 慢病毒介導的基因敲除 7. 藥物研究:構建表達受體蛋白穩(wěn)定表達的細胞系,研究藥物的作用。 二.慢病毒系統(tǒng)應用的典型案例解析: 1. 細胞穩(wěn)轉株的構建應用 細胞:E1持續(xù)表達的293T細胞系,慢病毒pTYF-EF1α-eGFP(1000 viral genomes per cell),轉導后的細胞以1:10的比例每3天傳代1次。在病毒感染9周E1仍持續(xù)高效表達。(PMID: 26005375 PMCID: PMC4441065 DOI: 10.7150/ijms.11270) ![]() ![]() 2. 慢病毒基因治療應用 通過向杏仁核內腦立體定位注射慢病毒系統(tǒng)遞送的Akap150 shRNA(lenti-Akap150 shRNA),注射體積~0.5ul濃縮的慢病毒溶液。能有效降低Akap150蛋白的表達水平達58%以上。有效緩解小鼠出現慢性束縛造成的焦慮/抑郁樣行為。(PMID: 31076080 DOI: 10.1016/j.biopsych.2019.03.967) 3. 慢病毒介導的基因敲除應用 MOI=10~100, 靶標基因:唾液上皮外植體中的Itgb1。(PMID: 37222511 PMCID: PMC10234494) 今天的分享就到這里了,希望通過本期的分享能夠讓大家對于慢病毒系統(tǒng)的應用有更深入的了解。也特別歡迎大家通過公眾號菜單欄“更多—讀者的話”欄目留言,您的問題也許就是我們下期分享的主題。希望我們能一起成長,共同進步! ![]() |
|
來自: 新用戶4064dVjo > 《待分類》